Question

【题目】阅读以下资料，回答相关问题。

资料1：小鼠制备的抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕试剂盒”，检测早孕的准确率在90%以上。

资料2：葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，为提高其热稳定性，朱国萍等人在确定第138位甘氨酸为目标氨基酸后，用有效方法以脯氨酸替代甘氨酸，结果其最适反应温度提高了10—12℃，使蛋白质空间结构更具刚性。

资料3：巴西是全球最大的甘蔗生产国，但是甘蔗易受螟虫的侵害。2017年6月8日，巴西向世界宣布，全球首款能抵抗螟虫的转基因甘蔗已培育成功，并且批准该品种进入市场。

资料4：大肠埃希菌，俗称大肠杆菌。是人和动物肠道中的正常栖居菌。自来水一旦被它污染，就有可能引发肠道传染病，甚至流行病。因此，必须对自来水进行严格的检测，以确保饮水安全。我国规定1000ml自来水中的大肠杆菌数不得超过3个。

（1）资料1中，在该“单抗”的生产过程中，将______________作为抗原对小鼠进行接种后，从脾脏中提取B淋巴细胞，并设法将其与鼠的骨髓瘤细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选，选出融合的杂种细胞，对该细胞还需进行____________________，经多次筛选，就可获得足够数量的符合需要的____________。单克隆抗体最主要的优点有_________________。

（2）资料2中提到的生物技术属于____工程的范畴。在该实例中，直接需要操作的____________（选填“肽链结构”、“蛋白质空间结构”、“基因结构”）。

（3）资料3中获得转基因甘蔗的过程中，核心步骤是________________________，为了避免目的基因和运载体的自身连接成环和反向连接，应该采取的措施是用____________________对目的基因和载体分别进行切割。

（4）实验前应进行无菌处理。将漏斗、培养皿、三角瓶和镊子等进行_________________灭菌。培养基进行_______________灭菌。为了鉴定大肠杆菌，在培养基中应加入_______________________。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现_________________色。

Answer 1

【答案】人绒毛膜促性腺激素 克隆化培养和抗体检测 杂交瘤细胞 特异性强、灵敏度高，并可大量制备 蛋白质 基因结构 基因表达载体的构建 使用两种能产生不同黏性末端的（不同）限制酶 干热 高压蒸汽 伊红—美蓝 黑

【解析】

1、单克隆抗体的制备过程的细节：

（1）二次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；

②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。

（2）细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；

骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。

（3）杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。

（4）提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。

2、单克隆抗体优点：特异性强，灵敏度高，能大量制备。

3、基因工程的基本操作程序

第一步：目的基因的获取；

第二步：基因表达载体的构建；

第三步：将目的基因导入受体细胞；

第四步：目的基因的检测和表达。

（1）资料1中，在该“单抗”的生产过程中，将人绒毛膜促性腺激素作为抗原对小鼠进行接种后，从脾脏中提取B淋巴细胞，并设法将其与鼠的骨髓瘤细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选，选出融合的杂种细胞，对该细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的符合需要的杂交瘤细胞。单克隆抗体最主要的优点有特异性强、灵敏度高，并可大量制备。

（2）资料2是改造现有蛋白质，使之符合人类需求，属于蛋白质工程，其原理是通过改造基因来获得相应功能的蛋白质。

（3）基因工程的关键环节是构建基因表达载体，为了避免目的基因和运载体的自身连接成环和反向连接，应该采取的措施是使用两种能产生不同黏性末端的（不同）限制酶对目的基因和运载体分别进行切割。

（4）微生物培养过程中要注意防止杂菌污染，培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，漏斗、培养皿、三角瓶和镊子等进行干热或高压蒸汽灭菌，为了鉴定大肠杆菌，在培养基中应加入伊红——美蓝。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现黑色。