4．某生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）．培养基成分如表所示，实验步骤如图所示．请分析回答问题：

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4•7H2O	0.2g
葡萄糖	10g
尿素	1g
琼脂	15g
溶解后自来水定容到1000mL

（1）从培养基的物理性质分析，该培养基属于固体培养基；从培养基的用途分析，该培养基属于选择培养基．
（2）在实验过程中：①培养基、培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶、吸管；③瘤胃中液体；④涂布器．其中需要灭菌是①、②、④（填序号）．
（3）分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．甲同学坚信自己的实验结果是准确的，则甲同学的实验结果产生差异的原因最可能是①（填序号）
①取样不同    ②培养基污染     ③操作失误    ④没有设置对照
（4）为确定实验中微生物属于尿素分解菌，可在培养基中加入酚红指示剂，若菌落变成红色，说明瘤胃中的微生物能分解酵素．理由是细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，PH增高，使酚红指示剂变红．
（5）为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数，将接种的培养皿放置在37°C恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有红色环带的菌落数，结果如表，其中10⁶或10⁵倍的稀释比较合适．

稀释倍数	103	104	105	106	107
菌落数	＞500	367	248	36	18

（6）若要在右图实验中对瘤胃中的目的菌进行计数，应采用什么计数法？活菌计数法（或间接计数法），该方法的缺点是容易导致结果偏小，请写出结果偏小的原因两个或多个细胞可能共同形成一个菌落，导致结果偏小（一些细菌在培养过程中死亡后，不能形成菌落，导致结果偏小）．（写出一项即可）

3．癌症免疫治疗位于2013年度十大科学突破之术．免疫系统识别和摧毁异常细胞的能力可能可以成为阻止癌症发展的一个手段．PD-1（programmed death 1）是活化的T细胞、B细胞等淋巴细胞表面的一种免疫抑制性跨膜蛋白质分子，它可以阻止T细胞全力攻击“入侵者”，就像刹车的作用，而pd-1抗体（也称pd-1抑制剂）可以促进T细胞的增殖，分化和淋巴因子的产生，是近年治疗一些晚期癌症的特效药．请根据题中信息回答下列有关免疫调节的问题：
（1）免疫系统可以抑制癌症的发生，体现了其监控和清除的功能；细胞癌变后，主要是细胞免疫免疫起作用（填“体液免疫”或“细胞免疫”）．
（2）下列选项中，pd-1抗体发挥作用的场所是C．
A．内环境       B．细胞内液       C．细胞膜        D．组织液和血浆
（3）请根据题中信息分析，在健康人体内阻断pd-1，将导致机体患下列哪种疾病A．
A．自身免疫病       B．过敏反应       C．艾滋病        D．胸腺发育不良
（4）异体器官移植容易产生排斥（排异）反应，因此，器官移植后，促进（填“促进”或“阻断”）病人pd-1的功能，将有利于供体器官的存活．

2．图Ⅰ是某组织局部结构模式图．图Ⅱ是人体甲状腺激素分泌的分级调节示意图，甲、乙、丙分别代表腺体名称，X、Y代表激素名称．下列叙述不正确的是（　　）

	A．	图Ⅰ中，红细胞通过协助扩散吸收血糖进行无氧呼吸产生CO2
	B．	某人长期营养不良，则会引起图Ⅰ中A液增多
	C．	地方性甲状腺肿大与图Ⅱ中Y激素分泌过量有关
	D．	图Ⅱ中甲既是神经系统的一部分，又能分泌激素，还能受激素调节

1．下列有关生物科学史的叙述，错误的是（　　）

	A．	1880年，恩格尔曼以水绵为实验材料，发现了光合作用的场所
	B．	1928年，温特通过实验证明并提取了影响胚芽鞘弯曲生长的物质，命名为生长素
	C．	1958年，斯图尔德以胡萝卜韧皮部为实验材料，证明了植物细胞具有全能性
	D．	1970年，科学家用荧光物质标记细胞膜上的蛋白质，证明了细胞膜上的蛋白质是可以运动的

20．细胞的生命历程就像一个电脑程序，从分裂产生，多分化、衰老、凋亡，都是正常细胞按顺序必须经过的阶段．下列有关细胞生命历程的叙述，错误的是（　　）

	A．	正常细胞进行有丝分裂增殖不改变遗传物质
	B．	通过细胞分化，可以使细胞具有更高的全能性
	C．	细胞核中的DNA数目不会随细胞衰老而减少
	D．	细胞被病毒侵染后会裂解死亡，这不一定是细胞凋亡的结果

19．下列有关元素和化合物的叙述，正确的是（　　）

	A．	酶和激素都直接参与细胞中的多种代谢
	B．	等质量的糖原和脂肪相比，前者体积小而储能多
	C．	C、H、O、N、P是ATP、核苷酸、磷脂共有的组成元素
	D．	蛋白质遇高温变性时，其空间结构被破坏，肽键数减少

18．营养缺陷型菌株就是在人工诱导（或自发突变）下，微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏掉，使代谢过程中的某些合成反应不能进行，从而为工业生产积累大量的原料产物．如图是实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程，请回答．

