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    18．转基因重组酵母乙肝疫苗是一种乙肝表面抗原（HbsAg）亚单位疫苗，它采用转基因的方法将乙肝病毒表达表面抗原的基因进行质粒构建，转入啤酒酵母菌中，通过培养这种重组酵母菌来表达乙肝表面抗原亚单位．转基因酵母的产生过程如图1所示．质粒上有SnaBⅠ、AvrⅡ、SacⅠ、BglⅡ四种限制性酶切割位点，且酶切序列如表所示．请回答：
    限制酶识别序列及酶切位点
    SnaBⅠ
    AvrⅡ
    SacⅠ
    BglⅡ
    （1）由于HBsAg基因序列已知，因此过程①可通过PCR技术得到大量HBsAg基因，此外也可将其连接在 
    质粒上，通过大肠杆菌培养扩增．
    （2）构建含抗病基因的重组质粒时，应选用限制性核酸内切酶B、D（不定项选择）（A．SnaBⅠB．AvrⅡC．SacⅠD．BglⅡ）对含HBsAg基因的DNA和质粒进行切割，切割一个含HBsAg基因的DNA分子需要消耗
    4个水分子．
    （3）不同的微生物通常需要不同的培养基进行培养，已知酿酒酵母培养基配方为：酵母提取物10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，定容至1L，加入1.5%琼脂粉制成固体培养基．则其灭菌条件应为A．
    A．高压蒸汽灭菌法，且温度为121℃，压力为1kg/cm2，灭菌15分钟
    B．高压蒸汽灭菌法，且温度为95℃，压力为500g/cm2，灭菌30分钟
    C．将配好的培养基放在超净台中，打开紫外灯和过滤风，灭菌30分钟
    D．在超净台中，打开过滤风，在酒精灯火焰旁用G6玻璃砂漏斗过滤灭菌
    （4）将重组质粒导入酵母菌后，可用涂布分离法接种到固体培养基上．某同学在接种后得到如图2所示的菌落分布，推测该同学接种时可能的操作失误是涂布不均勻．若欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入HBsAg基因的酵母菌，则应使重组质粒中含有抗卡那霉素基因作为标记基因，这种培养基属于选择培养基．
    （5）已知酵母菌的最适培养温度是28℃，在培养时可将培养皿倒置并放入恒温培养箱进行培养．若不倒置培养将导致无法形成单菌落．

    分析 分析图表：形成重组质粒时，需要用同种限制酶切割目的基因和质粒，图中看到目的基因上含有4种限制酶切割位点，但是SacⅠ酶的切割位点存在于目的基因中间，不能选用．而SnaBⅠ酶切割的是平末端，DNA连接酶的连接效率不高，因此应选用AvrⅡ和BglⅡ两种限制酶构建重组质粒．

    解答 解：（1）通过PCR技术可大量获取目的基因，此外也可将其连接在质粒上，通过大肠杆菌培养扩增．
    （2）形成重组质粒时，需要用同种限制酶切割目的基因和质粒，图中看到目的基因上含有4种限制酶切割位点，但是SacⅠ酶的切割位点存在于目的基因中间，不能选用．而SnaBⅠ酶切割的是平末端，DNA连接酶的连接效率不高，因此应选用AvrⅡ和BglⅡ两种限制酶构建重组质粒．切割一个含HBsAg基因的DNA分子需要断裂4个磷酸二酯键，因此需要消耗4个水分子．
    （3）培养基一般选择高压蒸汽灭菌，其条件为压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30 min，故选：A．
    （4）将重组质粒导入酵母菌后，可用涂布分离法接种到固体培养基上．某同学在接种后得到如图2所示的菌落分布，推测该同学接种时可能涂布不均匀．若欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入HBsAg基因的酵母菌，则应使重组质粒中含有抗卡那霉素基因作为标记基因，这种培养基属于选择培养基．
    （5）已知酵母菌的最适培养温度是28℃，在培养时可将培养皿倒置并放入恒温培养箱进行培养．若不倒置培养将导致无法形成单菌落．
    故答案为：
    （1）PCR技术       质粒
    （2）B、D        4
    （3）A
    （4）涂布分离     涂布不均匀     抗卡那霉素基因        选择
    （5）恒温培养箱          无法形成单菌落

