请分析回答下列关于基因工程的问题：（10分）

某种大肠杆菌的质粒中含有β-半乳糖苷酶α片段序列（图4），大肠杆菌的DNA分子中则含有β-半乳糖酶ω片段序列（图3），由于天然大肠杆菌同时具备这两种片段序列，可以使培养基中含有X-gal底物转变成蓝色产物，当缺少任意一个α或ω片段序列，X-gal底物不能转变成蓝色产物。HindⅢ、 EcoRI、BamHI分别为三种限制性内切酶，下图5中箭头所指为三种限制酶的切点。

（1）要能筛选出转基因菌种，应选用的限制性内切酶是 ，选择的依据是 。

（2）控制F8的基因也可以通过人体细胞相应的mRNA来合成，该合成的过程称为 。如果F8基因表示人生长激素基因，则相应的mRNA可以从人体 （下丘脑细胞/垂体细胞/下丘脑和垂体细胞/所有体细胞）中获取。

（3）重组质粒形成与否需要鉴定和筛选，方法是将重组质粒的DNA分子导入大肠杆菌，通过含抗生素的培养基进行培养，观察大肠杆菌的生长、繁殖情况进行判断，如下图。

在筛选时应该先用选择培养基 （A/B）。

（4）将经转基因技术处理过的质粒导入大肠杆菌后，再将大肠杆菌接种到含有X-gal底物的培养基培养一段时间后，培养基中出现较多的蓝色菌落，这是因为 。

（5）控制F8的基因能在大肠杆菌细胞内得到表达，其遗传学基础是 。

（6）如果控制F8的基因长度为3000碱基对(bp)，用限制性核酸内切酶酶切后进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶A单独酶切，结果如下图l。用 酶B单独酶切，结果如下图2。用酶A和酶B同时酶切，结果如下图3。请画出该基因同时用酶A和酶B酶切时的作用位点示意图（并标注好酶切后碱基片断的长度）： 。

请分析回答有关微生物及其应用的问题：（10分）

Ⅰ、柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如图1）。

（1）欲分离筛选出能分泌脂肪酶的微生物M，应选择下列固体培养基（仅列出了碳氮源）中的 。（填编号）

A．蛋白胨、柠檬酸铁铵 B．橄榄油、硫酸铵 C．乳糖、酵母膏 D．葡萄糖、蛋白胨

（2）微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测酶活性来确定其应用价值。为降低生物柴油生产成本，可利用________________技术使脂肪酶能够重复使用，比较图2中的三种工艺，最好选择_________ 工艺。

Ⅱ、苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图3所示，①为土壤样品。

（3）④为对照，微生物在④中不生长、在⑤中生长。④与⑤培养基的主要区别在于 ；使用 法可以在⑥上获得单个菌落。

（4）采用固体培养基培养细菌时为什么要倒置培养？ 。

Ⅲ、急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施。

（5）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ；

（6）分别取0.1mL已稀释了103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为 个。

（7）噬菌斑（如图4）是在长满细菌的培养基上，由一个噬菌体侵染细菌后，不断裂解细菌产生的一个不长细菌的透明小圆区，它是检出噬菌体数量的重要方法之一。现利用连续取样、在培养基中培养的方法，测得噬菌体在感染大肠杆菌后数量变化曲线（图5）。下列有关该曲线的叙述中错误的是( ) (多选，填编号)

A．曲线a～b段噬菌体数量不变，说明此阶段噬菌体还没有开始侵染细菌

B．曲线a～b段细菌细胞中正旺盛地进行细菌 DNA 的复制和有关蛋白质的合成

C．由b到c对应时间内噬菌体共繁殖了10代

D．限制c～d段噬菌斑数量增加的因素最可能是细菌已经绝大部分被裂解

请完成下列实验探究：（10分）

Ⅰ 研究发现,两种调节功能相近的激素如果同时使用, 其调节作用会进一步增强。某兴趣小组为了探究甲状腺激素和生长激素同时使用时对动物生长的促进作用程度，设计了如下的实验：

（1）本探究实验的假设为：(80) ____。

（2）根据实验结果预测来完善以下实验设计思路：

①取4只同种性别的成年的W品系的小鼠，分别编号为甲、乙、丙、丁四组。

②配制生理盐水，并用生理盐水配制A mol/L的甲状腺激素溶液，B mol/L的生长激素溶液以及一定浓度的激素溶液X（每升X溶液含甲状腺激素Amol和生长激素B mol）。且这些激素的浓度适宜。

