请回答：
(1)进行过程①时，需用______ 酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为_________。
(2)进行过程e时，需用________酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
(3)研究发现，如let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取_______进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中_________(RASmRNA/RAS蛋白质)含最减少引起的。

(1)过程①酶作用的部位是                键，此过程只发生在非结合区DNA，过程②酶作用的部位是                键。
(2)①、②两过程利用了酶的                 特性。
(3)若将得到的DNA片段用于构建重组质粒，需要过程③的测序结果与           酶的识别序列进行对比，已确定选用何种酶。
(4)如果复合体中的蛋白质为RNA酶聚合，则其识别、结合DNA序列位基因的                  。
(5)以下研究利用了生物分子间的特异性结合的有              (多选)
A．分离得到核糖体，用蛋白酶酶解后提rRNA
B．用无水乙醇处理菠菜叶片，提取叶绿体基粒膜上的光合色素
C．通过分子杂交手段，用荧光物质标记的目的基因进行染色体定位
D．将抑制成熟基因导入番茄，其mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合，终止后者翻译，延迟果实成熟。

A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B
B．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B
C．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞
D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞

A．分子杂交技术
B．抗原—抗体杂交
C．抗虫或抗病的接种实验
D．基因枪法

A．HindⅢ2个，BamHⅠ1个
B．HindⅢ2个，BamHⅠ3个
C．HindⅢ和BamHⅠ各有2个 　
D．HindⅢ1个，BamHⅠ2个

A．a的基本骨架是磷酸和核糖交替连接而成的结构
B．要获得相同的黏性末端，可以用不同种b切割a和d
C．c连接双链间的A和T，使黏性末端处碱基互补配对
D．若要获得未知序列的d，可到基因库中寻找

(1)将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有__________、_________、__________三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行_____________。
(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是_____________；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物____________。
(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是__________，其合成的产物是____________。
(4)在上述实验中，为了防止目的基因和基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是_____________。

A．该质粒分子是由四种碱基组成
B．构建该表达载体的工具酶是限制酶和耐高温DNA聚合酶
C．本实验应采用GeneⅡ作为载体的标记基因
D．质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

(1)该实验设计主要体现了__________________原则。
(2)由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。
(3)根据表中数据，请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

(4)已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如下图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和______________序列明显增多。

(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由___________连接。
(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是___________末端，其产物长度为____________。
(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T－A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有___________种不同DNA片段。
(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是____________。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加__________的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是____________。