（09江苏卷）32．（8分）动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。

（1）肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞                 。

（2）气室中充入5％C0₂：气体的主要作用是          。

（3）培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗生素的             ，以保证抗生素对肝脏无害。

（4）有机物X有毒性，可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。

材料用具：

    肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素（刺激淋巴细胞分裂）；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液（使染色体着色），有机物X溶液等。实验过程：

①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取4等份，备用。

②利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置，按下表步骤操作（“√”表示已完成的步骤）。

上表中还需进行的操作是                           。   

③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。

④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察          ，并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明                    。

（09四川卷）30.（22分）回答下列Ⅰ、Ⅱ两个小题。

Ⅰ.将小鼠胚胎干细胞定向诱导分化成一种特定的细胞（命名为M细胞），再将M细胞移植到糖尿病模型小鼠（胰岛细胞被特定药物破坏的小鼠）体内，然后小鼠的血糖浓度，结果如图所示（虚线表示正常小鼠的血糖浓度值）。请回答相关问题：（1）实验用的胚胎干细胞取自小鼠的早期囊胚，取出胚胎后一般用　　　　　酶将其分散成单个细胞。

（2）根据实验结果可以判定M细胞已具有　　　　　　细胞的功能。说明判定的理由　　　　。

（3）用胰岛素基因片段做探针，对小鼠胚胎干细胞和M细胞进行检测。请在下表的空格中填上检测结果（用“+”表示能检测到，用“-”表示不能检测到）。

上述实验结果表明，胚胎干细胞通过　　　　　　　　定向分化为M细胞。

（4）若将M细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中，重组细胞能否分化为其他类型细胞？

　　　　，请说明理由　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

（09山东卷）35.（8分）（生物一现代生物科技专题）

     人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疾苗生产和抗体制备的流程之一如下图：

请回答：

（1）过程①代表的是         。

（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用           和

          两种工具酶。

（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，

可选用图中基因工程生产的          所制备的疫苗。

对该传染病疑似患者确诊时，可以疑似患者体内分离病毒，

与已知病毒进行       比较；或用图中的           进行特异性结合检测。

（09浙江卷）1．用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是

A．都需用培养箱                    B．都须用液体培养基

C．都要在无菌条件下进行                 D．都可体现细胞的全能性

（09全国卷Ⅰ）4．下列关于植物体细胞杂交或植物细胞质遗传的叙述，错误的是

A．利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育远缘杂种

B．不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程

C．两个不同品种的紫茉莉杂交，正交、反交所得F₁的表现型一致

D．两个不同品种的紫茉莉杂交，F₁的遗传物质来自母本的多于来自父本的

（09上海卷）37.（9分）人体细胞内含有抑制癌症发生的P⁵³基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。

（1）目的基因的获取方法通常包括________和________。

（2）上图表示从正常人和患者体内获取的P⁵³基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，在上图中用方框圈出发生改编的碱基对，这种变异被称为________。

（3）已知限制酶E识别序列为CCGG,若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的P⁵³基因部分区域（见上图），那么正常人的会被切成________个片段，而患者的则被切割成长度为________对碱基和________对碱基的两种片段。

（4）如果某人的P⁵³基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对的四种片段，那么该人的基因型是________（以P⁺表示正常基因，Pⁿ表示异常基因）。

（09江苏卷）34．（7分）苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（为抗氨苄青霉素基因），据图回答下列问题。

（1）将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有          种DNA片段。

（2）图中②表示 HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得      种重组质粒；如果换用Bst l与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得          种重组质粒。    

（3）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的              。

（4）图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T—DNA导人植物细胞，并防止植物细胞中             对T—DNA的降解。

（5）已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞                            。 

（6）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的

                基因频率的增长速率。

（09重庆卷）31.（16分）小鼠基因敲除技术获得2007年诺贝尔奖，该技术采用基因工程、细胞工程、杂交等手段使小鼠体内的某一基因失去功能，以研究基因在生物个体发育和病理过程中的作用。例如现有基因型为BB的小鼠，要敲除基因B，可先用体外合成的突变基因b取代正常基因B，使BB细胞改变为Bb细胞，最终培育成为基因敲除小鼠。

（1）基因敲除过程中外源基因是否导入受体细胞，可利用重组质粒上的            检测。如果被敲除的是小鼠抑癌基因，则可能导致细胞内的                 被激活，使小鼠细胞发生癌变。

（2）通过基因敲除，得到一只AABb小鼠。假设棕毛基因A、白毛基因a、褐齿基因B和黄齿基因b均位于常染色体上，现要得到白毛黄齿新类型小鼠，用来与AABb小鼠杂交的纯合亲本的基因型是             ，杂交子代的基因型是        。让F₁代中双杂合基因型的雌雄小鼠相互交配，子代中带有b基因个体的概率是                      。不带B基因个体的概率是                   。

（3）在上述F₁代中只考虑齿色这对性状，假设这对性状的遗传属X染色体伴性遗传，则表现黄齿个体的性别是           ，这一代中具有这种性别的个体基因是           。

（09福建卷）32.（10分）

    转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：

（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶       ，对       进行切割。

（2）培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有         ，作为标记基因。

（3）香蕉组织细胞具有               ，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的         。

（09天津卷）8．（30分）水稻种子中70％的磷以植酸形式存在。植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子，同时，排出的大量磷进入水体易引起水华。

（1）磷元素除了形成植酸外，还可以出现在下列_____________分子或结构中（多选）。

A.核糖             B.ATP               C.核糖体                D.核膜

（2）种植芦苇能有效抑制水华的发生，表明芦苇与引起水华的藻类关系是_____________。

（3）植酸酶可降解植酸，在谷物类饲料中添加植酸酶可提高饲料的_____________  利用率。

（4）酵母菌中植酸的活性较高。下图是从不同类型酵母菌的发酵液中提取植酸酶的工艺流程。

据图回答：

①植酸酶________________（Ⅰ/Ⅱ）属于分泌蛋白。

②若植酸酶Ⅰ和Ⅱ的肽链组成不同，其差异体现在______________________。

③提纯的植酸酶需做活性条件测定。右图为测定结果。

图中的自变量可为____________________________(答一种)；

因变量可以通过测定______________________来表示。

（5）为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程。

据图回答：

①图中基因组文库____________（小于/等于/大于）cDNA文库。

②B过程需要的酶是______________；A、C过程中_____________（可以/不可以）使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。

③目的基因Ⅰ和Ⅱ除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中___________。和_____________为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显著特点是_________________________。

（6）已获得的转植酸酶基因水稻品系植酸含量低，但易感病，下图为选育低植酸抗病水稻品种的过程。图中两对相对性形状分别由两对基因控制，并独立遗传。

    采用上图育种过程，需从_______________代开始筛选，经筛选淘汰后，在选留的植株中低植酸抗病纯合体所占的比例是______________。选留植株多代自交，经筛选可获得低植酸抗病性状稳定的品性。