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    7．对棉纤维基因GhRACK1的正常启动子P进行改造，获得了P1、P2、P3、P4缺失体．科研人员对正常启动子P及其4种缺失体（P1-P4）进行了实验研究．
    （1）首先利用PCR技术扩增正常启动子P，方法如图1．

    ①不能直接根据片段Ⅰ扩增出正常启动子P，因为正常启动子P左侧序列未知．
    ②利用Bgl II和DNA连接酶处理使片段Ⅰ成为环状DNA．
    ③将环状DNA用Msc I酶处理，得到片段Ⅱ．欲扩增出正常启动子P，需选用的引物组合为C和B．
    （2）利用有关酶对正常启动子P进行切割，得到不同程度缺失体（P1-P4），图2表示正常启动子P缺失示意图．

    （3）利用正常启动子P及其4种缺失体（P1-P4）分别构建了基因表达盒，如图3所示．

    （4）再将5种基因表达盒分别转入相同质粒，构建相应的植物表达载体．然后将其导入农杆菌，最后导入烟草细胞中．用含有卡那霉素的培养基对烟草细胞进行筛选，分别获得了含有正常启动子P及其4种缺失体（P1-P4）的转基因烟草．将植物组织浸入适量X-Gluc溶液中，观察烟草细胞gus基因是否表达，实验结果如下表．
    根叶花粉
    正常启动子P幼根+根毛+--
    P1+++
    P2+++
    P3+++
    P4+++
    有蓝色：+无蓝色：-
    如果烟草细胞中gus基因成功表达，则细胞呈现蓝色．实验结果表明正常启动子P驱动gus基因在幼根及根毛中特异性表达，而缺失体中gus基因在根、叶和花粉均表达．
    与P1-P4的实验结果相比，说明正常启动子P发挥不同功能的关键序列位于图2的M、Q．（填字母）

    分析 1、解答本题的关键是能正确分析图中和表中信息，从中提取有效信息准确答题．
    2、基因工程技术的基本步骤：
    （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
    （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
    （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

    解答 解：（1）①利用PCR技术扩增DNA的前提条件是要有已知核苷酸序列的目的基因，但正常启动子P左侧序列未知，因此不能直接根据片段Ⅰ扩增出正常启动子P．
    ②根据图1中环状DNA分子中的酶切位点可知，要得到环状DNA分子时，首先利用Bgl II酶切割片段Ⅰ，再用DNA连接酶处理使片段Ⅰ成为环状DNA．
    ③根据图1可知，将环状DNA用Msc I酶处理，得到片段Ⅱ． PCRPCR反应中是从引物的3‘端开始合成新DNA链的，因此欲扩增出正常启动子P，需选用的引物组合为C和B．
    （4）根据图3可知，标记基因是卡那霉素抗性基因，因此导入烟草细胞中后，用含有卡那霉素的培养基对烟草细胞进行筛选，分别获得了含有正常启动子P及其4种缺失体（P1-P4）的转基因烟草．由于gus基因表达产物可将X-Gluc水解生成蓝色产物，因此将植物组织浸入适量X-Gluc溶液中，观察烟草细胞gus基因是否表达．实验结果表明正常启动子P驱动gus基因在幼根及根毛中特异性表达，而缺失体中gus基因在根、叶和花粉均表达．与P1-P4的实验结果相比，说明正常启动子P发挥不同功能的关键序列位于图2的M、Q．
    故答案为：
    （1）正常启动子P左侧序列未知         Bgl II和DNA连接       Msc I     C和B
    （4）卡那霉素      X-Gluc       正常启动子P驱动gus基因在幼根及根毛中特异性表达，而缺失体中gus基因在根、叶和花粉均表达      M、Q

    点评 本题结合图表，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．

    练习册系列答案
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    用显微镜观察洋葱根尖细胞有丝分裂，绘出如图示意图，据图答题（F为某细胞结构）：

