为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。

（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用 技术从陆地棉基因文库中获取酶

D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，所含三种限制酶（ClaI、SacI、XbaI）的切

点如下图所示。则用 和 酶处理两个基因后，可得到 端与

端（填图中字母）相连的融合基因。

（2）将上述融合基因插入右上图所示Ti质粒的T-DNA中，构建 并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含 的固体培养基上培养得到含融合基因的单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的侵染液。

（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是 。

（4）进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过 技术，可培育成转基因油菜植株。用 法在分子水平上可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。

下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有_ __、 ____个游离的磷酸基团。

（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越__________。

（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割的原因_______ _____。

（4）与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止___________________________________________________

（5）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在_________________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

（6）基因工程中利用乳腺生物反应器生产-抗胰蛋白酶，应选用__________切割含有目的基因的DNA片段和载体，并用__________方法导入__________中，再利用SRY探针 （Y染色体上的性别决定基因）进行检测，将检测反应呈________（选填“阳”、“阴”）性的胚胎进行移植培养。

下图是植物细胞杂交过程示意图，请据图回答：

（1）植物体细胞杂交的第①步是去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体。目前此步骤最常用的方法是 法，也就是在温和的条件下用 等分解植物的细胞壁。

（2）②过程的发生必须进行人工诱导。人工诱导原生质体融合的原理是 ，常用的化学方法是用 试剂作为诱导剂诱导融合。动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法类似，动物细胞的融合还常用到 作为诱导剂。

（3）与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为 。

（4）④过程称为 ，⑤过程称为 。若利用此技术生产治疗癌症的抗癌药物——紫杉醇，培养将进行到 （填字母编号）即可。

（5）植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值，其突出的优点是可以 。

在20世纪初，科学家用植物细胞杂交方法，将白菜的原生质体和甘蓝的原生质体融合，成功地培育出了“白菜﹣甘蓝”杂种植株，据图回答下列问题：

（1）过程b完成的标志是__________。要促进杂种细胞的分裂生长，培养基中应有营养物质和激素，其中激素包括_____和_____两类植物激素。

（2）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是_________，c涉及的分裂方式为___________________。

（3）若白菜细胞内有m条染色体，甘蓝细胞含n条染色体，则“白菜﹣甘蓝”细胞内含____条染色体；若杂种细胞培育成为“白菜﹣甘蓝”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于几倍体植株？__________。

（4）要制备“白菜﹣甘蓝”人工种子，要选取具有生根发芽能力的__________（结构），包裹上人工种皮制得。

下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。

（1） 技术和 技术是获得单克隆抗体的基础。

（2）图中A过程是从小鼠的脾脏中取得 细胞，该细胞能够产生 。从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射 类物质。

（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比。最大的优越性是 。

（4）制备过程中，第二次筛选的目的是 。

（5）杂交瘤细胞体外培养过程中，为避免毒害，常采取的措施是 。

（6）如果破坏杂交瘤细胞中的核仁，抗体合成将不能进行，因该结构与 的形成有关。

动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。

(1)肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞 。

(2)气室中充入5％ C02气体的主要作用是 。

(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗生素的 ，以保证抗生素对肝脏无害。

(4)有机物X有毒性，可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。

材料用具：肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂)；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液(使染色体着色)，有机物X溶液等。

实验过程：

①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取4等份，备用。

②利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置，按下表步骤操作(“√”表示已完成的步骤)。

上表中还需进行的操作是 。

③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。

④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察 ，并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明 。

初级精母细胞变成次级精母细胞时 ( )

A．染色体数目减半，DNA分子数目减半

B．染色体数目减半，DNA分子数目加倍

C．染色体数目不变，DNA分子数目加倍

D．染色体数目不变，DNA分子数目减半

细胞减数第一次分裂过程中不会出现 ( )

A．同源染色体配对(联会)

B．四分体中的非姐妹染色单体之间交叉、互换

C．同源染色体彼此分离

D．姐妹染色单体分离

下列有关四分体的叙述，正确的是 ( )

A.每个四分体包含一对同源染色体的四个染色单体

B.经过复制的同源染色体都能形成四分体

C.四分体时期可能发生姐妹染色单体间的交叉互换

D.四分体出现在减数第一次分裂的每个时期

仅考虑核DNA，下列人体细胞中染色体数可能相同，而DNA含量一定不同的是 ( )

A．初级精母细胞和精细胞 B．精原细胞和次级精母细胞

C．卵原细胞和卵细胞 D．初级卵母细胞和次级卵母细胞