[题目]2019新冠病毒.结构如下图所示(棘突.脂质膜.包膜成分都是含有蛋白质.它分别是由病毒RNA的基因S.M.E的指导合成).2019新冠病毒基因组长度为29．8Kb.为单股正链RNA(正链RNA能与核糖体结合.具有mRNA的功能).结构不稳定.容易产生基因突变.给疫苗研制带来困难.根据相关知识回答下列问题:(1)新冠病毒侵染过程� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】2019新冠病毒，结构如下图所示（棘突、脂质膜、包膜成分都是含有蛋白质，它分别是由病毒RNA的基因S、M、E的指导合成）。2019新冠病毒基因组长度为29．8Kb，为单股正链RNA（正链RNA能与核糖体结合，具有mRNA的功能），结构不稳定，容易产生基因突变，给疫苗研制带来困难。根据相关知识回答下列问题：

（1）新冠病毒侵染过程中，棘突首先与细胞膜上受体结合，可能作为病毒的疫苗。如果利用基因工程研制新冠病毒疫苗，第一步是得到基因S（DNA），以用于后续操作，获取大量S基因过程为①提取病毒的____________，②____________，③通过____________技术扩增得到大量基因S。

（2）制备出来的“产品”必须具备没有传染性和致病性、____________才能作为疫苗来使用。

（3）检测新型肺炎的一般策略是检测疑似病例是否携带新冠病毒。新冠病毒主要由核酸和蛋白质构成，如果检测核酸，一般的方法是____________。如果检测其特异性蛋白，方法是____________，这一技术的关键是要生产出能与新冠病毒结合的特异性强、灵敏度高、可大量制备的抗体．请写出生产这种抗体的思路_________________________。（至少写出四步）

【答案】RNA 逆转录成对应DNA PCR 能引起对新冠病毒的特异性免疫（或能引起机体特异性免疫等） DNA分子杂交技术或分子杂交技术或探针法（或：PCR法）抗原一抗体杂交 ①向小鼠体内注射新冠病毒的抗原蛋白（或灭活的新冠病毒）：②提取免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，经多次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞（或用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞；再进行克隆化培养和抗体检测筛选出能分泌所需抗体的细胞）③将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养、或注射到小鼠腹腔内增殖，从培养液或小鼠腹水中就提取大量的单克隆抗体

【解析】

1．目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

2.单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。

题意分析，2019新冠病毒的遗传物质为单股正链RNA，且具有mRNA的功能，由于单链RNA结构不稳定，因此容易产生基因突变。

（1）新冠病毒侵染过程中，棘突首先与细胞膜上受体结合，棘突上有S蛋白，因此S蛋白可能作为病毒的疫苗。如果要研制新冠病毒疫苗，第一步需要获得目的基因，即要得到基因S（DNA），要获取大量S基因，①首先要提取病毒的RNA，②然后逆转录成对应DNA，③接下来通过PCR技术扩增得到大基因S。

（2）作为疫苗需要具备无传染性和致病性，而且能引起机体产生特异性免疫反应，从而达到预防病毒的目的，因此制备出来的“产品”需要具备上述特点。

（3）为检测疑似病例是否携带新冠病毒。而新冠病毒主要由核酸和蛋白质构成，通常用DNA分子杂交技术或分子杂交技术或探针法来检测核酸。也可用抗原一抗体杂交检测患者体内是否有其特异性蛋白，若要用抗原一抗体杂交检测，必须要获得大量的能与新冠病毒结合的抗体，若要大量获得与新冠结合的特异性抗体需要用到单克隆抗体制备技术，该方法的过程为：①给小鼠注射新冠病毒的抗原蛋白（或灭活的新冠病毒），刺激小鼠产生免疫反应；

②从免疫小鼠体内获得（效应）B淋巴细胞；

③将上述过程获得的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，经多次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞；再进行克隆化培养和抗体检测筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞；

④将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养、或注射到小鼠腹腔内增殖，从培养液或小鼠腹水中就提取大量的单克隆抗体。用这种方法获得的单克隆抗体具有纯度高、特异性强的特点，并且还可以在体外条件下大量制备。

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Ⅰ．2019年年底新型冠状病毒（2019-nCov）引发了新冠肺炎病的流行。至今已引起全球近30万人的死亡。该病毒为单股正链RNA（+RNA）病毒，主要通过飞沫传播，通过人的口腔、呼吸道黏膜感染人体。戴口罩可有效预防感染。结合所学知识回答下列问题：

（1）2019-nCov主要通过其表面囊膜的S蛋白与宿主细胞膜受体ACE2结合来感染宿主细胞。如图1所示，S1与ACE2结合后导致S1和S2分离，S2的顶端插入到宿主细胞膜上，通过S2蛋白___________的改变将两个膜拉近，发生膜融合过程。2019-nCov进入宿主细胞后，利用宿主细胞内的___________等为原料合成大分子物质组装成新的病毒，扩散并侵染健康细胞。

（2）感染2019-nCov后，肺炎患者出现持续高热现象，是由于机体的产热量___________散热量（填“大于”、“等于”或“小于”），使机体稳态失调。

（3）2019-nCov侵染细胞后，以病毒的+RNA为模板合成-RNA（互补RNA），再利用-RNA为模板合成子代病毒的+RNA，假定病毒基因组+RNA含有5000个碱基，其中A和U占碱基总数的40%。以病毒基因组+RNA为模板获得+RNA的产物共需要碱基G和C___________个。

（4）病毒会对人体造成严重的伤害，但寄生在动物体内，一般不会引起动物大量死亡，这是病毒和中间寄主动物两种生物长期___________的结果。

Ⅱ．利用毛霉等微生物研发含盐低，同时又保持产品质量与风味的低盐腐乳，其腐乳品质评定结果如图：通过氨基酸态氮含量和感官评价对腐乳品质进行综合评定。请分析回答：

（1）腐乳制作的原理主要是利用微生物产生的___________酶水解蛋白质和脂肪。

（2）培养过程中，毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈，在酪蛋白培养基中筛选到三个单菌落甲、乙、丙，其菌落直径分别为3．2cm，2．8cm、2．9cm，其菌落与透明圈一起的直径分别为3．7cm、3．5cm、3．3cm。应选择菌落___________（填甲、乙或丙）作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。

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（2）请据图回答下列问题：