（1）过程①的方法为稀释涂布平板法，与基本培养基相比，待测培养皿中特有的成分有氨基酸．
（2）过程②应将印在丝绒布上的菌落先转印至基本培养基上，原因是防止基本培养基中混入特殊的营养成分．
（3）为进一步完成对初检的缺陷型菌株的鉴定，实验人员进行了如下操作：
①用接种针挑取菌落A（选填“菌落A”或“菌落B”）菌落接种于盛有完全培养液的离心管中，28℃震荡培养1-2天后，离心，取沉淀用（无菌）生理盐水洗涤菌体3次并制备成菌悬液．
②吸取1mL菌悬液加入无菌培养皿中，倾注约15mL融化并冷却至40-50℃的基本琼脂培养基，冷凝后用记号笔在培养皿的皿底划分五个区域，做好标记．
③在划分的五个区域上放入少量分组的氨基酸结晶或粉末（五组混合氨基酸如表所示），经培养后，观察生长圈出现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型．

组别	所含氨基酸
A	组氨酸	苏氨酸	谷氨酸	天冬氨酸	亮氨酸
B	精氨酸	苏氨酸	赖氨酸	甲硫氨酸	苯丙氨酸
C	酪氨酸	谷氨酸	赖氨酸	色氨酸	丙氨酸
D	甘氨酸	天冬氨酸	甲硫氨酸	色氨酸	丝氨酸
E	胱氨酸	亮氨酸	苯丙氨酸	丙氨酸	丝氨酸

在上述鉴定实验中，发现在培养基的A、D区域出现生长圈，则说明该缺陷型属于天冬氨酸缺陷型．

17．融合PCR技术是采用具有互补末端的引物，将不同来源的扩增片段连接起来的方法，其过程如图1所示．图2是中间载体1和中间载体2（利用融合PCR技术构建成）构建成叶绿体定点整合表达载体示意图（限制酶酶切位点标注于载体外侧），叶绿体定点整合表达载体通过与叶绿体基因的同源重组，将目的基因整合于叶绿体DNA上的特定位点上．请据图回答下列问题．

（1）图1第一阶段中PCR至少进行2次循环，才能获得双链等长的DNA，第二阶段中引物2与引物3部分碱基的互补配对关系使得两DNA能成功“搭桥”连接起来．
（2）若通过融合PCR技术将启动子、标记基因、目的基因、终止子拼接起来，需要设计8种引物，其中能够起着“搭桥”作用的引物有6种．
（3）图2中需使用Spe I、Sal I（填限制酶）和DNA连接酶将两中间载体构建成定点整合表达载体，途中定点整合表达载体上未标出的结构是复制原点．
（4）叶绿体定点整合表达载体中叶绿体同源重组基因1和叶绿体同源重组基因2（填基因）能使目的基因准确插入叶绿体DNA上的特定位点上．与利用农杆菌转化法相比，利用定点整合表达载体将目的基因导入叶绿体中的优点是能实现定点整合到叶绿体中，且不易随花粉扩散带来安全问题．

16．如图是江苏省某市建设的综合养鱼的生态系统的结构示意图，请分析回答．

（1）从生态系统组成成分分析，能进行过程①的生物属于生产者，其中罗非鱼占第二营养级．
（2）利用不同种鱼类栖息水层不同这一特点，进行混合放养模式，其优越性在于使得营养、空间等资源得以充分利用，据图判断，最有可能生活在同一水层的两种鱼类是草鱼和鳊鱼，依据是具有相同的食物资源．
（3）定期向养殖塘中投入一定量的动物粪便是为了提高商品鱼的输出量，但在投放过程中不可过量，原因是动物粪便投入过多会造成水体富营养化，使该生态系统的稳定性受到影响．
（4）该综合养鱼的生态系统建设遵循的基本原理是物质循环再生原理、物种多样性原理等．

15．大肠杆菌中直接编码乳糖代谢所需酶类的基因叫结构基因，包括基因lac Z、基因lac Y、基因lac A，结构基因的上游有3个对结构基因起调控作用的核苷酸序列，其中操纵基因对结构基因起着“开关”的作用，直接控制结构基因的转录，调节基因能够调节操纵基因状态，从而对“开关”起着控制作用，如图是科学家提出的一种基因表达调控假设．请回答下列问题：

（1）细胞中RNA聚合酶的基本单位是氨基酸，它在基因中的结合位点称为启动子．
（2）图1中，过程①发生的场所是大肠杆菌拟核部位，过程②中遗传信息的准确传递，主要依据碱基互补配对原则及氨基酸的密码子．
（3）图2中一个mRNA可翻译出多种蛋白质，其原因是一个RNA上有多个起始密码或者翻译后一条肽链，被切成多条肽链．
（4）研究发现，当培养基中只含乳糖时，大肠杆菌才能合成乳糖代谢所需酶，其原因是当乳糖进入大肠杆菌细胞后，阻遏蛋白与乳糖结合，失去了与操纵基因结合的能力，保证RNA聚合酶正常发挥功能；菌体内乳糖的浓度不会过高，满足大肠杆菌需要即可，因为酶基因操纵组会受到乳糖浓度的反馈抑制，该反馈抑制的意义在于既保证了大肠杆菌能量的供应，又可以避免物质和能量的浪费．