【生物-生物技术实践】
“葡萄美酒夜光杯，欲饮琵琶马上催．醉卧沙场君莫笑，古来征战几人回．”自古酒就与人类生活息息相关．请回答：
（1）人类使用酿制葡萄酒的微生物主要是酵母菌，酵母菌繁殖的最适温度是；酒精发酵一般将温度控制在．
（2）葡萄酒呈现深红色的原因是．
（3）现在工厂化生产果酒，为提高果酒的品质，更好地抑制其它微生物的生长，采取
的措施是，并接入合适的菌种．
（4）某同学人工自酿葡萄酒时，在发酵后期向发酵液中通入空气，并将发酵液置于30～35℃环境中，结果发现发酵液中有出现，这类微生物在糖类缺乏时可以使转化为，后者再转化为．

苹果醋口味酸甜，且能保健美容，是目前大众非常喜爱的饮品．如图是苹果醋的制作流程简图，请据图回答：

（1）过程②中使用到的微生物是，该微生物的代谢类型是．该微生物可以从食醋中分离纯化获得，方法是：
第一步：（配置培养基）该培养基必须含有微生物生长所需要的等基本营养成分．
第二步：对培养基用方法进行灭菌．
第三步：（接种）微生物常用的接种方法有．
第四步：（培养）温度控制在．
第五步：挑选符合要求的．
（2）在苹果醋的制作过程中为防止杂菌污染所用发酵瓶要进行，后期发酵时通气口的阀门要及时．

图表示洋葱表皮细胞依次浸于清水、质量浓度为0.1g mL^-1的KN0₃溶液和质量浓度为0.3g?mL^-1 的蔗糖溶液中，观察细胞的体积 （正常状态为100）随时间的变化，结果如图所示：
（1）A过程中，细胞应处于哪种试剂中？．
（2）B过程表示质壁分离发生一段时间后会自动复原，选择试剂是．
（3）完成C过程所选择的试剂是，原生质层包括．
（4）质壁分离是指与分离．

如图1表示制备抗X的单克隆抗体的过程；图2表示体外受精培育优质奶牛的过程；图3表示番茄和马铃薯植物细胞杂交的过程，请据图回答下面的问题．

（1）图1中融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞：第一次筛选是在（填“选择”或“合成”）培养基上培养，对筛选出的杂交瘤细胞，还需要进行克隆化培养和，经多次筛选，就可以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞．
（2）图2中参与体外受精的精子需要经过成熟和的过程，才能使卵细胞受精．若要获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图2中囊胚中的均等分割后进行胚胎移植，取样，做DNA分析性别鉴定．以上技术是在（填“体内”或“体外”）完成的．
（3）图3中过程①是植物细胞形成的阶段，该阶段所用的酶是．在形成再生植株的过程中与组织培养有相似之处的步骤是．在图3中的融合过程②在化学药剂的作用下会发生细胞融合；图1中的动物细胞融合的方法与植物细胞不相同的是．

“工欲善其事，必先利其器”，显微镜是生物科学研究中常用的观察工具．根据显微镜的构造和使用，回答下列问题：

（1）在视野的左下方发现一个细胞，要将其移至视野正中央，应将装片向移动．
（2）①、②、③、④、⑤是使用操作显微镜的几个步骤． 图a、b所示为显微镜观察中的两个视野，其中细胞甲为主要观察对象，由视野a到视野b时，操作过程的正确顺序是．
①转动粗准焦螺旋  ②转动细准焦螺旋    ③调节光圈    ④转动转换器      ⑤移动玻片
A．⑤③④①B．⑤③④②C．③④①⑤D．②⑤③④
（3）用显微镜的一个目镜分别与4个不同的物镜组合来观察血细胞涂片．当成像清晰时，每一物镜与载玻片的距离如图2所示．如果载玻片位置不变，在相同范围的视野中看到的细胞最多的物镜是．
A．a     B．b     C．c     D．d．

将酵母菌分为a、b、c 3组，用不同的方式培养（a组每3小时换一次培养液、b组每24小时换一次培养液、c组不换培养液），其种群增长曲线如图所示．请回答：
（1）随着更换培养液的时间间隔的延长，酵母菌种群的增长率逐渐．其可能的限制因素是不足．
（2）由曲线c看，随着种群密度的增长，由于加剧，代谢废物增高，从而使种群数量的增长率减小．从数学模型角度分析，最接近J型曲线的是曲线．

