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    PCR技术是将某一特定DNA片段在体外酶的作用下，在高温环境中复制出许许多多相同片段的一种方法，利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。

    表1

    PCR反应体系

    50 μL

    缓冲液

    5 μL

    脱氧核苷酸

    1 μL

    引物A

    0.5 μL

    引物B

    0.5 μL

    DNA聚合酶

    0.5 μL

    模板DNA　　

    1～2 μL

    加去离子水补足至50 μL

     

    　　　　　　　表2

    反应条件

    温度

    时间

    变性

    95 ℃

    30 s

    复性

    55 ℃

    30 s

    延伸

    72 ℃

    1 min

    30个循环后

    适宜

    5～10 min

    保温

    4 ℃

    2 h

     

    (1)PCR技术的原理是模拟生物体内____________的过程。从上表中可得出，PCR技术与DNA复制相比较，主要区别之一是_____________________________________。此外，从反应条件看，所使用的DNA聚合酶应具有________的特点。

    (2)PCR扩增过程中对DNA片段进行高温加热处理，其目的是____________________________________，其作用相当于细胞内________酶的作用。每次循环都需要2种引物的主要原因是________________________________________。

    (3)下图为第1轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。

    　

     

    (1)DNA复制　不需要ATP(或需要加入引物或不需要解旋酶)　耐高温

    (2)使DNA双链解开成为单链　解旋　DNA聚合酶只能从引物的3’端延伸DNA链

    (3)

    练习册系列答案
    年级 高中课程 年级 初中课程
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    DNA亲子鉴定测试原理是：从被测试者的血液或口腔黏膜细胞或者培育的组织内提取DNA，用限制性内切酶将DNA样本切成特定的小片段，放进凝胶内，用电泳推动DNA小片段分离，再使用特别的“探针”去寻找基因。相同的基因会聚集在一起，然后用特别的染料在X光下，便会显示由DNA探针凝聚于一起的黑色条码；每个人的条码的一半与其母亲的条码吻合，另一半与其父亲的条码吻合。请回答：

    ⑴下列有关限制性内切酶的叙述中错误的是（    ）

    A． 有高效性                         B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

    C．主要存在于某些微生物体内          D．限制酶主要破坏碱基对之间的氢键联系

    ⑵“探针”的化学本质是 （   ）

    A． 某一个完整DNA                      B．含目的基因的特定DNA片段

    C．由目的基因控制合成的蛋白质分子      D．与目的基因互补的特定单链DNA

    ⑶条码一半与其母亲的条码吻合，另一半与其父亲的条码吻合。为什么？              

                                                            。

    ⑷样品DNA经PCR技术（聚合酶链式反应）扩增，可以获得大量DNA分子克隆。其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA人工复制（如下图）。PCR技术中运用到的酶与人体中


    的酶相比具有的特点是           。PCR技术有何明显优点                    

                                  

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    科目：高中生物 来源： 题型：阅读理解

    （8分） DNA亲子鉴定测试原理是：从被测试者的血滴或口腔黏膜细胞或者培育的组织内提取DNA，用限制性内切酶将DNA样本切成特定的小片段，放进凝胶内，用电泳推动DNA小片段分离，再使用特别的“探针”去寻找基因。相同的基因会凝聚在一起，然后利用特别的染料在X光下，便会显示由DNA探针凝聚于一起的黑色条码。每个人的条码一半与其母亲的条码吻合，另一半与其父亲的条码吻合。反复几次过程，每一种探针用于寻找DNA的不同部位并形成独特的条码，便可得到超过99.9％的分辨概率。 请回答：

    （1）限制性内切酶能将DNA样品切成特定的小片段，这主要体现了酶的  

      A．专一性    B．高效性       C．多样性       D．作用条件温和

    （2）“探针”是指                                                    

      A．某一个完整的目的基因                  B．目的基因片段的特定DNA

      C．与目的基因相同的特定双链DNA           D．与目的基因互补的特定单链DNA

    （3）条码一半与其母亲的条码吻合，另一半与其父亲的条码吻合。为什么?

                                                                                   

    （4）样品DNA经PCR技术扩增，可以获取大量DNA分子。该技术是在试管中进行DNA的人工复制(如图)，在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活动的生物体。

    ①图中A过程相当于生物体内的            过程。

    ②某样品DNA中共含300个碱基对，碱基数量满足：(A+T)：(G+C)=1/2，现欲得到100个与样品相同的DNA，至少需要向试管中加入               个腺嘌呤脱氧核苷酸。

    ③A过程也称为DNA的变性，此过程在温度高达90～95℃时才能完成，说明DNA分子具有一定的           性。

    ④由图中信息分析可知，催化C过程的酶是                 ，它与正常细胞里的酶区别是                  。

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    科目：高中生物 来源： 题型：阅读理解

    样品DNA经PCR技术(聚合酶链式反应)扩增，可以克隆出大量DNA分子。其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如下图)。PCR技术可在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。请回答：

    (1)图中A过程表示______________________________________________，在活细胞内该过程可由__________酶作用来完成，两过程均是破坏了DNA分子双链间的__________键。

    (2)某样品DNA中共含有3000个碱基对，碱基数量满足(A＋T)∶(G＋C)＝1∶2，现在要得到1000个拷贝(即与样本相同的DNA)，至少要向试管中加入___________________个腺嘌呤脱氧核苷酸。

    (3)由于子代的染色体一半来自父方，一半来自母方，因此可以利用STR?PCR技术进行亲子鉴定，其原理是：首先获取被测试者的DNA中的相关STR(短串联重复序列)，并进行PCR扩增，取其中一样本用限制性内切酶切割成特定的DNA小片段，放进凝胶内，进行电泳使DNA小片段分离，再使用特别的“探针”去寻找有关的STR。相同的STR会聚集在一起，然后利用特别的染料，在X光下便会显示黑色条带。每个人的条带一半与其母亲的条带吻合，另一半与其父亲的条带吻合。

    ①限制性内切酶能将DNA样品切割成特定的小片段，这主要体现了酶的________。

    A．专一性　　　 B．高效性　　 C．多样性　　　 D．作用条件温和

    ②双胞胎或多胞胎的“基因身份证明”是否一定完全相同？________________，原因是____________________________________________________________________________。

    ③下图为某小孩和其母亲以及待测定的四位男性的DNA指纹图谱示意图，请推测该小孩的父亲是__________________。

     

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