①卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在39℃、5%CO2的培养箱中培养22～24h。

②卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，判断其是否成熟，统计结果如表1。

③体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微镜观察判断是否完成受精。

④早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养44～48h后检查分裂情况，每隔48h 更换一次培养液，第5～9天观察囊胚发育情况，统计结果如表2。

（1）步骤①中，细胞培养箱中加5% CO2 的作用是_________________。

（2）步骤②中，成熟卵母细胞内染色体的行为特征是_____________________________，步骤③中，判断是否受精的依据是在卵细胞膜和透明带的间隙可否观察到_____________。

（3）步骤④中，受精卵经过卵裂期、________（时期）发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是_______________________、__________________________。

（4）根据实验数据分析，亚麻酸溶液为200μmol·L-1 时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起________作用。

（5）本实验结果表明，______________μmol·L-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利，其判断依据是__________________________________________________。

（1）将鼠细胞和人细胞在CO2培养箱中培养一段时间，用_____处理，获取实验用的单细胞悬液。

（2）将两种细胞在37℃下混合培养，在培养液中加入_______诱导融合，形成融合细胞，一般两两融合的细胞有____种。

（3）细胞膜的主要成分是______和蛋白质。将连接了荧光染料的抗体与融合细胞在一定条件下培养，抗体与融合细胞的膜蛋白(抗原)特异性结合，其目的是标记膜蛋白，以便于显微镜观察。用荧光显微镜观察融合细胞表面荧光的颜色和____，开始时，鼠的细胞为绿色，人的细胞为红色，两种颜色不混合；一段时间后，可观察到红绿荧光交替分布的“嵌合体”。统计______，结果如下图所示。

（4）科学家据此提出两种假说解释嵌合体的形成。

假说一：融合细胞合成了新的膜蛋白；

假说二：原有膜蛋白在细胞膜平面上运动。

①使用_______抑制剂和ATP合成抑制剂分别处理融合细胞，均对嵌合体形成没有显著影响，这个结果否定了假说一。

②在15℃、20℃、26℃的培养温度下重复上述实验，这些实验的结果为________，为假说二提供了证据支持。

【题目】数量性状通常显示出一系列连续的表现型。现有控制某高等植物植株高度的两对等位基因A、a和B、b（已知这两对基因位于一对同源染色体上），以累加效应决定植株高度，且每个显性基因的遗传效应是相同的。纯合子AABB高50cm，aabb高30cm。这两个纯合子杂交得到，产生四种配子的比例为3：3：2：2。自交得到，在中，表现40cm高度的个体所占比例为

A.37.5%B.34%C.26%D.8%

（1）以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是________________________。

（2）若想培育一株新品种，既有此植物的性状还有其他植物的性状，理论上可以采用______________技术，细胞融合成功的标志是杂种细胞再生出新的____________，该技术的优点是_______________________________。

（3）图中A、B、C所示的是不同的培养结果，该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的，这两种激素是_________________，A中的愈伤组织是叶肉细胞经__________形成的。

（4）若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖，在培养时，___________（填“能”或“不能”）采用花药离体培养，原因是__________________________________________________。

注：Ampr/Kmr分别为氨苄青霉素/卡那霉素抗性基因。origin为复制原点，其余为限制酶酶切位点。

（1）对双子叶植物进行基因工程改造最常用的方法是____________，还需结合__________技术才能获得新性状的植株。

（2）中间载体通常用______________法导入微生物中扩增，含有中间载体②PrbcS*T的微生物________（“能”或“不能”）在含有卡那霉素的培养基中生长，________（“能”或“不能”）在含有氨苄青霉素的培养基中生长。

（3）经酶切后凝胶电泳，测得2B片段为0.4kb，经图示信息分析，Prbcs*T的长度约为____________________。据图分析，中间载体②2B形成中间载体②PrbcS*T，需要使用限制酶_________________切割。

（4）在T基因前“点突变引入NcoⅠ”酶切位点的方法是：设计包含_________识别序列的引物，然后用PCR技术扩增。

A. 改变通入气体种类，可以研究呼吸作用类型对发酵的影响

B. 果酒发酵中期通入氮气，酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸

C. 果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关

D. 气体入口与气体出口可以交换使用

材料与用具：小鼠肺癌细胞悬浮液、物质X、癌细胞培养液、生理盐水、蒸馏水、活细胞检测仪、细胞培养瓶等（说明：对动物细胞的培养过程和检测方法不做具体要求）

（1）肺癌细胞是由正常细胞转化而来，除保留了原来细胞的某些特点外，其中最重要的特征是能无限增殖和细胞表面________减少。

（2）实验思路：

①取五个大小相同的细胞培养瓶，编号为A、B、C、D、E，每组加入等量的肺癌细胞悬浮液和_____________，并测定初始细胞数。

②在B～E组中依次加入_________________不同浓度的物质X（浓度分别为1．0μg/mL、2．0μg/mL、3．0μg/mL、4．0μg/mL），A组则加入___________作为对照；每组设置三个重复样品。

③以上各组均置于______________。

④检测与数据处理：分别在24h、48h、72h时取样检测各组存活的细胞数，取____值，求细胞存活率（细胞存活率=实验组／对照组×100％）。

（3）实验结果见下图∶

根据实验结果得出实验结论______________________。

A. 作为受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因，以便于筛选

B. 若大肠杆菌的菌落为蓝色，则质粒未导入大肠杆菌

C. 选择培养基中除必需的营养物质外，还应加入适量氨苄青霉素

D. 应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养

A.蛙的红细胞B.霍乱弧菌C.HIN1病毒D.皮肤癌细胞

A. 过程①选择胚胎干细胞作受体细胞是因为其具有发育全能性

B. 过程②中必须通过一定方法筛选含有目的基因的胚胎干细胞

C. 过程③中导入囊胚的细胞数不同，子代小鼠的性状一定相同

D. 过程④中为提高成功率，需对代孕母鼠进行超数排卵处理