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PCR是一种DNA体外扩增技术.㊣1988年,PCR仪问世,并被广泛应用于基因扩增和DNA序列测定.如图是PCR技术示意图,请回答下列问题:
①标准的PCR过程一般分为
 
 
 
三大步骤.
②引物是此过程中必须加入的物质,从化学本质上说,引物是一小段
 

③将双链DNA
 
,使之变性,从而导致
 

④引物延伸需提供
 
作为原料.

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从2001年初到现在,青岛某实验基地已孕育出上百只转基因克隆羊,它们的体内分别携带包括β-干扰素、抗凝血酶素、乙肝表面抗原在内的多种药用蛋白基因.这意味着,它们可以通过产奶的方式源源不断地提供药用蛋白基因,其应用前景非常光明.在其实验研究过程中,经常利用PCR技术制取大量的有关药用蛋白基因来供实验用.下列有关PCR技术的叙述中,不合理的是(  )
A、PCR扩增反应中加人引物的作用是结合在模板DNA上,提供DNA延伸起始位点
B、DNA聚合酶的作用是从引物的5'端开始催化DNA链的延伸
C、PCR技术依据是DNA的热变性原理
D、PCR的反应过程一般经历三十多个循环,每次循环都包括变性、复性、延伸

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下列有关PCR技术的实验过程叙述,不正确的是(  )
A、变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,细胞内可利用解旋酶实现
B、操作过程要有一段已知目的基因的核苷酸序列
C、延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
D、PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高

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PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶,这种酶要能忍受93℃左右的高温.如果请你来寻找这种耐高温的酶,你会去哪里寻找(  )
A、土壤中B、海水中
C、热泉中D、冷库中

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聚合酶链式反应(PCR)是生物学家在实验室以少量样品制备大量DNA的生化技术,反应系统中包括微量样品基因、DNA聚合酶、引物、四种脱氧核苷酸等.反应中新和成的DNA又可作为下一轮循环反应的模板,其过程如图所示,据图回答下面的问题:
(1)为什么通过此反应产生的DNA与样品完全一样
 

(2)每次循环反应完成时产生两分子DNA,如果该DNA样品有1000个脱氧核苷酸,已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4,则五次循环后将产生
 
个DNA,需要胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数目至少是
 
个.
(3)指出此过程与转录过程的三个不同点:①
 
.②
 
.③
 

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PCR技术又称聚合酶链式反应,现在已成为分子生物学实验室的一种常规手段,它可以在体外很短的时间内将DNA大量扩增.你认为下列符合在体外进行PCR反应条件的一组是(  )
①稳定的缓冲液环境  ②DNA模板    ③合成引物     ④四种脱氧核苷酸
⑤DNA聚合酶        ⑥DNA解旋酶  ⑦限制性核酸内切酶  ⑧温控设备.
A、①②③④⑤⑥
B、①②③④⑤⑥⑦⑧
C、③④⑤⑥⑧
D、①②③④⑤⑧

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PCR技术是分子生物实验的一种常规手段,其原理是利用DNA半保留复制的特性,在试管中进行DNA的人工复制,请回答:
(1)PCR新合成的DNA分子与模板DNA分子完全相同的原因是
 
 

(2)通过PCR技术使DNA分子大量复制时,若将一个用15N标记的模板DNA分子(第一代)放入试管中,以14N标记的脱氧核苷酸为原料,连续复制到第五代时,含15N标记的DNA分子单链数占全部DNA总单链数的比例为
 

(3)PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方法.若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒,你认为可以用PCR扩增血液中的
 

A.白细胞DNA   B.病毒蛋白质     C.血浆抗体    D.病毒核酸
(4)若PCR过程中使用了两个引物A和B,从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为
 

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在PCR扩增前,需要将下列哪些物质加入微量离心管中?(  )
①模板DNA  
②模板RNA  
③DNA解旋酶  
④耐高温的DNA聚合酶
⑤引物  
⑥PCR缓冲液  
⑦脱氧核苷酸贮备液  
⑧核苷酸贮备液.
A、①④⑤⑥⑦
B、①③④⑤⑥⑧
C、②③④⑤⑥⑦
D、①④⑥⑦⑧

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如果要用PCR扩增以下DNA模板中的基因1,需要的一对引物序列是(  )
5′CTTCGAAATTC-基因1-TCTCCCGATCGG-基因2-AAGATCAAATCCTTTGCTCT3′.
A、引物Ⅰ是5′-CTTCGAAATTC-3′,引物Ⅱ是5′-CCGATCGGGAGA-3′
B、引物Ⅰ是5′-CTTCGAAATTC-3′,引物Ⅱ是5′-TCTCCCGATCGG-3′
C、引物Ⅰ是5′-GAAGCTTTAAG-3′,引物Ⅱ是5′-AGAGGGCTAGCC-3′
D、引物Ⅰ是5′-GAAGCTTTAAG-3′,引物Ⅱ是5′-CCGATCGGGAGA-3′

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关于PCR的说法不正确的是(  )
A、PCR是体外复制DNA的技术
B、Taq酶是一种热稳定DNA聚合酶
C、PCR过程中只需要两个引物分子
D、PCR利用的是DNA双链复制原理

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