Question

12．下列有关限制性核酸内切酶的叙述，正确的是（　　）

• A． 用限制性核酸内切酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有2个
• B． 限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大
• C． -CATG^↓-和-G^↓GATCC-序列被限制酶切出的黏性末端碱基数不同
• D． 只有用相同的限制性核酸内切酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒

Answer 1

分析 1、关于限制酶，考生可以从以下几方面把握：
（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来．
（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（3）结果：形成黏性末端或平末端．
注意：用限制酶切割DNA时，每切开一个切口需要水解两个磷酸二酯键．
2、DNA连接酶：
（1）根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T₄DNA连接酶．这二者都能连接黏性末端，此外T₄DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低．
（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
3、限制酶切割一个识别位点将断裂两个磷酸二酯键，因此限制酶切割质粒时断裂两个磷酸二酯键，形成两个黏性末端；而限制酶切割目的基因时，将断裂四个磷酸二酯键，形成四个黏性末端．
4、在基因工程，为了防止质粒和目的基因的自身环化，常使用不同的限制酶切割目的基因和质粒；并且不同的限制酶切割形成的黏性末端的碱基序列可能是相同的，因此它们也能发生重组．

解答 解：A、用限制性核酸内切酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，需要切割目的基因的两侧，因此要断裂4个磷酸二酯键，即水解的磷酸二酯键有4个，A错误；
B、限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大，B正确；
C、-CATG↓-和-G↓GATCC-序列被限制酶切出的黏性末端均为CATG，碱基数均为四个，C错误；
D、不同的限制性核酸内切酶切割也可能形成相同的末端序列，因此不同限制酶处理含目的基因的片段和质粒，也能形成重组质粒，D错误．
故选：B

点评 本题考查了基因工程的相关知识，意在考查考生的识记能力和分析能力，难度适中．考生要明确限制酶切割一个识别位点将断裂两个磷酸二酯键；不同的限制酶也有可能形成相同的黏性末端，因此切割形成的片段也能发生重组．