Question

11．如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线．请回答：

限制酶	BamHI	HindⅢ	EcoRI	SmaI	MspI
识字序列及切割位点

（1）天然质粒往往需经过改造才能作为基因工程中的运载体，经改造后的质粒同时具备的条件有①②③④（填序号）．
①标记基因         ②多个限制酶切割位点    ③对受体细胞无害     ④启动子       ⑤起始密码子
（2）若对图1中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性将会越高．
（3）用图2中的人乳铁蛋白目的基因和图1所示的质粒构建重组质粒时，选用的限制酶是BamHⅠ/HindⅢ（从“EcoRⅠ”、“BamHⅠ/HindⅢ”、“SmaⅠ/HindⅢ”中选择）．不能选择其他限制酶的理由分别是若选EcoRⅠ会破坏质粒的复制原点、若选SmaⅠ/HindⅢ，则构建的重组质粒没有标记基因或复制原点．
（4）图3中，①常用的导入方法是显微注射法，为了获得雌性转基因牛，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定，③过程选用的早期胚胎应发育到桑椹胚或囊胚阶段．

Answer 1

分析 分析题图：图1是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的过程，该过程采用了基因工程技术（①目的基因的获取、②基因表达载体的构建、③将目的基因导入受体细胞、④目的基因的检测与表达）、动物细胞培养技术和胚胎移植技术．

解答 解：（1）天然质粒往往需经过改造才能作为基因工程中的运载体，经改造后的质粒同时具备的条件有①标记基因、②多个限制酶切割位点、③对受体细胞无害和④启动子，而⑤起始密码子位于mRNA上．
（2）碱基之间的配对遵循碱基互补配对原则，即C-G，A-T，且C和G之间有3个氢键，A和T之间有2个氢键，因此C和G的含量越高，DNA分子热稳定性也越高．SmaⅠ酶切位点中均为C-G碱基对，因此插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒中的C和G的含量就越高，其热稳定性也越高．
（3）若选EcoRⅠ会破坏质粒的复制原点；若选SmaⅠ/HindⅢ，则构建的重组质粒没有标记基因或复制原点，所以用图2中的人乳铁蛋白目的基因和图1所示的质粒构建重组质粒时，选用的限制酶是BamHⅠ/HindⅢ．
（4）过程①是将目的基因导入动物受精卵，所用方法是显微注射法；为了获得雌性转基因牛，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定；过程③是将早期胚胎移入代孕母体中所用技术为胚胎移植，时期是发育到桑椹胚或囊胚的早期胚胎．
故答案为：
（1）①②③④
（2）越高
（3）BamHⅠ/HindⅢ若选EcoRⅠ会破坏质粒的复制原点；若选SmaⅠ/HindⅢ，则构建的重组质粒没有标记基因或复制原点
（4）显微注射法     性别鉴定    桑椹胚或囊胚

点评 本题结合图表，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及其特点；识记基因工程的操作步骤，掌握其应用，能根据图中和表中信息选择合适的限制酶，再结合所学的知识准确答题．