（1）Cre酶是该技术的关键酶，能随机识别两个相同的loxP序列，催化如图1所示的反应。

通过Cre-loxP系统敲除基因的基本原理是：Cre酶随机识别DNA分子上两个相同的loxP序列并从特定位点切断DNA双链，切口被重新连接后，保留片段_____，从而实现目标基因的敲除。

（2）研究者设计图2所示的DNA片段，转人小鼠体内，获得仅含一个图2所示片段的转基因小鼠。

①构建基因表达载体时，需用限制酶和_____酶处理三种荧光蛋白基因、两种loxP序列，将它们与脑组织特异表达启动子M相连接。

②研究者用显微注射法将图2所示表达载体导入小鼠的_____中，得到仅含一个图2 所示片段的转基因小鼠，再经过进一步筛选，获得纯合的转基因小鼠a。

（3）图2所示序列的两个loxP1之间或两个loxP2之间的基因，只会被Cre酶识别并切割一次。为使脑组织细胞中Cre酶的表达受调控，研究者将Cre酶基因与启动子N（由信号分子X开启)连接，获得纯合转基因小鼠b，将图3所示纯合小鼠a和b杂交，得到F1。

①无信号分子X作用时，F1脑组织和其他组织细胞的色彩分别是_____。

②有信号分子X作用时，F1：出现“脑彩虹”，请阐述机理：_____。

（4）研究者希望具有更丰富的颜色组合，即在一个细胞内随机出现两种或两种以上颜色叠加，形成更多颜色的“脑彩虹”，请依据题目信息，写出设计思路：_____。

（1）与A方式相比，B方式的主要特点是需要借助_______，参与该物质合成、加工的具膜细胞器有____________________。

（2）胰岛B细胞分泌胰岛素是通过______（请填图中英文字母）方式进行，随后胰岛素随血液运输到达靶细胞，与细胞膜上的________结合，体现细胞膜的________功能。该种运输方式体现出细胞膜具有_________的特点，具有这种特点的原因是_________________________。

（3）胰岛素属于一种分泌蛋白，教材中研究分泌蛋白的合成和运输过程所用方法为________，该实验的因变量为________________________。

（4）A、B、C、D四种方式中需要消耗能量的运输方式是_________________。

（1）科研人员在图1豌豆幼苗的c点处用IAA运输抑制剂处理后，ab段GA1 含量显著降低。由于豌豆幼苗的______________________部位产生的IAA，______________________运输至c点以下，因此可以作出两种假设，请补充完成假设二。

假设一：GA1在ab段中合成，来自c点以上的生长素促进合成过程。

假设二：GA1在c点以上合成并向下运输，_____________________。

（2）已知豌豆幼苗中GA1的合成途径如图2所示，酶1催化无活性的GA20转变成GA1。酶2催化则使GA20转变成无活性的GA29。为验证上述假设一，科研人员做了图3所示实验，三组豌豆都用放射性GA20处理d处叶片，一段时间后，测定ab段放射性强度。

①据图可知，第2组去除顶端导致ab段GA1含量________________，第3组与第1组结果比较， IAA处理导致GA1含量比未处理时增加了约________________倍。

②分析第2组和第3组结果，结合图2推测_________________。

③第2组ab段放射性总量明显高于第1组，且GA29含量显著高于GA1，其原因是_________________

（3）若从蛋白质水平进一步验证假设一成立，请写出研究思路并预期结果：____________________。

（1）配制培养基并分离微生物的步骤是：计算→称量→溶化→调pH→______________→倒平板→______________→培养。筛选微生物的一般思路是，根据表型特征利用____培养基进行筛选。

（2）若某种微生物没有明显表型特征时，就无法通过上述方法筛选，科研人员通过图所示的流程进行筛选。

①据图分析，科研人员利用目标微生物编码膜蛋白的____________________，构建表达载体，并导入用________________处理的大肠杆菌细胞中，获取大量膜蛋白。

②用获取的膜蛋白作为抗原，利用兔子制备单克隆抗体的具体流程是：_____。

（3）将上述带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合，目的是_____目标微生物。 用流式细胞仪分离不同荧光强度的细胞，结果如图2所示。对结果进行比较，应从区域_____（选填图中数字）的细胞中筛选目标微生物。

（1）细胞生命活动过程中产生衰老、受损的细胞器或功能丧失的蛋白复合物时，B蛋白在细胞内招募L-II蛋白（由细胞质基质中的L-I蛋白转变而来）等蛋白，启动自噬过程，形成自噬体，自噬体最终融入_____中降解，这有利于保持细胞结构和功能的_____。

（2）科研人员用MV、CQ （自噬抑制剂）和RAPA（自噬诱导剂）处理胰腺癌细胞，96 h后 测定细胞内B蛋白、L-II蛋白、L-I蛋白含量，并以细胞内恒定表达的p-actin蛋白含量作为参照，得到下表所示结果。

①本实验中，作为对照组的是_____组。

②L-II蛋白是定位在自噬体膜上的蛋白，在自噬过程结束时会重新转变成l- I蛋白， 因而“L-II蛋白/L-I蛋白”可作为_____的一个观测指标。

③比较1、2、3组结果，推测自噬过程_____（选填“促进”或“抑制”）癌细胞增殖，从物质与能量的角度分析，其原因是_____。

（3）综合上述研究，请写出MV影响胰腺癌细胞增殖的机制：_____。MV虽有抗胰腺癌的应用前景，但目前研究结果在很多方面尚不足以支持临床医学应用，请阐述理由：_____。

A.该实验不能选取绿色植物成熟的叶肉细胞进行

B.若乙溶液的浓度稍增大，则曲线中b点左移

C.两条曲线的差异仅是由甲、乙溶液浓度不同导致的

D.6 min时取出两个细胞用显微镜观察，均可看到质壁分离现象

A.该载体最可能为环形DNA分子

B.两种限制酶在载体上各有一个酶切位点

C.限制酶R1与R2的切点最短相距约200 bp

D.限制酶作用位点会导致氢键和肽键断裂

A. 右侧液面高度下降；胰岛素 B. 两侧液面高度不变；蔗糖酶

C. 两侧液面高度不变；麦芽糖酶 D. 两侧液面高度不变；蒸馏水

A. 某种药物只抑制图1中的c而对a无影响，说明该药物抑制了c运输过程中载体的作用

B. 图2表示的植物细胞可能发生了质壁分离和复原的过程，此时植物细胞所处的溶液一定是KNO3溶液

C. 图2中A点细胞失水量最大，此时细胞的吸水能力最强

D. 若温度降低，对图1中的a,b,c都会造成影响

A.已分化的小鼠体细胞在特定条件下可恢复全能性

B.四倍体囊胚由于染色体数目变异而无法发育为成体

C.本实验使用到体外受精和胚胎分割移植等技术

D.诱导多能干细胞技术可应用于组织器官移植