【题目】Ⅰ．转基因克隆猪已在我国培育成功。研究组首先从猪胚胎皮肤细胞中分离出纤维细胞，进行体外培养。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞，经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆，再将重组胚胎移入代孕母猪子宫内，最终获得转基因克隆猪。请回答：
（1）在对猪纤维细胞进行培养时，需要在细胞培养液中添加一定量的 ，以防止培养过程的污染。此外，应定期更换培养液，防止 对细胞自身造成危害。
（2）筛选转基因细胞时，需要用到基因表达载体中的 。
（3）在进行体细胞克隆前，先要从屠宰场收集猪卵巢，采集 ，并在体外培养成熟。然后将转基因纤维细胞核注入 中，再经过一系列过程获得含有目的基因的重组胚胎。
（4）为了提高重组胚胎的利用率，可对处于 阶段的胚胎进行均等分割，再将重组胚胎移入代孕母猪子宫中继续发育成转基因克隆猪。一般地，代孕母猪需要用激素处理处理，促使其 以利于受孕。
Ⅱ．土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答：
（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有
（至少答2种）。
（2）可用 法分离纯化得到能降解尿素的菌种。在接种活菌的过程中，要在 旁进行操作，接种后的培养皿 于37℃的 中培养。
（3）用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，若培养基中存在分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的 使PH升高，使酚红指示剂产生颜色变化，从而证明这一菌株以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力 。
【答案】
Ⅰ（1）抗生素；细胞代谢产物积累
（2）标记基因
（3）卵母细胞；去核卵细胞
（4）桑椹胚或囊胚；同期发情
Ⅱ（1）高压蒸气灭菌、灼烧灭菌（或干热灭菌）
（2）涂布分离 或划线分离；酒精灯；倒置；恒温培养箱；
（3）氨；越强
【解析】
试题分析：
Ⅰ（1）为了防止杂菌污染，在动物培养基中需要加入抗生素。培养过程中还应定期更换培养液，以防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
（2）基因表达载体中的标记基因的作用是筛选含有目的基因的受体细胞。
（3）在进行体细胞克隆前，先要从屠宰场收集猪卵巢，采集卵母细胞，并在体外培养到减数第二次分裂中期，然后将转基因纤维细胞核注入去核的卵细胞中，再经过一系列过程获得含有目的基因的重组胚胎。
（4）胚胎分割技术中一般将培养到桑椹胚或囊胚的胚胎进行均等分割。在胚胎移植过程中，代孕母猪需要用激素处理处理，促使其同期发情以利于受孕。
Ⅱ（1）微生物分离和培养过程中，培养基和培养皿常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。
（2）菌种纯化可以用稀释涂布平板法或平板划线法进行接种，接种时注意在酒精灯旁进行，因为酒精灯附近杂菌比较少；接种后将培养皿倒置，放在37℃的恒温培养箱中培养。
（3）分泌脲酶的细菌能将尿素分解产生碱性物质氨，使得PH上升，与酚红指示剂产生颜色变化，所以其菌落周围会出现红色环带，此带月大，表明该菌株利用尿素的能力越强。
长江作业本同步练习册系列答案科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】水稻非糯性（Y）对糯性y为显性，抗病（R）对不抗病（r）为显性。用非糯性抗病和糯性不抗病的两纯种水稻杂交，让F1自交三代，在自然情况下，基因频率的变化是（ ）
A. Y逐渐增大、R逐增大
B. Y逐渐减小、R逐渐减小
C. Y基本不变、R基本不变
D. Y基本不变、R逐渐增大
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【题目】细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列选择合理的是（ ）
A．选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞
B．选择病人的核移植胚胎干细胞诱导分化后可形成免疫匹配的移植器官
C．选择既能产生专一抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞培养可制备单克隆抗体
D．选择植物的愈伤组织进行诱变处理可筛选出有用的突变体
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【题目】[生物——选修1：生物技术实践]
人们使用含三丁基锡、三苯基锡等有机锡化合物的油漆涂于船只、海洋建筑物等的表面，有效防止了海洋生物附着生长，但近年来的研究发现油漆中的有机锡可释放入海，对多种生物造成毒害。现欲从海洋底泥中分离分解三丁基锡的微生物。回答下列问题：
