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    【题目】【生物一一选修3:现代生物科技专题】某些适应寒冷环境的生物，能够产生一类抑制冰晶生长（能降低水溶液冰点的大分子）的蛋白质，即抗冻蛋白。科学家利用昆虫抗冻蛋白（AFPS）基因的异源表达，现已成功地提高了双子叶植物——烟草的抗冻能力。请分析回答下列相关问题：

    （1）为使抗冻蛋白基因在烟草细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的抗冻蛋白基因片段正确插入基因表达载体的 和 之间。

    （2）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有 、 、4种脱氧核糖核苷酸和DNA模板，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。

    （3）将AFPS基因导人烟草细胞中，常用 法，此操作过程中使用的载体是 。若要检测烟草是否产生了抗冻蛋白，一般采用 法检测杂交带。

    （4）假如用得到的二倍体转基因抗冻植株自交，子代中杭冻与不抗冻植株的数量比为15:1,可推测该杭冻基因整合到了 （填“一对同源染色体的一条上”“两条非同源染色体上．”或“一对同源染色体的两条上”）。

    【答案】（1）启动子 终止子

    （2）引物 耐热性的DNA聚合酶（或Taq聚合酶）（两空位置可互换）

    （3）农杆菌转化（1分） Ti质粒（答质粒给1分，答T-DNA不给分） 抗原—抗体杂交

    （4）两条非同源染色体上

    【解析】（1）为使抗冻蛋白基因在烟草细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的抗冻蛋白基因片段正确插入基因表达载体的启动子和终止子之间。

    （2）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加一对引物、热稳定DNA聚合酶（或Taq聚合酶）、4种脱氧核糖核苷酸和DNA模板。

    （3）将目的基因导入植物细胞中，常用农杆菌转化法，此操作过程中使用的载体是Ti质粒。检测目的基因是否翻译成相应的蛋白质，可采用抗原—抗体杂交技术。

    （4）假如用得到的二倍体转基因抗冻植株自交，子代中杭冻与不抗冻植株的数量比为15:1（为9:3:3:1的变式）,说明该杭冻基因整合到了两条非同源染色体上，遵循基因的自由组合定律。

    练习册系列答案
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    （1）哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞讲行核移植的原因是 。在哺乳动物的核移植实验中,一般通过 （物理方法）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂并发育，当胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段时，将胚胎植入同种的、生理状态相同的另一雌性（代孕）动物体内。为获得多只与该哺乳动物遗传物质相同的个体，还可使用 技术。

    （2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行获能处理。该处理有 两种方法。另外，培养的卵母细胞需要发育至 ,该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体。

    （3）在基因工程中若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人抗凝血酶Ⅲ蛋白，则所构建的基因表达载体必须包括:某种牛乳腺分泌蛋白基因的启动子、 、终止子、标记基因和复制原点等。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的 （填“受精卵”或“乳腺细胞”）。

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    回答下列问题：

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