【题目】pBV220载体是我国预防医学科学院病毒研究所自行构建并广泛应用的大肠杆菌温控载体,大小为3 666 bp(bp表示碱基对),其结构如下图所示。图中PRPL是启动子,rrB是基因转录终止信号,Ampr是氨苄抗性基因,ori是质粒复制起点,EcoR Ⅰ、Hind Ⅲ等为各种限制性内切酶。请据图回答下列有关问题:
(1)基因工程的核心步骤是____________________________________。
(2)从图中可看出,pBV220作为运载体具备的条件有________、________。
(3)该质粒可被A、B、C三种限制性内切酶同时切割。单独A切割得一条长链,单独B切也得一条长链,A和C同时切割得2个500 bp和1个2 666 bp片段,B和C同时切割得2个250 bp和1个3 166 bp片段。若以A的切割位点为计算起点,则B的切割位点与A点最短长度为________,C的两个切割位点与A点的最短距离分别为________、________
(4)PR和PL都是启动子,pBV220载体构建过程中把两个启动子串联在一起,形成了双启动子,双启动子的作用可能是________。温控基因CIts857编码对温度敏感的CIts蛋白,CIts在30℃时具有抑制启动子的活性,在42℃时失活。促进工程菌目的基因表达的诱导温度为________。
【答案】 构建目的基因的表达载体 多个限制性内切酶的切割位点 标记基因 750 bp 500 bp 1 000 bp 保证目的基因的高水平表达(高效转录) 42℃
【解析】本题考查基因工程,要求考生理解基因工程的操作程序,明确运载体必需具备的条件,能根据题意计算质粒中的不同的酶切位点的位置关系,进而分析、解答问题。
(1)基因工程的核心步骤是构建目的基因的表达载体。
(2)从图中可看出,pBV220作为运载体具备的条件有多个限制性内切酶的切割位点(便于目的基因的插入)、具有标记基因即氨苄抗性基因Ampr(便于鉴定和筛选含有目的基因的受体细胞)。
(3)单独A切割得一条长链,单独B切也得一条长链,A和C同时切割得2个500bp和1个2666bp片段,B和C同时切割得2个250bp和1个3166bp片段,这说明该质粒上有一个A酶切割位点、一个B酶切割位点、2个C酶切割位点;A和C同时切割得2个500bp和1个2666bp片段,说明A和C酶的一个切点之间的长度为500bp;B和C同时切割得2个250bp和1个3166bp片段,说明B和C酶的一个切点之间的长度为250bp;若以A的切割位点为计算起点,则B的切割位点与A点最短长度为500+250=750bp,C的两个切割位点与A点的最距离分别为500bp、1000bp。
(4)PR和PL都是启动子,pBV220载体构建过程中把两个启动子串联在一起,形成了双启动子,双启动子的作用可能是保证目的基因的高水平表达(高效转录);温控基因CIts857编码对温度敏感的CIts蛋白,CIts在30℃时具有抑制启动子的活性,在42℃时失活,因此要促进工程菌目的基因表达就要使CIts蛋白失活,即促进工程菌目的基因表达的诱导温度为42℃。
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【题目】为了验证动物体内甲状腺激素分泌的负反馈调节机制,某同学设计了如下实验步骤:
第一步:取9只兔子,分别给每只兔子注射含放射性的碘溶液。
第二步:将上述实验兔子随机平均分为A、B、C三组。
第三步: 。
第四步:向A组注射一定量的无放射性的甲状腺激素溶液,向B组注射等量的无放射性的促甲状腺激素溶液,向C组注射 。
第五步:2天后,分别测定三组兔子甲状腺中碘的放射量,记录并计算平均值。
回答下列问题:
(1)改正实验步骤第一步中的两处不妥当之处:①___________;②___________。
(2)补齐实验中的步骤:第三步:_________________________________。第四步:_______________________________________________________。
(3)请设计一张本实验的数据记录表。
(4)预期实验结果:第四步注射以后,由于负反饿调节机制,A组兔子体内下丘脑分泌的促甲状腺激素释放激素和垂体分泌的促甲状腺激表分泌量减少,导致甲状腺激素合成减少,所以A组兔子甲状腺中放射性___________(强、中、弱);B组兔子体内___________合成增加,所以B组兔子甲状腺中放射性_______(强、中、弱);C组兔子甲状腺中放射性 ___________(强、中、弱)。
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【题目】植物细胞的叶绿体在光照条件下可以消耗一定量的02,这属于植物细胞光呼吸的重要环节,如图所示为植物细胞光合作用和光呼吸的部分过程。据图回答下列问题:
(1)图中加氧反应发生的场所是____________;已知光合作用的中间产物有C3,则光呼吸对应的中间产物有________________________。
(2)研究发现,催化羧化反应和加氧反应的是同一种羧化酶,而且C02和02会竞争此酶的同一活性位点,当细胞中02浓度升髙时,羧化反应会____________,从而导致植物积累有机物的速率____________;对于绿色植物而言,光合作用、细胞呼吸和光呼吸三种生理过程,只能在光下进行的有:______________。
(3)若在理想状态下,绿色植物的叶肉细胞不进行光呼吸,则将理想状态下的一株植物移至具有高浓度02 的环境中,则其叶肉细胞的叶绿体中C5含量将____________(填“升高”或“降低”)。
(4)若将植物密闭在无02、但其他条件适宜的小室中,照光培养一段时间后,发现植物的有氧呼吸增加, 原因是____________________________________。
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【题目】如图为白化病遗传系谱图(有关基因用A、a表示),请据图回答:
(1)该遗传病是_________(“显性”或“隐性”)遗传病.
(2)Ⅱ2和Ⅲ1的基因型分别为_________、_________.
(3)Ⅲ2是纯合子的概率为_________,Ⅲ3的基因型为_________.
(4)若Ⅲ2和Ⅲ3婚配,后代患白化病的可能性为_________.
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【题目】“生物导弹”是免疫导向药物的形象称呼,由单克隆抗体与药物配合而成。单克隆抗体能自动导向,在生物体内与特定目标细胞或组织结合,并由其携带的药物产生治疗作用。单克隆抗体的制备过程如下图所示,分析回答下列问题:
(1)图中A过程是从小鼠的脾脏中取得____细胞,提取该细胞之前,给小鼠注射的特定物质相当于______;B过程得到的杂交瘤细胞的特点是__________________。
(2)体外培养杂交瘤细胞的培养基与用于植物组织培养的培养基从培养基的成分来看,前者培养基中除了添加必要的营养物质外还需要加入含天然成分的____________。
(3)特异性抗体也可以通过常规方法来制备:向动物反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物的血清中分离所需抗体。与这种常规方法相比,单克隆抗体具有________________等优点(答出三点即可)。制备单克隆抗体的过程中至少需要____次对细胞的筛选。
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【题目】下列有关细胞呼吸的说法中,正确的是
A. 真核细胞都能进行有氧呼吸
B. 原核细胞无线粒体,不能进行有氧呼吸
C. 空气中的病毒一般进行有氧呼吸
D. 进行有氧呼吸的细胞中肯定含有与有氧呼吸有关的酶
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