Question

【题目】反刍动物如牛和山羊，具有特殊的器官一瘤胃，瘤胃中生活着多种微生物，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究，请回答：

（1）在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是_____（多选）。

A.酒精灯 B.培养皿 C.显微镜 D.无菌水 E.接种环

（2） 向试管内分装含琼脂的培养基时 ， 若试管口粘附有培养基 ， 需要用酒精棉球擦净的原因是_____。

（3）刚果红可与 _____形成红色复合物，研究人员在刚果红培养基平板上，筛选到了几株有透明降解圈的菌落(见图 1）。图中降解圈大小与纤维素酶的_____有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是_____（填图中序号）。

（4）纤维素酶高产菌株在-20℃长期保存时，菌液中常需加入一定量的_____ 保藏。

（5）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株 A 和 B，在不同温度和 pH 条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见图 2，推测菌株_____ 更适合用于人工瘤胃发酵，理由是_____。

Answer 1

【答案】 CE 避免培养基污染棉塞 纤维素 量与活性菌 2 甘油 B 发酵过程会产热和产酸， B 菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高

【解析】试题分析：微生物培养的关键是无菌操作。筛选纤维素分解菌的原理是刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

（1）在样品稀释中需要使用无菌水稀释；在涂布平板操作中，需要使用酒精灯对涂布器进行灭菌，并在酒精灯旁完成对培养皿涂布接种操作，所以从选项分析可知，显微镜和接种环不需要，故选CE。

（2）分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净以避免培养基污染棉塞。

（3）根据“刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌”，所以在刚果红培养基平板上，可以筛选到有透明降解圈的菌落，降解圈大小与纤维素酶的多少和活性有关。纤维素酶的量越多，活性越强，分解的纤维素越多，透明降解圈越大，所以图中降解纤维素能力最强的菌株是2。

（4）在-20℃长期保存菌株时，菌液中常需加入一定量的甘油保藏。

（5）由于胃部PH值较低，根据题意和图示分析可知，发酵过程会产热和产酸，B菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高，所以推测菌株B更适合用于人工瘤胃发酵。