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    7．根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微镜检，以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、圆褐固氮菌分离开来．下面是分离筛选的方法、步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容．首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行高温灭菌．再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养．
    （1）用无氮培养基可筛选出圆褐固氮菌．
    （2）用不含有机碳源的选择培养基可筛选出硝化细菌．
    （3）酵母菌的筛选需要在常规培养基中另外加入某种抗生素，如青霉素．
    （4）利用伊红和美蓝培养基培养混合菌，菌落呈紫黑（或深紫或黑色）色并带有金属光泽的是大肠杆菌，挑取该菌落单独培养，结合显微镜检和进一步用伊红和美蓝培养基鉴别培养来确定．
    （5）在无氧环境下培养混合菌，大肠杆菌、乳酸菌、酵母菌可以生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制大肠杆菌和酵母菌的生长，利用菌落特征，结合显微镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出乳酸菌．

    分析 选择培养基的原理是：不同微生物在代谢过程中所需要的营养物质和环境不同．有的适于酸性环境，有的适于碱性环境；例如从土壤中分离放线菌时，可在培养基中加入10%的酚数滴，抑制细菌和真菌的生长；如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐．

    解答 解：（1）培养基的主要成分包括水、无机盐、碳源、氮源，因此无氮培养基可筛选出能固氮的微生物，即圆褐固氮菌．
    （2）不含有机碳源的选择培养基可筛选出自养型微生物，即硝化细菌．
    （3）酵母菌是真菌，筛选时常在培养基中加入抗生素，防止其他细菌的生长．
    （4）利用伊红和美蓝培养基可用来培养和鉴定大肠杆菌，菌落呈黑色并带有金属光泽．
    （6）无氧条件下大肠杆菌、乳酸菌和酵母菌可以生长，加入一定浓度乳酸可以抑制大肠杆菌和酵母菌的生长，利用菌落特征，结合显微镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出乳酸菌．．
    故答案为：
    （1）圆褐固氮菌
    （2）硝化细菌
    （3）某种抗生素，如青霉素
    （4）紫黑（或深紫或黑色）　大肠杆菌
    （5）大肠杆菌、乳酸菌、酵母菌　 大肠杆菌和酵母菌　乳酸菌

    点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生能够识记培养基的成分，掌握选择培养基和鉴别培养基配制的原理，识记不同微生物的代谢类型和特点．

    练习册系列答案
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    （1）图中①表示基因表达载体的构建，构建过程中要注意让目的基因与乳腺蛋白基因启动子等调控组件结合，以便让目的基因在乳腺细胞中得以表达．
    （2）为获得大量人TPA基因，需要利用PCR技术进行体外扩增，此项技术的原理是DNA双链复制．
    （3）图中③过程是否成功，与供体和受体的生理状况有关，因此要事先用激素对受体和供体进行同期发情处理；受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能．
    （4）图中④过程表示产生大量的克隆羊，则该过程可采用的技术有细胞核移植和胚胎分割移植，这些克隆羊的基因型相同（填“相同”或“不同”）．

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    18．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的．这里的基因探针是（　　）
    A．用于检测疾病的医疗器械B．用放射性同位素标记的目的基因
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    15．5-溴尿嘧啶（Bu）是胸腺嘧啶（T）的结构类似物，在含有Bu的培养基上培养大肠杆菌，得到少数突变型大肠杆菌．突变型大肠杆菌中的碱基数目不变，但（A+T）：（G+C）的碱基比例略小于原大肠杆菌，这说明Bu诱发突变的机制是（　　）
    A．阻止碱基正常配对
    B．断裂DNA链中糖与磷酸基之间的化学键
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    A．乳酸菌的种类很多，常见的有乳酸链球菌和乳酸杆菌
    B．乳酸菌在自然界中分布广泛，空气、土壤、植物体表、人和动物的肠道内均有分布
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    C．培育青霉菌高产菌株是利用基因突变的原理
    D．培育无子西瓜和培育中国荷斯坦牛的原理相同

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