    （1）细胞分裂的顺序是 （填写图中字母）．

    （2）已知洋葱细胞内有染色体4对，则在图B所对应的时期，有染色体 条，染色单体有 条，每条染色体含有 个DNA分子．

    （3）图A中的F表示 ，它将逐渐形成 ，该细胞结构中集中了大量的 （填某种细胞器）．

    （4）在换用高倍镜观察细胞内部精细结构时，发现图象不清晰，应该 （写仪器操作步骤）使图象变清晰．

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    20．在紫色洋葱表皮细胞临时装片的盖玻片一侧滴加质量分数为0.3g/mL的蔗糖溶液后，出现了如图所示的情形，请回答：
    （1）此细胞发生了质壁分离现象，是细胞失水的结果（填“吸水”或“失水”）．
    （2）图中②的结构名称是细胞膜，②④⑤共同构成了原生质层．
    （3）将此细胞置于清水中，⑥的体积会增大，此时是由于细胞吸水所致．（填“吸水”或“失水”）．

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    与DNA相比，RNA所特有的成分是（ ）

    A．脱氧核糖和鸟嘌呤 B．核糖和尿嘧啶

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    2．盐藻是一种单细胞真核藻类，其鞭毛是由微管蛋白聚合而成的．为研究泛素和蛋白酶体是否参与盐藻鞭毛的解聚过程，科研人员进行了相关研究．
    （1）借助荧光显微镜，观察到盐藻鞭毛上存在泛素，它是由76个氨基酸组成的多肽，可与微管蛋白形成泛素化蛋白．
    （2）科研人员检测了不同处理下盐藻鞭毛中泛素化蛋白的含量，其电泳结果如图1．
    （对照组：正常生长状态的盐藻细胞；组装组：鞭毛组装状态的盐藻细胞；解聚组：鞭毛解聚状态的盐藻细胞）

    据图1分析，与对照组相比，鞭毛解聚时细胞内泛素化蛋白含量增加，由此推测，泛素参与了鞭毛解聚过程．
    （3）进一步用带有荧光的物质检测盐藻蛋白酶体的活性，结果如图2．据图分析，鞭毛解聚组蛋白酶体的活性高于对照组．
    （4）综合图1和图2说明泛素和蛋白酶体均参与盐藻鞭毛的解聚过程．
    （5）图3为泛素（Ub）作用机理示意图，据图3分析，在多种酶的催化作用及ATP供能条件下，微管蛋白的肽键断裂，导致鞭毛解聚．
    （6）人体组织细胞中存在多种蛋白质降解途径，请你再举一例：溶酶体途径．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    12．下列有关细胞核的叙述，不正确的是（　　）
    A．核膜为双层膜，把核内物质与细胞质分开
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    C．DNA等大分子物质可以通过核孔进入细胞质
    D．核仁与核糖体的形成有关

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    19．将番茄和水稻幼苗分别放在含Ca2+、Mg2+和SiO44-的培养液中培养，一段时间后测定各培养液中相应离子的浓度，结果如图所示，下列分析不正确的是（　　）
    A．此实验的自变量是不同种类的植物和不同种类的培养液
    B．同种植物对不同离子的吸收速率不同
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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    16．大豆中含有大豆异黄酮，其分子结构与人雌性激素相似，进入人体后能发挥微弱的雌性激素效应．下列对大豆异黄酮的推测，不合理的是（　　）
    A．会引起促性腺激素分泌量增加B．能与人雌性激素受体特异性结合
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    （1）观察图甲叶绿体的结构，①～④中具有膜结构的是①②③（填数字），吸收光能的结构是[③]类囊体薄膜，该结构中发生的能量变化是光能转变为ATP和NADPH活跃的化学能（或光能转变为电能再转变为ATP和NADPH活跃的化学能）．
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    （4）图丙中的CO2供应突然降低，其他条件不变，短时间内，3-磷酸甘油酸含量将降低．

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