红细胞含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定．请回答下列有关问题：
①样品处理，它包括红细胞的洗涤、收集血红蛋白溶液．
②收集的血红蛋白溶液在透析袋中经过透析，这就是样品的粗分离．透析的目的是．透析的原理是．
④通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定．样品纯化的目的是．

血栓主要由不溶性的纤维蛋白等物质组成．纳豆激酶（NK）是一种在纳豆发酵过程中由纳豆菌产生的蛋白酶，它不但能直接作用于纤维蛋白（A过程），还能间接激活体内纤溶酶原（B过程）．如图是有关纳豆激酶溶栓机理简图，请据图回答问题：

（1）人们所需的纳豆激酶必需通过分离提纯才能获得，下面是分离提纯的步骤，其基本顺序是．
①层析提纯  ②过滤   ③沉淀   ④破碎细胞  ⑤酶制剂  ⑥冷冻干燥
使酶蛋白沉淀通常采用改变pH或加入．
（2）研究NK直接水解作用：给定纤维蛋白平板，将滴加其上，若出现相应的溶解圈，则可说明．
（3）NK 的间接作用是通过激活体内纤溶酶原，增加纤溶酶的量和作用，溶解血栓．
（4）请根据下列给出的实验材料，比较NK与内源性纤溶酶溶栓效果，并在表格空白位置上，补全相应内容．
供选实验材料：NK溶液、内源性纤溶酶溶液、纤维蛋白块、蛋清溶液，缓冲液、双缩脲试剂、量筒、试管和秒表．
实验步骤：（“+”表示添加，“-”表示未添加）

	加入物质的成分	试管1	试管2
1	A	+	+
2	缓冲液	+	+
3	纳豆激酶（NK）溶液	+	-
4	B	-	+

2格中A处添加的物质是，B处添加的物质是．
②实验结果的鉴定所用的观察方法是．

激素作为一种化学信使，能把某种调节的信息由内分泌细胞携带至靶细胞．图示某高等动物分泌的一种脂类激素X和另一种激素Y的作用机制．请结合图中信息回答下列问题．

（1）激素X进入细胞的方式是，细胞内的物质a是．
（2）从图中可以得知，激素X主要通过影响来调节生命活动．
（3）图中c→d过程称为，其方向是AB（用箭头标出），合成结束后，两个d的结构（相同，不相同），理由是．
（4）若激素Y为胰高血糖素，则合成激素Y的细胞是，给低血糖患者口服该种激素，低血糖症状（能或不能）缓解，原因是．
（5）利用细胞体外培养方法验证胰岛A细胞分泌的激素能促进胰岛B细胞的分泌，设计如下实验方案：
第一步用高糖的动物细胞培养液培养胰岛A细胞，一段时间后过滤得到细胞和滤液；
第二步取第一步得到的适量滤液作为培养液培养胰岛B细胞，一段时间后，测定培养液中b的含量．请指出该实验方案的错误．
第一步：．
第二步：．

胰岛素是一种蛋白质分子，它含有2条多肽链，一条链含有21个氨基酸，另一条链含有30个氨基酸，如图表示的是牛胰岛素的合成过程示意图：图中的前胰岛素原其实也是一条肽链，在其成为胰岛素的过程中，信号肽序列和多余序列将被切除，同时相关的-SH间发生反应生成二硫键（三个二硫键共脱去6个氢，氨基酸的平均相对质量分子质量为128），将两条肽链连接在一起，最后成为有活性的成熟的胰岛素分子．请据此回答：
（1）胰岛素合成的场所是，构成两条肽键的基本单位是．
（2）胰岛素分子中含有肽键 个，-SH存在于氨基酸分子结构式的中．从理论上分析胰岛素分子至少有个-NH₂，至少有个-COOH．
（3）这51个氨基酸形成胰岛素分子后，分子量比原来减少了．
（4）20种氨基酸可合成各种不同的蛋白质，这说明了蛋白质的分子结构具有，这种结构特点决定了．