Question

【题目】（1）细菌的CRISPR/Cas9系统通过将入侵噬菌体和质粒DNA的片段整合到CRISPR中，并利用相应的CRISPRRNAs（crRNAs）来指导同源序列的降解，从而提供免疫性。

Cas9在基因工程中起到类似于_______（ 填物质）的作用。CRISPR/Cas9 在基因敲除、基因治疗等多方面显示出广阔的应用前景。若要进行基因治疗，首先要获得正常基因，目前比较常用的方法之一是从cDNA文库中获取，但获得的基因与人体内正常基因相比要短，但若要获得的是原核基因则基本相同，原因是___________________。

（2）科学家尝试将某种重组基因导入小鼠体内，以研究该基因的作用机理，常用的导入方法是___________________。目前比较常用的导入对象是小鼠的胚胎干细胞，因为ES细胞在功能上具有________________。经过早期胚胎培养之后获得的胚胎需要经过胚胎移植到_______雌性动物的体内，最终发育成具有新性状的个体。

（3）为了提高胚胎的利用率，科学家选用发育良好的__________进行胚胎分割，在此过程中，需要注意的是______________分割。

Answer 1

【答案】限制酶 真核基因的编码区是不连续的，转录时要剪切掉内含子，所以逆转录得到的基因要短于正常基因，而原核细胞基因的编码区则是连续的 显微注射法 发育的全能性 同种的、生理状态相同的 桑椹胚或囊胚 内细胞团均等

【解析】

1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

2、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不同。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

3、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。

（1）Cas9系统能将入侵噬菌体和质粒DNA的片段整合到CRISPR中，对外源DNA进行切割，类似于限制酶的作用。cDNA文库是由某生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的DNA片段构成，由于真核基因的编码区是不连续的，转录时要剪切掉内含子，所以逆转录得到的基因要短于正常基因，而原核细胞基因的编码区则是连续的，逆转录获得的基因与原核基因基本相同。

（2）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法。ES细胞在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞，常用来作基因工程的受体细胞。为提高胚胎移植的成活率，需要将早期胚胎移植到同种的、生理状态相同的雌性动物的体内，最终发育成具有新性状的个体。

（3）进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。