9．某同学欲获得纯净的细胞膜，以研究其结构与功能．请你设计一个简易的实验：
（1）选取人体的A（A．成熟红细胞 B．口腔上皮细胞 C．白细胞）作为获取细胞膜纯净物的来源，是因为没有细胞核和具膜结构的细胞器．
（2）将选取的上述材料放入试管中，然后加入清水，由于渗透作用，一段时间后细胞将破裂，再用离心法获得纯净的细胞膜，上清液中含量最多的有机物是血红蛋白．

8．为了得到普洱茶中产蛋白酶的微生物，研究人员进行了一系列筛选、检测．
（1）研究人员称取普洱茶1g，加入99mL无菌水，制备稀释10²倍的茶叶水．再将茶叶水进行梯度稀释，获得A103、10⁴、10⁵倍的稀释茶叶水．取100μL稀释茶叶水，用（稀释）涂布法接种到奶粉培养基，37℃条件下培养4-5天，在培养基中选择菌落周围的透明圈（或“水解圈”）较大的菌株作为目的菌株．
（2）将获得的多个目的菌株接种于液体茶汤培养基中培养．已知氨基酸都能够和茚三酮反应生成蓝紫色物质，因此可以利用分光光度计测定茶汤中游离氨基酸的量．先用已知浓度的氨基酸溶液测定结果绘制标准曲线，再分别测定培养每个菌株的液体茶汤培养基的吸光值，与标准曲线比较，计算出该茶汤中游离氨基酸的量，氨基酸含量高的，即为蛋白酶产生量高的菌株．该实验中应测定不接种（或“接种灭活菌株”）的液体茶汤培养基的游离氨基酸含量，作为对照组的数据．

7．表皮生长因子受体（EGFR）在某些癌细胞表面明显增多，针对EGFR的靶向治疗越来越受到研究者的关注．
（1）研究者提取了癌细胞表面的EGFR，并注射到小鼠体内．一段时间后，取小鼠的脾脏组织，剪碎后用胰蛋白酶使其分散成单个细胞．将得到的脾脏细胞与骨髓瘤细胞诱导融合后，依次通过选择培养基筛选和抗体阳性（或“抗原-抗体杂交”）检测，筛选得到所需的杂交瘤细胞，并从细胞培养液中获得待测单克隆抗体．
（2）研究者将待测单克隆抗体作为抗原注射到异种动物体内进行免疫，制备出抗EGFR单克隆抗体的抗体，然后将辣根过氧化物酶与该抗体结合，制备出酶标记抗体．将EGFR结合到固相载体上，加入待测的单克隆抗体，再将酶标记抗体加入反应体系．然后向反应体系中加入白色底物（可被辣根过氧化物酶催化形成蓝色产物），反应体系中蓝色的深浅可以反映出待测单克隆抗体的含量．
（3）研究者分析所制备单克隆抗体的蛋白质结构，设计新的氨基酸序列，通过分子生物学的手段对控制合成该抗体的基因进行修饰改造，从而解决鼠源抗体在人体内的免疫排斥问题．研究者要利用大肠杆菌来表达新的单克隆抗体，降低生产成本，还需要解决抗体在大肠杆菌细胞内翻译后无法正确加工的问题．

6．科研人员利用野生型二倍体马铃薯（2n=24）和抗青枯病的二倍体茄子（2n=24）进行体细胞杂交，培育抗青枯病马铃薯．
（1）自然界中马铃薯和茄子间存在生殖隔离，难以通过有性生殖产生后代．
（2）科研人员将马铃薯和茄子的叶片用纤维素酶和果胶酶分解处理，获得有活力的原生质体．将马铃薯和茄子的原生质体融合，融合细胞在培养基中培养，培养基中需要加入（一定浓度的）植物激素，促进形成愈伤组织和再分化形成杂种植株．
（3）科研人员从PCR鉴定为阳性的杂种植株中选出杂种植株B，用流式细胞仪进一步测定二倍体马铃薯、二倍体茄子和杂种植株B的DNA相对含量结果如图．

依据上述结果预测，马铃薯-茄子四倍体融合细胞的DNA相对含量约为125．据图中结果推测，杂种植株B应为六倍体，判断依据是DNA相对含量175的细胞，与两个二倍体马铃薯和一个二倍体茄子的DNA量相一致．
（4）取杂种植株B的根尖制成临时装片，进一步从染色体水平进行鉴定．在显微镜下找到有丝分裂中期的细胞，观察并统计来自茄子和马铃薯的染色体数目，若来自茄子和马铃薯的染色体数分别为24和48，则支持上述推测．
（5）为确定杂种植株是否符合育种要求，还需对其进行青枯病抗性检测．

5．研究发现，斑马鱼的HuC基因在早期胚胎神经细胞中选择性表达，为了研究该基因转录起始位点上游的部分序列对该基因表达的影响，科研人员做了如下实验．
（1）为确定HuC基因的转录起始位点，提取斑马鱼早期胚胎神经细胞的总RNA，以与HuCmRNA互补的一段单链DNA序列作为义务引物，加入逆转录酶，获得cDNA．对该cDNA的序列进行测定，与HuC基因的序列比对，确定转录起始位点，定为+1号碱基，其上游的碱基定为负值．
（2）为了探究转录起始位点上游不同长度片段在基因转录中的作用，科研人员从基因组（选填“基因组”或“cDNA”）文库中获取该转录起始位点上游的片段，用限制酶和DNA连接酶处理此片段和含GFP（绿色荧光蛋白）基因的载体，获得重组DNA分子．
（3）用不同种类的限制酶重复步骤（2），获得不同长度的重组DNA分子，通过显微注射方法分别导入斑马鱼的受精卵细胞，通过荧光显微观察早期胚胎神经细胞肌肉细胞中的荧光强度，结果如图所示．