（1）为了获得能降解三丁基锡的微生物菌种，可在被三丁基锡污染的海洋底泥中取样，并应选用以 为碳源的培养基进行选择培养。除含有碳源外，培养基还应含有 、 、无机盐和蒸馏水等。
（2）实验过程中，玻璃器皿和金属用具可以采用干热灭菌法来灭菌，原因是 。
（3）常用的微生物接种方法有两种，但只有 可用于微生物的计数，运用该方法计数的结果往往比实际数目 （填“高”或“低”）。在平板划线操作中，接种环在使用前要先灼烧，其目的是 ，第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始，其目的是 。
（4）将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在含少量三丁基锡的相同培养液中培养（培养液中其他营养物质充裕、条件适宜），观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为33小时、15小时、46小时，则应选择微生物_______作为菌种进行后续培养。
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【题目】．某植物的花色有两对自由组合的基因决定。显性基因A和B同时存在时，植株开紫花，其他情况开白花。请回答：
开紫花植株的基因型有 种，其中基因型是 的紫花植株自交，子代表现为紫花植株：白花植株=9：7。基因型为 或 紫花植株自交，子代表现为紫花植株：白花植株=3：1。基因型为 紫花植株自交，子代全部表现为紫花植株。
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【题目】三丁基锡（TBT）是一种船舶防污漆，具有毒性。科研人员研究了TBT对热带爪蟾发育的影响及可能机制。
（1）用环境浓度TBT处理热带爪蟾胚胎，36h后统计胚胎存活率和畸形率（畸形胚胎占存活胚胎的比率），结果如下图。为获取胚胎，需向雌、雄爪蟾体内均注射 激素，以促其抱对产卵。据图分析，环境浓度TBT对热带爪蟾胚胎具有 。
（2）科研人员欲探究TBT导致的胚胎发育中腹鳍变窄的原因。
① Caspase-3蛋白的激活是细胞凋亡发生的重要标志之一。依据免疫学原理，可用蓝色染料标记
的 来检测细胞中激活型Caspase-3蛋白。观察胚胎腹鳍细胞被染色的情况，与对照组相比，
实验组腹鳍部位 ，说明环境浓度TBT促进细胞凋亡。
② 科研人员推测TBT导致的鳍变窄与细胞凋亡有关。用 和凋亡抑制剂同时处理胚胎，
与 处理组比较，若胚胎窄鳍率降低，则支持该推测。
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【题目】通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出
①大肠杆菌 ②霉菌 ③放线菌 ④固氮细菌
A．④②③ B．①②③ C．①③④ D．③④①
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【题目】下列相关描述错误的有几项
T2噬菌体寄生于酵母菌和大肠杆菌中
1953年Watson和Crick构建了DNA双螺旋结构模型，其重要意义在于证明DNA是遗传物质
DNA聚合酶和RNA聚合酶的结合位点分别在DNA和RNA上
④格里菲斯的肺炎双球菌转化实验直接证明了DNA是遗传物质
⑤某二倍体植物染色体上的基因B2，是由其等位基因B1突变而来的，如不考虑染色体变异，基因B1和B2可同时存在于同一个体细胞中或同一个配子中
⑥通过诱导多倍体的方法可克服远缘杂交不育，培育出作物新类型
A. 三项 B.四项 C.五项 D.六项
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【题目】植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列相关问题：
（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分形成的复合酶，其中的C1酶和CX酶使________ 分解成________ 。
（2）实验室使用刚果红（CR）染色法可以实现对纤维素分解菌的鉴别，常用的刚果红染色法有两种，一种是先 ，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在 时就加入刚果红。
（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落并加以鉴定，某同学设计了甲、乙两种培养基：
酵母膏 | 无机盐 | 淀粉 | 纤维素粉 | 琼脂 | CR溶液 | 水 | |
培养基甲 | ＋ | ＋ | － | ＋ | ＋ | ＋ | ＋ |
培养基乙 | ＋ | ＋ | ＋ | － | ＋ | ＋ | ＋ |
（注：“＋”表示“有”，“－”表示“无”）
据表判断，培养基甲________（填“能”或“不能”）选择出纤维素分解菌，原因是 ；培养基乙________（填“能”或“不能”）用于鉴定纤维素分解菌，原因是________________。
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