（l）为构建重组质粒，研究小组从数据库查找到VNNl的DNA序列，并设计引物。上游引物：5-AAGCTTCCGCTGCACCATGACTACTC-3下划线为HindⅢ酶切位点），下游引物：5-GGATCCGCTCGAGCTACCAACTTAATGA-3（下划线为BamHI酶切位点），之后进行PCR扩增，PCR的原理是________。扩增后的VNNI基因要与含GFP基因的载体连接，需用________（填具体酶）切割VNNI基因和含GFP基因的载体，再用________酶处理，构建重组质粒。

（2）GFP基因在重组质粒中可作为________________，其作用是________。用之前相同的限制酶对GFP - VNNI重组质粒切割后，进行电泳鉴定时得到如图1所示的部分条带，结果表明________。

（3）IL -6为体内重要的炎症因子，能与相应的受体结合，激活炎症反应。图2为GFP-VNNI重组质粒对细胞分泌IL -6的影响，由此说明________________，同时发现与正常组比较，空质粒转染组IL-6的表达有轻微升高，造成这种现象的可能原因是________________________。

A.图甲表示猞猁和雪兔之间的关系

B.图甲表示小家鼠和褐家鼠之间的关系

C.图乙表示豆科植物和根瘤菌之间的关系

D.图丙表示双小核草履虫和大草履虫之间的关系

（l）配制培养基：加入牛肉膏、蛋白胨、琼脂、NaCI、H2O及________等并灭菌；该培养基按功能划分，属于_______培养基。

（2）分离希瓦氏菌：将10 g土样溶于90 mL蒸馏水中，再稀释成多个倍数，取多个稀释倍数的土壤样品液0．1mL分别接种到多个平板上，这样做的目的是____；培养一段时间后，A、B研究员在105稀释倍数下得到的结果：A涂布4个平板，统计的菌落数分别是150、178、259、310;B涂布4个平板，统计的菌落数分别是152、165、175、184，则每克土壤样品中的希瓦氏菌数量最可能为________个。

（3）进一步纯化希瓦氏菌：采用平板划线法接种培养一段时间后，发现第一划线区域上都不间断地长满了菌落，第二划线区域上几乎无菌落，分析出现此现象的原因可能是________（答出两点）。

（4）研究人员还欲采用测定ATP含量的方法估算希瓦氏菌数，该方法的依据是____________，此方法与显微镜直接计数相比，得到的希瓦氏菌数目________（填“多”或“少”），原因是____________。

A.生长素既能促进生长也能抑制生长

B.对于植物的不同器官来说生长素促进生长的最适浓度不同

C.根对生长素浓度最敏感

D.图中“D”点对应的生长素浓度对根、芽、茎都起促进生长 的作用

A.鲍森·詹森的实验证明，胚芽鞘尖端产生的影响可以透过琼脂片传递给下部

B.拜尔的实验证明，胚芽鞘弯曲生长是因为尖端产生的影响在其下部分布不均匀造成的

C.温特实验中如果在切去尖端的胚芽鞘一侧放上没有接触过胚芽鞘尖端的琼脂块，胚芽鞘能够生长但不弯曲

D.温特的实验进一步证明胚芽鞘的弯曲生长确实是一种化学物质引起的

回答下列问题：

（l）有眼和无眼中显性性状是____，B．b基因位于________（填“常”或“X”）染色体上。

（2）亲本的基因型为____；让F2中的棒眼果蝇自由交配，理论上F3中无眼雄果蝇所占的比例是____。

（3）已知染色体缺失会导致基因丢失，若同源染色体均不携带控制眼形的基因时，胚胎致死。某实验小组发现F2中出现一只圆眼雌果蝇，现要探究该雌果蝇产生的可能原因，请以实验 中所出现的个体为材料设计最简杂交实验，并得出实验结论。（不考虑环境因素的影响）

实验思路：__________________________；

实验结论：________________________。

（1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是_________。

（2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应该选择________菌落进一步纯化，选择的依据是________。

（3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即_______。

（4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。

①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加_________，三处滴加量相同。

②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明___________；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明___________。

A. 在AB段限制反应速率的主要因素是酶的用量

B. 在BC段限制反应速率的因素之一是反应物浓度

C. 在AC段增加反应物浓度,可以明显加快反应速率

D. 在该实验给定条件下,果胶酶的最佳用量是B点对应的值

A. ①步骤使用的培养基已经灭菌

B. ①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行

C. ③到④的过程中，每次接种前后都需要对接种环进行灼烧处理

D. 图中操作结束后需在培养基皿盖上标注菌种及接种日期等信息

（l）图中五种成分构成___________；分析图示可知，图中没有标出的生态系统的组成成分是________。

（2）该生态系统中碳元素以_____形式在A～D之间流动；图示可以发生还原氢与氧气结合的过程是______（填图中序号）。

（3）根据图中营养结构，若要使D同化的能量增加100kJ，则至少需要第一营养级提供的能量为________kJ；B用于生长、发育和繁殖的能量流动去向是________。

（4）亚马逊河流域的森林持续发生大火，给当地的生态环境造成了严重的影响，这说明生物多样性具有______价值。运用恢复生态学重建了该森林曾有的植物和动物群落，该过程属于群落的______演替。