Question

2．中国苦荞富含黄酮类化合物等营养物质，在降血糖、降血脂等方面功效显著．查尔酮合成酶（CHS）是黄酮类化合物合成的关键酶，如图为将修饰后的CHS基因导入苦荞，培育高产黄酮苦荞品系示意图．

（1）要对培养基彻底灭菌应采用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌．接种前，用灭菌后未接种的培养基培养一段时间，观察是否形成菌落，目的是判断培养基灭菌是否彻底．
（2）接种前，外植体用70%的酒精和0.1%的氯化汞溶液进行消毒后都需经无菌水清洗．接种后2-5天，若发现外植体边缘局部污染，原因可能是外植体消毒不彻底．
（3）过程②叫做脱分化，通过②和③过程能成功地把离体的苦荞体细胞能培育成植株，此技术所利用的原理是植物细胞的全能性．
（4）判断转基因苦荞培育是否成功，可比较转基因苦荞与普通苦荞的黄酮类化合物含量，也可通过凝胶色谱法分离测定细胞中CHS含量，由于CHS相对分子量大，所以最先从色谱柱中洗脱出来，工业化生产中，可利用固定化酶（固定化细胞）技术以提高CHS的利用率而节约成本．

Answer 1

分析 1、实验室常用的消毒方法
煮沸消毒；化学药物消毒；紫外线消毒．
2、实验室常用的灭菌方法
①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；
②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；
③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30 min．
3、植物组织培养技术包括脱分化和再分化两个重要过程，而决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要．

解答 解：（1）要对培养基彻底灭菌应采用高压蒸汽灭菌．为了判断培养基灭菌是否彻底，接种前，用灭菌后未接种的培养基培养一段时间，观察是否形成菌落．
（2）接种前，外植体用70%的酒精和0.1%的氯化汞溶液进行消毒后都需经无菌水清洗．接种后2-5天，若发现外植体边缘局部污染，原因可能是外植体消毒不彻底．
（3）过程②叫做脱分化，过程③表示再分化，通过脱分化和再分化过程能成功地把离体的苦荞体细胞能培育成植株，此技术所利用的原理是植物细胞的全能性．
（4）判断转基因苦荞培育是否成功，可比较转基因苦荞与普通苦荞的黄酮类化合物含量，也可通过凝胶色谱法分离测定细胞中CHS含量，由于CHS相对分子量大，所以最先从色谱柱中洗脱出来，工业化生产中，可利用固定化酶（固定化细胞）技术以提高CHS的利用率而节约成本．
故答案为：
（1）高压蒸汽灭菌   判断培养基灭菌是否彻底
（2）70% 的酒精   外植体消毒不彻底
（3）脱分化    植物细胞的全能性
（4）相对分子量大    固定化酶（固定化细胞）

点评 本题综合考查了微生物的分离与培养和植物细胞工程的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络的能力．