供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是（      ）

   A、防止受体牛不愿意接受胚胎

   B、只有受体与供体的生理状态相同，被移植的胚胎才能继续正常发育

   C、只要发情排卵后，各阶段时间内的变化，供、受体生理状态完全相同

   D、同期发情处理后，卵细胞和精子受精结合能力强

英国科学家维尔穆特首次用羊的体细胞（乳腺细胞）成功地培育出一只小母羊，取名“多利”，这一方法被称之为“克隆”，以下四项中与此方法在本质上最相近的是（    　 ）

A.将兔的早期胚胎分割后，分别植入两只母兔的子宫内，并最终发育成两只一样的兔子

B．将人抗病毒基因嫁接到烟草DNA分子上，培育出具有抗病毒能力的烟草新品种

C．将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞

D．将人的精子与卵细胞在体外受精，待受精卵在试管内发育到囊胚期时，再植入女性子宫内发育成“试管婴儿”

如图表示蛙受精卵发育至囊胚过程中的某一变化，若横坐标表示时间，则纵坐标可表示

   A．有机物总量

   B．每个细胞DNA含量

   C．所有细胞体积之和

   D．所有细胞表面积总和与体积总和的比值

表现型不同的母牛生育出基因型完全相同的牛，产生这一结果的最可能的原因是（     ）

A．试管动物培养              B．胚胎移植

C．胚胎分割移植              D．受精卵分割移植

（10分）2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

    注：图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—^↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

（1）在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来？并说出理由：                                    

（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多的方法是      。

（3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是          。获得的转基因克隆猪，可以通过对抗原表达基因的改造从而解决的医学难题是：可以避免               。

（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：          （用数字表示）。

     ①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列    ②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列  ③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）    ④表达出蓝色荧光蛋白。

（10分）将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。请根据以下面的图表回答下列问题。

（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内           的DNA聚合酶，其最主要的特点是                          。

（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？__________。

（3）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为               。

（4）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。

①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到_________种DNA片断。

②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到_________种DNA片断。

回答有关生物工程的问题。（8分）

小鼠是实验室常用的实验动物，如：利用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体、利用小鼠进行DNA重组研究中导致了“基因敲除”技术的出现。

用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体。

（1）．将小鼠等分为两组，甲组定期间隔注射适量的含X病毒的溶液，其目的是____________________；乙组注射________________（作对照）。

（2）．为了保存有价值的杂交瘤细胞系，通常用超低温将其冻存，请分析其原因____________

___________________。

    用小鼠进行DNA重组研究中形成的“基因敲除”技术，能“敲除”DNA分子上的特定基因。该技术的主要过程如下：

第一步：分离小鼠胚胎干细胞，这些细胞中含有需要改造的基因，称“靶基因”。

第二步：获取与“靶基因”同源的DNA片断，利用特定技术在该DNA片段上插入neo^R基因（新霉素抗性基因）成为突变DNA（如下图），使该片段上的靶基因失活。

第三步：将插入neo^R基因（新霉素抗性基因）的靶基因转移入胚胎干细胞，再通过同源互换，用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个，完成对胚胎干细胞的基因改造。

第四步：将第三步处理后的胚胎干细胞，转移到特定培养基中筛选培养。

其基本原理如下图所示：

（3）．第二步中neo^R基因插入靶基因使用的工具酶是                      。neo^R基因不仅能使靶基因失活，还可作为        ；“靶基因失活”的根本原因是             。

（4）．从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞，到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠，运用到的生物技术有            、              等。

（12分）一对健康夫妇生下一男婴，一岁时脑出血死亡，二年后女方怀孕6个月时，经羊水及脐带血诊断为男孩且患血友病，遂引产。于是夫妇俩到广州中山医附属一院做试管婴儿。医生培养7个活体胚胎，抽取每个胚胎1-2个细胞检查后，选两个胚胎移植，最后一个移植成功，出生了一健康女婴，她是我国第三代试管婴儿。请回答：

  （1）试管婴儿技术作为现代生物技术和母亲正常怀孕生产的过程的相同之处是                      ，不同点在于_______________________________。

  （2）如果B、b表示血友病基因或正常基因，则父、母亲的基因型分别是___________、_________。如果该夫妇再生一男孩，患血友病的概率是_________。

  （3）医生抽取活体胚胎的1或2个细胞后，可通过观察____________判断早期胚胎的性别，你认为医生应选用____________性胚胎进行移植，其中人们已能够选取最理想的胚胎，其基因型应该是____________。自然状态下，出现这样的胚胎的概率是____________。该实例体现了现代科学技术应用于社会和人类生活的重要意义。

  （4）供体器官的短缺和排斥反应是制约器官移植的两个重要问题。而治疗性克隆能最终解决这两个问题。下图是治疗性克隆的过程图解：

   Ⅰ.请在上图中横线上填上适当的术语：①　　 　 　　；②　　 　　　　

   Ⅱ.上图中的③④表示的生理过程是　　　　   　　

当内环境的稳态遭到破坏时，必将引起  （     ）

A．酶促反应速率的加快    B．渗透压下降

C．细胞代谢紊乱          D．糖尿病

肌肉注射时，药液进人人体后经过的一般途径是   （    ）

A.血浆→组织液→淋巴→血浆→靶细胞

B．淋巴→血浆→组织液→血浆→靶细胞

D.组织液→血浆→组织液→靶细胞