德国科学家最近培育出一种可以生产乙肝疫苗的转基因胡萝卜,通过生吃或者榨汁食用,就可以达到接种疫苗的效果。下图为乙肝疫苗的转基因胡萝卜生产部分过程的示意图。

    (1)获得含目的基因DNA的方法一般有 

    (举两个例子),图中乙肝疫苗基因的获得方法需要　　　酶的作用。 

    (2)图中过程c的产物是　　　　,此过程需要通过　　　使质粒与目的基因切口黏合。要检测此产物与不含乙肝疫苗基因的细菌质粒是否相同,最简便的方法可以通过PCR来检测,更精确的方法是　　　　　　　　　　　　。 

    (3)d过程常用的方法是　, 

    导入疫苗基因的胡萝卜细胞若要获得愈伤组织,除需要温度和pH等条件外,还需将该受体细胞置于　　　　条件下进行培养;若要获得胡萝卜幼苗,需适时调整　　　　　(植物激素名称)的浓度比例进行诱导。 

下图是某种动物蛋白质工程的示意图,请分析回答下列问题。

    (1)蛋白质工程与基因工程最大的不同是　　　　的来源不同,图中编号　　　　代表人工合成。 

    (2)为获得较多的受精卵用于研究,⑦过程的处理方案是　　　　　。若⑦过程所得的卵母细胞是从卵巢中获得的,则体外受精前应在体外人工培养至　　　　　　。 

    (3)由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率低,所以在转化后通常需要进行　　　　操作。 

下列图1和图2分别表示固定化酶的反应柱示意图和凝胶色谱法分离蛋白质的示意图,二者具有一定的相似性,结合图示回答相关问题。

    (1)图1中的固定化酶是　　　　,能将葡萄糖转化成果糖,固定该酶的方式为　　　　(“包埋法”“化学结合法”或“物理吸附法”);而对于固定化酵母细胞多采用　　　　法。 

    (2)图1中利用固定化酶与直接使用酶催化反应相比有哪些优点?

    (3)图2中的凝胶颗粒实际上是一些微小的　　　　,图2中最先流出的是相对分子质量　　　　(填“较大”或“较小”)的蛋白质,原因是 

    。 

    (4)图1中的反应柱和图2中的凝胶色谱柱均处于磷酸缓冲溶液中,缓冲溶液的作用是　。 

近十年来,PCR技术成为分子生物学实验室里的一种常规手段,其原理是利用DNA半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如图所示),在很短时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。

    (1)加热使DNA双链打开,这一步是打开　　　　键,称为　　　　,DNA体内复制是在　　　　的作用下使此键断裂。 

    (2)当温度降低时,引物与模板末端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成2条DNA分子,此过程中原料是　, 

    遵循的原则是　。 

    (3)PCR技术的必要条件,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少还需要三个条件,即:液体环境、适宜的　　　　和　　　　。 

    (4)通过PCR技术使DNA分子大量复制,若将一个用¹⁵N标记的DNA分子放入试管中,以¹⁴N标记的脱氧核苷酸为原料,连续复制四次后,则¹⁵N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例为　　　　。　 

下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置,请回答下列问题。

    (1)图甲装置中,B是血红蛋白溶液,则A是　　　　;乙装置中,C溶液的作用是　。 

    (2)图乙装置分离蛋白质的方法叫　　　　,是根据　　　　分离蛋白质的有效方法。 

    (3)用乙装置分离血红蛋白时,待　　　　时,用试管收集流出液,每5 mL收集一管,连续收集。 

现在大力提倡无纸化办公,但是每年仍然不可避免地产生了大量废纸,其主要成分是木质纤维,人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。下图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工作流程,请回答相关问题。

    (1)从生物体内提取出来的酶,将其分离提纯的最简便易行的方法是　　　　　技术,其原理是根据蛋白质分子的　　　　　大小和所带　　　　　多少分离蛋白质。 

    (2)上述工作流程中①环节需要的微生物大多分布在　　　　　的环境中。可利用　　　　　技术,使②中的酶能够重复利用。 

下图表示菊花的嫩枝和月季的花药的离体培养过程,请回答下列问题。

    (1)对菊花来说,要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养,其原因是　; 

    对月季来说,适宜花粉培养的时期是　　　　期。为确定花粉是否处于该时期,最常用的方法是　。 

    (2)月季的花药离体培养与菊花的嫩枝组织培养不同,从植物产生的途径来说,花粉植株产生的途径除了图中所示外,还可以通过　　　　阶段发育而来,这两种发育途径主要取决于　　　　。 

    (3)两种植物组织培养都需要接种,下列关于接种时应注意问题的描述正确的是　　　　。 

    ①接种室要消毒　②操作时戴口罩,便可说话　③外植体可预先用体积分数为70%的酒精浸泡,再用0.1%的氯化汞液消毒即可　④接种操作要在酒精灯火焰旁进行　⑤接种完毕盖好瓶盖

    A.①②③④⑤       B.①②③④

    C.③④⑤       D.①④⑤

    (4)以上植物组织培养过程与微生物的实验室培养不同,但也需要非常严格的操作。使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)称为　　　　,常用的消毒方法是　　　　　　　　　　(至少两种)。 

下图1为人工种子生产过程示意图,图2为图1中③过程的相关操作,据图分析回答下列问题。

    (1)图1中,①②过程分别称为　。 

    (2)图2中,包埋形成人工种子过程中,加热溶解海藻酸钠时需注意用　　　　加热,然后将溶化好的海藻酸钠溶液　　　　后,加入胚状体充分搅拌混合均匀。 

    (3)刚生产的人工种子需要在氯化钙溶液中浸泡一段时间,其目的是使人工种子　。 

    (4)若用图2的方法“制备固定化酵母细胞”,海藻酸钠溶液的浓度对实验结果影响较大,若浓度过高,则　　　　,通常评价该实验结果主要是观察凝胶珠的　　　　。 

    (5)制备固定化酶则不宜用此方法,原因是 

    　　。 

下面是制备固定化酵母细胞的实验步骤,请回答下列问题。

    酵母细胞的活化→配制CaCl₂溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞

    (1)在　　　　状态下,微生物处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复　　　　状态。活化前应选择足够大的容器,因为酵母细胞活化时　 

    　　　　　　　。 

    (2)固定化细胞技术一般采用包埋法,而固定化酶常用　　　　和　　　　方法。 

    (3)影响实验成败的关键步骤是　。 

    (4)海藻酸钠溶化过程的注意事项是 

    。 

    (5)如果海藻酸钠浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目　　　　。如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,说明　。 

    (6)该实验中CaCl₂溶液的作用是 

    　　　　。 

某同学进行苹果汁制作实验,工艺如下图所示。

    请回答下列问题。

    (1)图中用KMnO₄溶液浸泡苹果的目的是　　　　。黑曲霉提取液中含有的　　　　可水解果胶,从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过　　　　方式将酶固定化,酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去　　　　。 

    (2)实验中,操作流程A和B的先后顺序为　　　　。在苹果汁澄清过程中,应关闭的流速调节阀是　　　　。要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否还有果胶,可取一定量的果汁与等量的　　　　混合,如果出现　　　　现象,说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解,应将流速调　　　　。 

    (3)实验后,将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天,该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验,说明固定化酶可被　　　　使用。