6．下列各种生理现象中，没有直接涉及到细胞间信息交流的是（　　）

	A．	精子与卵细胞的结合		B．	肝细胞表面的糖蛋白结合胰岛素
	C．	兴奋在神经元之间传递		D．	水分子进入细胞

5．回答有关胚胎工程的问题：
（1）为了获得足够数量的卵细胞，先利用促性腺激素刺激供体雌性鼠超数排卵，然后从输卵管冲取，获取的精子也要进行获能处理，在获能液或专用受液中完成体外受精．
（2）早期胚胎在发育培养液中培养，当胚胎培养到桑椹胚或囊胚阶段时，可进行胚胎移植．通过胚胎分割技术可获得遗传物质相同的两个胚胎，但要将囊胚阶段的内细胞团均等分割．若要鉴定胚胎的性别，可获取滋养层细胞进行做鉴定．
（3）在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行同期发情处理．
（4）胚胎干细胞形态上具有体积小，细胞核大，核仁明显的特性，它在添加抑制因子的培养液中可以维持不分化的状态．

4．图是制备分泌抗X抗体的过程，根据图解回答问题：

（1）给小鼠注射抗原的目的是产生相应的B淋巴细胞．
（2）在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有体外无限增殖和分泌特异性抗体的特性．
（3）由图中可看出，单克隆抗体制备过程运用了动物细胞融合和动物细胞培养的细胞工程技术，③特有的促融方法是灭活病毒．
（4）图中有两次筛选过程，步骤⑤⑥的目的是筛选出能产生特定抗体的细胞，后者筛选的原理是抗原-抗体杂交．
（5）单克隆抗体最重要的用途是制成生物导弹，可在原位杀死癌细胞．

3．下面是一项“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答：
本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素．所用的人胰岛素基因是依据植物偏爱密码子的原则来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在C端加上KDEL的内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解．将该基因置于CaMV 35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素．
（1）此基因工程中的目的基因是人胰岛素基因，将人工合成的DNA片段拼接在一起，所需要的酶是DNA连接酶，T₄-DNA连接酶还可以连接平末端．
（2）要想在体外获得大量该目的基因的片段，可以采用PCR扩增技术（用字母）．
（3）试分析在C端加上KDEL的内质网滞留序列，为什么可以避免胰岛素在植物细胞中的降解？使胰岛素合成后在植物内质网中保存，以免在细胞内被降解．
（4）用目的基因与农杆菌的Ti质粒结合构建表达载体，该表达载体的组成中不应含有的是④⑦（从下列选项中选择）．
①目的基因   ②CaMV 35S启动子  ③果实专一性启动子2A12   ④RNA引物
⑤标记基因   ⑥T-DNA            ⑦RNA聚合酶基因片段      ⑧终止子
（5）若培育转基因动物，用显微注射法，将目的基因导入受精卵中．要确定目的基因是否整合到染色体上，一般需用放射性同位素标记（或荧光分子标记）的目的基因（单链）做探针，与转基因小鼠细胞中提取的核DNA进行分子杂交．

2．下面是以小鼠为对象进行的研究，请回答问题：
（1）在小鼠细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用胰蛋白酶处理．动物细胞培养液的成分通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有动物血清、血浆．为了防止污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素，并且一般需将细胞置于含95%的空气加5%CO₂的混合气体的培养箱中进行培养，其作用是维持培养液的PH，
（2）为使外源基因在后代中长期保持，可将转基因小鼠体细胞的细胞核转入去核的卵细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体．
（3）在细胞培养过程中，通常在冷冻（或超低温、液氮）条件下保存细胞，因为在这种条件下，细胞中酶的活性降低，细胞的代谢速率降低．

1．如图为牛胚胎移植的基本程序，请据图回答：

（1）图中a、b、c过程分别是指超数排卵处理、胚胎的收集（冲卵）、胚胎移植．
（2）供体母牛的主要职能是能产生具有优良遗传特性的胚胎；受体母牛必须具备的条件是健康的体质和健康的繁殖能力．
（3）生物技术包含的内容很丰富，生物技术的应用带给人类很多福音，但也存在着安全性和伦理方面的争议．关于克隆技术在人类中的应用，我国政府的观点是禁止生殖性克隆不反对治疗性克隆．

20．新疆是我国重要的畜牧业省区之一，但当地羊的产肉率和产量远远不能满足市场的需求，每年都要从青海等省份调进大批羊肉．自2009年9月开始，新疆启动了优质种羊万枚胚胎移植工程，有4 000多只新疆本地肉用羊“怀上”并最终产下品质优良的“后代”．胚胎移植的基本程序如图，请据图回答：

