下列物质或结构中含有糖类的是

①ATP  　②DNA　  ③染色体　  ④细胞膜　  ⑤脂肪  　⑥淀粉酶

A．①②③④        B．①③④⑥      C．①②③⑥       D．②③④⑥

目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒，pBR322质粒是较早构建的质粒载体，其主要结构如图一所示。

（1）构建人工质粒时要有抗性基因，以便于                     。

（2）pBR32Z分子中有单个EcoRI限制酶作用位点，EcoR 1只能识别序列一GAATTC一，并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoRI的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端。                    。

（3）pBR322分子中另有单个的BamHI限制酶作用位点，现将经BamHI处理后的质粒与用另一种限制酶BgIⅡ处理得到的目的基因，通过DNA连接酶作用恢复          键，成功的获得了重组质粒。说明                                      。

（4）为了检测上述重组质粒是否导入原本无amp^R和tet^R的大肠杆菌，将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果（空圈表示与图二对照无菌落的位置）。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是                 ，图三结果显示，多数大肠杆菌导入的是                  。

糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年上升的趋势。下图是利用基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图，请据图回答。

（1）过程②必需的酶是            酶。

（2）能否利用人的皮肤细胞来完成①的过程？       ，为什么？                                              

                                                                  。

（3）若A中共有a个碱基对，其中腺嘌呤有b个，则③④⑤过程连续进行5次，至少需要提供鸟嘌呤         个。

（4）在利用AB获得C的过程中，必须用                切割A和B，再加入                 ，才可以形成C。

（5）在进行基因工程操作过程中，胰岛素基因必需与运载体——质粒结合后才能进入大肠杆菌体内，并且在细菌内增殖。质粒的化学本质是一种                   。

（6）不同生物间基因的移植成功，说明生物共用一套                    。

番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。（操作流程如图）请回答：

（1）过程①需要的工具酶有                               。

（2）在构建基因表达载体时，除了要在重组DNA中插入目的基因外，还需要有

                                                                  。

（3）提取目的基因采用的限制性核酸内切酶的识别序列和切点是—↓GATC—。在目的基因的两侧各有1个酶的切点，请画出目的基因两侧被限制酶切割后形成的黏性未端的过程示意图。

                                                                      。

（4）在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做             。

（5）从图中可见，mRNA1和mRNA2的结合直接导致了                 无法合成，最终使番茄获得了抗软化的性状。

（6）培养②、③为植物组织培养过程中的                          。

（7）上述转基因番茄会通过花粉将抗多聚半乳糖醛酸酶基因传播给其它植物而造成基因污染，原因是                                      ，请你提出一个上述转基因工程的改良方案，以防止这样的污染发生。

下图为利用生物技术获得生物新品种的过程．据图回答：

（1） 在基因工程中．A→B为____________技术。利用的原理是_______________，其中a为：_______________的过程，b过程使用的酶是___________________。

（2）B→C为转基因绵羊的培育过程，c过程用到的生物技术主要有动物细胞培养和______________技术．在动物细胞培养过程中，需让培养液中含有—定量的CO₂，其主要作用是_______________________。

（3）B→—D为抗虫棉的培育过程，其中d过程常用的方法是__________________，要确定目的基因（抗虫基因）导入受体细胞后是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作。请写出在个体水平上的鉴定或方法过程：__________________________。

天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转人酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：

　 （1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是　　　　　　　　 ，用　　　　　　　 将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子　　　　　 ，以完成工程菌的构建。

　 （2）若要鉴定淀粉酶基因是否插人酿酒酵母菌，可采用的检测方法是　　　　　　 ；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用　　　　　　　　　　　 检测。将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一定时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈，请解释该现象发生的原因。

（3）如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？

（4）微生物在基因工程领域中有哪些重要作用？

以重组DNA技术为核心的基因工程正在改善着人类的生活。请回答下列问题：

（1）获得目的基因的方法通常包括                和                     。

（2）切割和连接DNA分子所使用的酶分别是               和                。

（3）运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或             ，后者的形状成   。

（4）由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率          。所以在转化后通常需要进行             操作。

（5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者生产的胰岛素在功能和

        序列上是相同的。

降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。

在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：

（1）Klenow酶是一种________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。

（2）获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G^↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G^↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。

①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它_________________________。

②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是___________________________。

③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有_______________。

（3）经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是_______________。

（4）上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是____________________。

科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G^↓GATCC— ，限制酶II的识别序列和切点是—^↓GATC—，据图回答：

（1）过程①表示的是采取                   的方法来获取目的基因。

（2）根据图示分析，在构建基因表达载体过程中，应用限制酶         切割质粒，用限制酶     酶切割目的基因。用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过          原则进行连接。

   （3）人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是             。

（4）人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为                  。

写出目的基因导入细菌中表达的过程                                     。

（5）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的，说明已导入了                  ，反之则没有导入。

（多选）一对等位基因经某种限制性内切酶切割后形成的DNA片段长度存在差异，凝胶电泳分离酶切后的DNA片段，与探针杂交后可显示出不同的带谱。根据该特性，就能将它作为标记定位在基因组的某一位置上。现有一对夫妇生了四个儿女，其中1号性状特殊（如右图），由此可推知这四个儿女的基因型（用D、d 表示）不正确的是（　 ）

　　 A．1号为X^dX^dB．2号为X^DY　　　　　

　　 C．3号为Dd　　　 　　　　　　　　　　　　　　 D．4号为DD