    点评 本题结合图表，考查基因工程和微生物的分离与纯化的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、适宜的工具及具体的操作步骤，能结合图中和表中信息准确答题，属于考纲理解和应用层次的考查．

    练习册系列答案
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    8．将电极插入如图示中C和D两点的细胞膜内，中间接记录仪（电流左进右出为+），当刺激A点后，检测到的结果应是（　　）
    A．B．C．D．

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    9．酵母菌培养液常含有一定浓度的葡萄糖，但当葡萄糖浓度过高时，反而抑制微生物的生长，其主要原因是（　　）
    A．碳源供应太充足
    B．细胞会过度失水影响正常生命活动
    C．酵母菌代谢旺盛，导致培养基严重缺O2，影响菌体生长
    D．葡萄糖不是酵母菌代谢的原料

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    6．如图为真核生物细胞核内转录过程的示意图，下列说法正确的是（　　）
    A．②与 ③相同的化学基团只有磷酸基，不同的是五碳糖
    B．促进转录过程的酶为RNA聚合酶，主要发生在细胞核中
    C．某基因含96个脱氧核苷酸，则其控制合成的蛋白质最多有32个氨基酸
    D．转录完成后，结构 ④需通过两层生物膜才能与核糖体结合

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    13．如图是反射弧组成示意图，图中A、B、C、D表示反射弧的结构，X、Y为神经纤维上的实验位点．请回答下列问题：
    （1）当某人手指不小心碰到一个很烫的物品时，手会不由自主地缩回．
    ①烫手的刺激作用于手部的痛觉感受器，产生兴奋传入脊髓的（低级）神经中枢，最终传到手臂的肌肉，产生缩手反射．
    ②突触间隙液从内环境的组成看属于组织液．
    （2）如果在Y处膜外安放如图所示的灵敏电流计，给X点和Y点各一个适宜强度的刺激，电流计指针发生偏转的次数分别为0次和2次．

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    3．某学习小组在设计探究有关酶特性的实验时，小组成员提出以下建议，合理的是（　　）
    A．建议用过氧化氢酶探究PH对酶活性的影响
    B．建议用淀粉酶探究PH对酶活性的影响
    C．建议选淀粉、蔗糖、淀粉酶、碘液探究酶的专一性
    D．建议选淀粉、淀粉酶、斐林试剂探究温度对酶活性的影响

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    10．转基因抗病香蕉的培育过程如图1所示，图2表示PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点．请据图回答下列问题：

    （1）质粒的化学本质是DNA．
    （2）利用基因工程培育转基因抗病香蕉的核心步骤是形成重组质粒，即基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法．
    （3）将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来，使用的限制酶是PstⅠ和EcoRⅠ，一个质粒被限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ同时切割后得到的DNA片段和黏性末端分别为3个和4个．请写出单独用ApaⅠ切割质粒后的片段：．
    （4）转基因抗病香蕉的培育是否发生了染色体（数目）的变异？否．卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，根据这一原理可以利用含卡那霉素的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞．由此推断，重组质粒中应含有抗卡那霉素基因作为标记基因．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    7．为研究植物生长素的作用，设计如下实验．将胚芽鞘尖端放在琼脂块上并单侧光照如图1；一段时间后将A、B琼脂块分别置于相同的去尖端胚芽鞘甲和乙的一侧，数天后生长结果如图2，．该实验能得到的结论是（　　）
    A．光照导致向光侧生长素的分解B．胚芽鞘甲生长速度快于乙
    C．B琼脂块中的生长素含量多于AD．单侧光干扰生长素向下运输

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    8．下列各种交配方式的应用正确的是（　　）
    A．自交、测交、正反交都可以用来判断某一显性个体的基因型
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