多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用问题。

(1)DNA的两条链是反向平行的，通常将__________的末端称为5′端，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的__________开始延伸DNA链。

(2)PCR利用DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代，科学家从一种Taq细菌中分离到__________，它的发现和应用解决了上述问题。要将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来，所用的培养基叫__________。

(3)PCR的每次循环可以分为__________三步。假设在PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在5次循环后，反应物中大约有__________个这样的DNA片段。

(4)请用简图表示出一个DNA片段PCR反应中第二轮的产物。

(5)简述PCR技术的主要应用。

下图为“DNA粗提取和鉴定”实验的相关操作。这些操作目的正确的是(双选)(　　)

A．①是洗涤红细胞，去除血细胞表面的杂质

B．②是溶解DNA，去除不溶于酒精的杂质

C．③是溶解DNA，去除不溶于2 mol/L NaCl溶液的杂质

D．④是稀释NaCl溶液，使DNA的溶解度降低，从NaCl溶液中析出

下列有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中，正确的是(　　)

A．用蒸馏水进行红细胞的洗涤，其目的是去除细胞表面杂蛋白

B．将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较大的杂质

C．血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂

D．整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白的结构

凝胶色谱法分离蛋白质的原理是(　　)

A．根据蛋白质分子的大小

B．根据蛋白质相对分子质量的大小

C．根据蛋白质所带电荷的多少

D．根据蛋白质溶解度的大小

标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是(　　)

A.94 ℃、55 ℃、72 ℃　　　　　B.72 ℃、50 ℃、92 ℃

C.50 ℃、92 ℃、72 ℃          D.80 ℃、50 ℃、72 ℃

下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验原理的叙述正确的是(　　)

A．DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的降低而减小

B．利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA

C．DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂

D．在沸水中，DNA遇二苯胺会出现紫色反应

科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图所示)，请结合图示回答下列问题：

(1)在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分离，形成单个细胞，这个过程中需要利用__________酶处理。

(2)形成重组细胞时应选用__________期的卵母细胞，并去掉其细胞核的原因是___________________________________。

(3)如果重组细胞为贴附性细胞，则在进行原代培养时，会表现出__________和__________等特点。

(4)图中犊牛并非是对体细胞核供体母牛100%的复制，其原因主要有__________、__________。

(5)上图中所示的生物技术整体被称为__________技术。其包括的具体生物技术有__________、__________等。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物__________具有全能性。

下图为“番茄－马铃薯”的培育过程示意图，请据图回答：

(1)在“番茄－马铃薯”的培育过程中，运用了植物细胞工程中的__________技术，原理是__________。

(2)可用____________对番茄和马铃薯细胞进行处理获得原生质体；诱导番茄和马铃薯原生质体融合的化学试剂一般用__________。

(3)愈伤组织常用作诱变育种的理想材料，理由是__________________。

(4)不同物种生物之间存在着天然的__________，用传统的有性杂交方法不可能得到二者的杂种后代，而体细胞杂交可以克服远缘杂交不亲和的障碍。

(5)植物组织培养的培养基中除了含有一定的营养物质之外，还必须含有__________从而促进愈伤组织的形成和再分化；而用合成培养基体外培养动物细胞时，通常需加入__________等一些天然成分。

植物组织培养的过程如下图所示。请分析并回答：

A,愈伤组织B,胚状体C,植株

(1)愈伤组织是由离体的组织或器官通过A__________过程获得的，B、C过程是通过细胞的__________实现的。

(2)胚状体根据其来源不同，可以分为“体细胞胚”和“花粉胚”。

①用花药离体培养可获得“花粉胚”，同种植物的花粉胚与体细胞胚在染色体数目上的主要区别是__________。

②如果用__________处理二倍体植物的花粉胚，能获得可育的植株，该过程是__________育种中不可缺少的步骤。

③在一定条件下培养离体细胞可以形成体细胞胚进而发育成完整的植株，其根本原因是每个细胞都含有__________，这一过程体现了__________。

对于下面制备单克隆抗体过程示意图，不正确的叙述是(双选)(　　)

A．①表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的

B．④中的筛选是通过抗原、抗体反应进行的

C．②促进细胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介导

D．⑤是可以无限增殖的杂交瘤细胞也是癌细胞