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2.在遗传病及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析。PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题:
(1)在相应的横线上写出引物Ⅱ,并在复性这一步骤中将引物Ⅱ置于合适的位置。
(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA分子。
(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记,请分析循环一次后生成的DNA分子的特点:__________,循环n次后生成的DNA分子中不含放射性的单链占总单链的比例为__________。
(4)PCR反应过程的前提条件是__________,PCR技术利用了DNA的__________原理解决了这个问题。
(5)在对样品DNA分析过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是__________。
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1.现代生物学已向两个方面发展,宏观研究的水平为生态系统水平,微观研究的水平为分子水平。对于分子的研究,其物质的提取和分离显得尤为重要。下面是物质提取和分离的相关问题,请回答:
(一)DNA分子的提取和分离
(1)在提取菜花细胞中的DNA时,采用的是研磨法,为什么不能像用鸡血那样,用蒸馏水使其破裂?
(2)在提取实验过程中用到两种浓度的NaCl溶液,说明其作用:
①2 mol/LNaCl溶液:____________________;
②0.14 mol/L NaCl溶液:________________。
(3)在整个操作过程中,每100 mL血液中加入3 g柠檬酸钠的作用是__________。
(4)鉴定DNA所用的试剂是__________。
(二)血红蛋白的提取和分离
(1)在血红蛋白的提取和分离过程中:粗分离、纯化和纯度鉴定时,都会用到缓冲溶液,其作用是__________。
(2)在洗脱过程中,对洗脱液的流速要求稳定的目的是__________。
(三)不同的化学物质,其理化特性不同,提取方法也有所差异,如胡萝卜素不溶于水,易溶于__________,因此可以用__________方法进行提取。
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3.(2012·江苏)某研究组对籼稻开展了组织培养及相关研究,请回答下列问题:
(1)2,4—D常用于籼稻愈伤组织的诱导,对形态的发生有一定的抑制作用。为促进愈伤组织再分化,在配制分化培养基时需__________(填“升高”、“保持”或“降低”) 2,4—D的浓度。
(2)当籼稻愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时,出现具有分生能力的绿色芽点,但不能继续出芽,通常在培养基中添加__________,以促进幼苗形成。
(3)研究中用显微镜可以观察到的现象是__________(填下列序号)。
①绿色芽点细胞排列松散 ②刚融合的籼稻和稗草杂交细胞发生质壁分离 ③胚状体细胞中有叶绿体 ④分化的愈伤组织内各细胞的形态大小一致
(4)经组织培养筛选获得的籼稻叶绿素突变体,其叶绿素a与叶绿素b的比值显著大于对照,叶绿素总量不变。某同学用__________(填序号:①绿色②红色③蓝紫色④黄色)光照射突变体和对照叶片,检测到两者光合放氧速率差异不大。若取等量色素提取液进行层析,会发现突变体第__________条色素带(自上而下)窄于对照组。
(5)胚乳(3n)由一个精子与两个极核受精发育而成。若用籼稻种子的胚乳诱导愈伤组织,培育三倍体,需适时剔除胚,以免胚的存在影响愈伤组织细胞的__________,还可避免再生苗中混有__________。
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2.(2012·江苏)下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述,错误的是( )
A.从酶的固定方式看,吸附法比化学结合法对酶活性影响小
B.作为消化酶使用时,蛋白酶制剂以口服方式给药
C.尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶,可以反复使用
D.将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗,目的是洗去CaCl2和杂菌
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1.(2012·江苏)下列关于“探究加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果”的叙述,合理的是( )
A.先用热水溶解洗衣粉,再将水温调节到最适温度
B.实验的观察指标可以是相同洗涤时间内污渍的残留程度
C.相同pH时加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉
D.衣物质地和洗衣粉用量不会影响实验结果
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7.(广东高考)
(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中,常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板,植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生____________,可根据其大小选择目的菌株,所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物,活性可用一定条件下单位时间的____________表示。
(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如图:
发酵液离心K菌体去除K含酶的
发酵液K透析K透析液(Ⅰ)去除K粗提物(Ⅱ)纯化K纯酶