（1）从受精卵→胚胎→幼羊的过程体现了受精卵具有全能性．
（2）选择供体母羊、供体公羊的要求是具有优良遗传性状的同种羊．对供体母羊进行超数排卵时应注射促性腺激素．
（3）判断是否受精的标志是卵黄膜和透明带间隙是否出现两个极体．
（4）胚胎分割时，一般采用发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚．在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要特别注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育．直接移植给受体母羊多个胚胎，产生的多个后代的基因型相同吗？不一定；通过胚胎分割产生的两个或多个个体有（填“有”或“没有”）相同的遗传物质．

19．人的血清白蛋白（HSA）在临床上需求量很大，通常从人血中提取．但由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血 液制品顾虑重重．如果应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能．其大致过程如下：
Ⅰ．采集良种供体奶牛的卵母细胞和精液，通过体外受精，形成奶牛受精卵；
Ⅱ．将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵，形成重组细胞；
Ⅲ．电脉冲刺激重组细胞促使其形成早期胚胎；
Ⅳ．将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛．
请回答下列问题：
（1）步骤Ⅰ中，在体外受精前，需要对奶牛的精子进行获能处理．受精时，往往一个卵母细胞只能和一个精子结合，受精过程中防止多精入卵的生理反应包括透明带反应和卵黄膜封闭作用
（2）实验步骤Ⅲ中，进行动物早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和动物血清．
（3）实验步骤Ⅳ中，在胚胎移植前可以取囊胚的滋养层细胞 做DNA分析鉴定性别，应选择性别为雌性的奶牛胚胎进行移植．
（4）若需迅速得到大量转基因奶牛，现有两种处理方法：
方法A：在步骤Ⅳ中将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞，让其分别发育成一头小牛．进行上述操作时，应选择发育良好形态正常的桑椹胚或囊胚进行操作．
方法B：在步骤Ⅳ中将早期胚胎细胞的细胞核移植到普通黄牛的去核卵细胞细胞中，使其重组并发育成新胚胎．为获得大量可供移植的胚胎细胞核，可将早期胚胎细胞分离出来，在添加抑制因子培养液中，将其培养成能够增殖而不发生分化的胚胎干细胞，再从该细胞中提取所需的细胞核．上述两种方法中，最能保持步骤Ⅳ中早期胚胎细胞遗传特征的是方法A．

18．利用转基因奶牛乳腺生物反应器生产人的生长激素，需要构建一种能高水平表达的基因表达载体，选择合适的基因启动子至关重要．由于无法由基因表达产物推知启动子的碱基序列，运用PCR技术单独克隆启动子存在困难．科研人员经过长期研究，终于发明了如图所示的一种克隆启动子的方法．请分析回答：

（1）培育转基因奶牛时，需要在生长激素基因编码序列前插入乳腺蛋白基因的启动子；构建的基因表达载体导入动物受精卵常用显微注射技术．
（2）由基因表达产物无法推知启动子碱基序列，其原因是基因中启动子的碱基序列不能被转录．
（3）过程①需选择的限制酶是BamHⅠ，过程③需选择的限制酶是HindⅢ．过程④需要使用的工具酶是热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．
（4）过程④中可以根据编码序列两端的部分碱基序列设计引物进行扩增．运用PCR扩增DNA片段的原理是DNA双链复制．

17．基因工程又叫做基因拼接技术．该技术能够通过对生物的基因进行改造和重新组合，产生出人类所需要的基因产物．自20世纪70年代基因工程发展起来以后，人们开始采用高新技术生产各种基因产品．下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1和图2示基因工程部分操作过程：

限制酶	BamHⅠ	HindⅢ	EcoRⅠ	SmaⅠ
识别序列及切割位点	G↓GATCC CCTAG↑G	A↓AGCTT TTCGA↑A	G↓AATTC CTTAA↑G	CCC↓GGG GGG↑CCC

（1）从表中四种酶的酶切割位点看，可以切出平末端的酶是SmaⅠ．
（2）将目的基因与质粒DNA缝合时，两条链上的磷酸、脱氧核糖在DNA连接酶的作用下连接起来，形成磷酸二酯键；两条链间的碱基对通过氢键连接起来．
（3）图2中的质粒分子可被表中EcoRⅠ酶切割，切割后，质粒含有2个游离的磷酸基团．
（4）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越高．
（5）在相关酶的作用下，甲与乙能否拼接起来？并说明理由．能，二者具有相同的黏性末端．