Question

8．β珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分，采用具有四环素抗性基因的质粒作为运载体，能使大肠杆菌生产出人的β珠蛋白．下列叙述正确的是（　　）

• A． 可从人的成熟的红细胞中提取DNA，直接分离目的基因
• B． 从造血干细胞提取mRNA反转录形成目的基因
• C． 用CaCl₂处理大肠杆菌，有利于重组质粒导入大肠杆菌
• D． 可根据受体细胞是否具有四环素抗性来检测目的基因是否表达

Answer 1

分析 1、基因表中载体包括启动子、目的基因（β珠蛋白基因）、标记基因（抗四环素基因）、终止子等．
抗四环素基因是标记基因，用于筛选导入重组质粒的受体细胞，因此受体细胞（大肠杆菌）不能含有四环素抗性基因．导入重组质粒的大肠杆菌能在四环素的环境中生存，因此可以用含有四环素的培养基筛选出已经导入β珠蛋白编码序列的大肠杆菌．
2、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、人的成熟的红细胞中没有细胞核和DNA分子，所以不能直接分离出目的基因，A错误；
B、造血干细胞不表达β珠蛋白，需要在未成熟的红细胞中提取mRNA反转录形成目的基因，B错误；
C、用CaCl₂处理大肠杆菌，使其处于易于吸收周围环境中的DNA分子的感受态，有利于目的基因导入受体细胞，C正确；
D、可根据受体细胞是否具有四环素抗性来检测目的基因是否导入，检测是否表达需要用抗原-抗体杂交技术进行检测，D错误．
故选：C．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理、操作步骤等，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项．