Question

5．研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物．
（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶．
（2）如果要对土壤中的纤维素分解茵进行计数，常采用稀释涂布平板法进行接种培养，接种工具采用灼烧灭菌的方法．
（3）常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在倒平板时就加人刚果红．第一种（选答“第一种”或“第二种”）方法会使菌落之间发生混杂．
（4）如果观察到产生透明圈的菌落，说明可能获得了纤维素分解茵．为了确定是纤维紊分解茵，还需要进行发酵产纤维素酶的实验．纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定．

Answer 1

分析 在纤维素分解菌的分离实验中，刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，这样可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌．
刚果红染色法有两种：
1．先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应
优点：显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用
缺点：操作繁琐，加入的刚果红会使菌落之间发生混杂
2．在倒平板时就加入刚果红
优点：不存在菌落的混杂问题
缺点：①在纤维素粉和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物产生假阳性反应
②有些微生物有降解色素的功能

解答 解：（1）纤维素酶是一种复合酶，包括C₁酶、C_X酶和葡萄糖苷酶，其中C₁酶和C_X酶能使纤维素分解成纤维二糖，葡萄糖苷酶能将纤维二糖分解成葡萄糖．
（2）对土壤中的纤维素分解菌的计数常采用稀释涂布平板法进行接种培养，接种工具常用灼烧灭菌的方法．
（3）刚果红不与纤维二糖和葡萄糖发生反应，第一种方法是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，操作繁琐，加入的刚果红会使菌落之间发生混杂；第二种方法在倒平板时加入刚果红，不会使菌落之间发生混杂．
（4）刚果红与纤维素反应呈红色，纤维素分解菌产生的纤维素酶会将纤维素分解而不能与刚果红染液呈红色，在菌落周围会出现透明圈．为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验．纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定．
故答案为：
（1）葡萄糖苷
（2）稀释涂布平板    灼烧
（3）倒平板   第一种
（4）透明圈    发酵产纤维素酶    葡萄糖

点评 本题主要考查两种筛选纤维素分解菌的方法，意在加强学生对纤维素分解菌的分离与筛选过程的掌握，试题难度一般．