③甲、乙、丙、丁组小鼠每只每天分别注射 （81） ，

④ （82） 。

（3）上述实验思路①的设计是有问题的，请改正：

（83） 。

（4）从乙、丙、丁组的小鼠上所采集的数据如下图所示:

（5）实验结论（省略）

Ⅱ 科研人员为了探究生长素类似物吲哚丁酸(IBA)的不同使用方法和使用浓度对蓝莓插条（插枝）生根的影响，开展了如下实验研究。

① 方法与步骤：( 省略) 。

② 实验结果：测定12天、18天和30天的生根率，获得如下数据。

（6）本实验中的对照组的组别为 。

（7）方法Ⅰ中若需进一步确定在培养基中添加IBA的最适浓度，则需要 。

（8）使用IBA诱导蓝莓插条生根时，采用方法Ⅱ更好，原因是使用该处理方法时，在 等方面都具有明显的优势。

（9）请根据实验数据绘出“当IBA浓度最适时，采用不同方法诱导蓝莓生根的生根率随时间变化”的柱形图。

下列关于人体细胞中部分代谢场所的叙述，正确的是

A．产生二氧化碳的场所是线粒体

B．合成性激素的场所是高尔基体

C．合成核酸水解酶的场所是溶酶体

D．形成mRNA场所是细胞质基质

普通栽培稻是普通野生稻进化而来的，下列相关叙述正确的是

A．每株普通栽培稻都含有其种群基因库的全部基因

B．人工选择能够改变普通栽培稻变异和进化的方向

C．普通野生稻在进化过程中遗传多样性会发生改变

D．普通野生稻受环境影响产生的变异都是不遗传的

某生物兴趣小组的同学将生长旺盛的洋葱不定根置于4℃的冰箱冷藏室中培养36h后，剪取根尖制成临时装片，然后用显微镜观察细胞中染色体的分裂相。下列叙述正确的是

A．低温处理能阻断洋葱根尖细胞中DNA的复制

B．用改良苯酚品红染液处理根尖可使染色体着色

C．制作临时装片前可用卡诺氏液维持细胞的活性

D．低倍镜视野中所有细胞染色体数都已发生改变

阿糖胞苷是一种嘧啶类抗癌药物，在细胞中能有效抑制DNA聚合酶的合成。当阿糖胞苷进入癌症患者体内后，机体短期内可能发生的明显变化是

A．神经递质的合成减少，神经系统兴奋性降低

B．淋巴细胞的生成减少，机体的免疫功能下降

C．糖蛋白的合成增加，癌细胞的转移速度变慢

D．促进抑癌基因表达，癌细胞的细胞周期变长

细胞中绝大多数需要能量的生命活动都由ATP直接供能，下列叙述正确的是

A．ATP合成酶通过为ADP供能和降低活化能来催化ATP的合成

B．无光条件下，线粒体是植物叶肉细胞中能产生ATP的唯一场所

C．马拉松运动中，骨骼肌细胞内ATP的水解速率远大于合成速率

D．细胞中的能量通过ATP在吸能和放能反应之间的循环实现流通

Akita小鼠是一种糖尿病模型小鼠，该小鼠由于胰岛素基因突变干扰了胰岛素二硫键的形成，大量错误折叠的蛋白质累积在内质网中，导致相关细胞的内质网功能持续紊乱，并最终启动该细胞的凋亡程序。下列叙述不正确的是

A．胰岛素空间结构的形成离不开内质网的加工

B．内质网功能紊乱会诱发某些特定基因的表达

C．Akita小鼠胰岛A细胞和胰岛B细胞大量凋亡

D．Akita小鼠体内肝脏细胞合成糖原的速率减慢

下图表示某植物叶片暗反应中C3和C5化合物微摩尔浓度的变化趋势，该植物在Ⅰ阶段处于适宜环境条件下，Ⅱ阶段改变的环境条件是降低光照强度或者降低CO2浓度中的某一项。下列分析正确的是

A．图中物质甲转变成乙需要消耗光反应提供的ATP

B．图中Ⅱ阶段所改变的环境条件是降低了光照强度

C．Ⅱ阶段甲上升是因为叶绿体中[ H ]和ATP的积累

D．Ⅱ阶段光合速率最大时所需光照强度比Ⅰ阶段低