Ⅰ中的主要成分为____________; Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。
(3)为构建基因工程菌,可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包括多次循环,每次循环包括三步:____________。反应过程中打开模板DNA双链的方法是__________________________。
(4)除植酸酶外,微生物还能应用在哪些酶的生产中?(至少写两种)
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6.某同学为探究加酶洗衣粉的洗涤效果,按下表的顺序进行实验操作:
步骤 | 烧杯(1 000 mL) | |||
Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ | |
注入自来水 | 500 mL | 500 mL | 500 mL | 500 mL |
放入带油渍的衣服 | 一件 | 一件 | 一件 | 一件 |
控制不同水温 | 10 ℃10 min | 30 ℃10 min | 50 ℃10 min | 70 ℃10 min |
加入等量加酶洗衣粉 | 0.5 g | 0.5 g | 0.5 g | 0.5 g |
用玻璃棒搅拌 | 5 min | 5 min | 5 min | 5 min |
观察现象 |
(1)该实验的目的是__________________________。
(2)请分析该同学的实验设计中存在的问题,并提出改进措施。
(3)步骤3和步骤4能否调换?并说明理由。
(4)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号烧杯中加入的自来水、洗衣粉、含油渍的衣服及保温时间、搅拌速度和时间均相同,这是为了____________________________,以便得出科学结论。
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5.以下是生啤酒的酿造实验。请回答问题。
实验原理:固定化酵母细胞的凝胶珠由酵母细胞和海藻酸钠组成,麦芽汁可以渗入到由海藻酸钠和啤酒酵母制成的凝胶珠中。啤酒酵母可以利用自身细胞内的一系列酶将可发酵性糖转化成乙醇。
实验过程:(1)取新鲜斜面上的啤酒酵母,接种于10 mL麦芽汁液体培养基中,25 ℃培养24~30 h。(2)取1.6 g海藻酸钠于无菌小烧杯中,加无菌水少许调成糊状,再加入无菌水至40 mL,在98 kPa条件下灭菌15 min。冷却到45 ℃左右,与预热至35 ℃左右的10 mL酵母培养液混合搅拌均匀,立即倒入带喷嘴的无菌小塑料瓶中(或装有5号针头的注射器外套中),以恒定的速度滴入盛有葡萄糖、氯化钙混合液的容器中,浸泡30 min制成凝胶珠。(3)倒去葡萄糖、氯化钙混合液,用无菌水洗涤凝胶珠三次后,将凝胶珠放入500 mL三角瓶中,加入300 mL无菌麦芽汁液体培养基,置于25 ℃下封口发酵5 d左右,倒出发酵后的麦芽汁即为生啤酒。
(1)凝胶珠是由什么组成的?它有什么作用?
(2)如果进行多批次的生产,本实验中的啤酒酵母与普通发酵中的酶或菌种在使用上有何区别?
(3)固定化酶和固定化细胞技术是利用__________或__________方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术包括__________、__________和__________。其中细胞多采用__________固定化,而酶多采用__________和__________固定化。
(4)制作成功的凝胶珠应用__________,其颜色为__________。将凝胶珠加入用于发酵的葡萄糖溶液后发现有__________产生,同时有__________味散发。
(5)固定化酵母细胞与固定化酶相比具有什么优点?
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4.工业生产果汁时,常常利用果胶酶破除果肉细胞壁以提高出汁率,为研究温度对果胶酶活性的影响,某学生设计了如下实验:
①将果胶酶与苹果泥分装于不同试管,在10 ℃水浴中恒温处理10 min(如图A)。
②将步骤①处理后的果胶酶和苹果泥混合,再次在10 ℃水浴中恒温处理10 min(如图B)。
③将步骤②处理后的混合物过滤,收集滤液,测果汁量(如图C)。
④在不同温度条件下重复以上实验步骤,并记录果汁量如下表:
温度(℃) | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 | 70 | 80 |
果汁量(mL) | 8 | 13 | 15 | 25 | 15 | 12 | 11 | 10 |
根据上述实验,请分析回答下列问题:
(1)果胶酶能破除细胞壁,是因为果胶酶可以促进细胞壁中__________的水解。
(2)实验结果表明,当温度为__________时果汁量最多,此时果胶酶的活性__________。当温度再升高时,果汁量降低,说明____________________________。
(3)实验步骤①的目的是________________________。
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3.若用“①脱分化→②再分化→③→④”表示植物组织培养过程。请回答:
(1)①表示__________,被培养成④的原理是__________。
(2)②表示__________,其细胞特点是
________________________________________________________________________。
(3)若想制备人工种子应选用__________(填标号)。
(4)若①为花药,则是__________,这项技术可用于__________。
(5)若①是胡萝卜根尖细胞,则培养成的叶片的颜色是__________,说明根尖细胞__________________________________________________。
(6)若用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物紫草素,培养将进行到__________(填标号)。
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