①获得图中所示的重组DNA分子，需要用到的限制酶没有7种．
②据图分析，缺失HuC基因上游的-251bp至-1bp片段就会造成HuC基因在所有细胞中表达被完全抑制．-1962bp至-432bp片段的存在会部分抑制HuC基因在肌肉细胞中的表达，对神经细胞中的表达无显著影响．

4．cAMP（环化-磷酸腺苷）是一种细胞内的信号分子．研究表明，cAMP对初级卵母细胞完成减数第一次分裂有抑制作用，大致机理如图所示．

（1）由图可知，被激活的酶A能催化ATP能脱去两个磷酸基团并发生环化形成cAMP，cAMP能活化酶P，活化的酶P能抑制初级卵母细胞分裂为次级卵母细胞和极体．
（2）女性在胚胎时期卵原细胞就发育成为初级卵母细胞，但初级卵母细胞启动减数第一次分裂则需要等到进入青春期之后．依据上图推测，进入青春期后女性的初级卵母细胞恢复分裂的信号途径是信号分子2作用于S₂蛋白，通过G₂蛋白抑制酶A，细胞内的cAMP浓度降低，活化的酶P减少，解除了对减数第一次分裂的抑制作用．
（3）初级卵母细胞的不均等分裂依赖于细胞膜内陷位置形成的缢缩环．有人认为cAMP抑制减数第一次分裂是因为影响了缢缩环，为此搜集了小鼠的初级卵母细胞，在诱导恢复分裂后，用两种特异性药物（药物H和药物F）进行了实验，结果如图所示．

①应从小鼠的卵巢（器官）中获取初级卵母细胞，然后转移到37℃，含5%CO₂的恒温培养箱中培养．
②判断两种特异性药物的作用：药物F特异性活化酶A，药物H特异性抑制酶P．
③由实验结果分析，cAMP抑制减数第一次分裂的原因可能是阻止缢缩环的形成（或“促进缢缩环的退化”）及干扰缢缩环的定位．

3．科研人员研究了日光温室中的黄瓜叶片的光合作用．
（1）与大田相比，日光温室光照强度不足，生长的黄瓜植株形态上出现植株高大、叶片多、叶面积大等适应性特征，导致叶片相互遮阴严重．
（2）研究者分别测定日光温室中同一品种黄瓜不同叶位叶片的光合速率，实验结果如图所示．据图可知，日光温室内黄瓜叶片的光合速率从大到小依次为中上位叶、上位叶和基部叶．研究者推测，在于叶片中叶绿体的发育状况不同有关．
（3）为证实上述推测，研究者进一步观察不同叶位叶片的叶绿体超微结构，得到下表所示结果．

叶位	基粒厚度（μm）	片层数
上位叶	1.79	10.90
中上位叶	2.46	17.77
基部叶	3.06	17.91

①叶绿体基粒厚度和片层数等超微结构的必须在电子显微镜下观察．实验结果表明，不同叶位叶片光合速率的高低与叶绿体超微结构的观察结果不一致．
②叶绿体中光合色素分子对光的吸收发生在类囊体膜上，虽然基部叶的叶绿体超微结构特征是对弱光的一种适应，但是基部叶光合速率仍然最低．因此进一步推测，除了叶龄因素外，光合速率的差异可能还与叶片接受的光照强度不同有关．
（4）为证实（3）中推测，可在同一光照强度下测定不同叶位叶片的光合速率，与（2）的结果相比较，若不同叶位叶片光合速率的差异减小，则证实这一推测．
（5）根据上述研究结果，请你为温室栽培提高黄瓜产量，提出可行建议：摘除基部叶（衰老叶片）、适当补光．

2．线粒体不仅是细胞的“能量工厂”，也在细胞凋亡的调控中起重要作用，如图所示．

（1）线粒体中的细胞色素c嵌入在线粒体内膜的脂双层中，参与有氧呼吸第三阶段的化学反应．
（2）当紫外线、DNA损伤、化学因素等导致细胞损伤时，线粒体外膜的通透性发生改变，细胞色素c被释放到细胞溶胶（或“细胞质基质”）中，与蛋白A结合，在ATP的作用下，使C-9酶前体转化为活化的C-9酶，活化的C-9酶激活C-3酶，引起细胞凋亡．
（3）活化的C-3酶可作用于线粒体，加速细胞色素c的释放，从而加速细胞的凋亡，这是正反馈调节机制．
（4）细胞凋亡是细胞的程序性（或“编程性”）死亡，凋亡细胞解体后被吞噬细胞吞噬，由细胞内的溶酶体将其消化．

1．下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是（　　）

	A．	培养原理都是细胞的全能性		B．	都通过有丝分裂增加细胞数目
	C．	培养材料都必须取自分生组织		D．	都经过脱分化恢复细胞全能性

20．花椰菜（2n=18）易患黑腐病，造成减产，黑芥（2n=16）对黑腐病有较好的抗性．研究者诱导花椰菜原生质体与紫外线处理的黑芥原生质体融合，得到染色体数分别为20、25和26的三个抗黑腐病的新品种，这三个新品种中均含有花椰菜的两个完整染色体组．下列相关叙述中，合理的是（　　）

	A．	需用胰蛋白酶处理花椰菜和黑界获得原生质体
	B．	染色体数为26的新品种一定是三倍体
	C．	三个新品种的抗病基因可能来自不同染色体
	D．	三个新品种花椰菜均不能形成可育配子