运用细胞工程技术获得单克隆抗体时,必要的操作是

A．对小动物注射特定抗原              B．融合并筛选杂交瘤细胞

C．原代培养浆细胞                    D．将胰蛋白酶注入小动物腹腔

下列关于生物工程中常见的几种酶的叙述，正确的是

  A．DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端的碱基黏合，形成重组DNA

B．胰蛋白酶是细胞工程中常用的工具酶，可获得单个动物细胞

C．Taq酶是用PCR仪对DNA分子扩增过程中常用的一种耐高温的DNA聚合酶

D．纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生质体，便于植物杂交育种

下列有关克隆技术和胚胎工程的相关叙述，正确的是

A．植物组织培养基中生长素和细胞分裂素的不同配比会影响组织分化

B．动物细胞培养液中添加的抗生素需进行种类和数量的选择以抑制细菌生长

C．胚胎干细胞培养中需冲入氧气和二氧化碳，二氧化碳的主要作用是维持培养液的PH

D．早期胚胎的培养液与动物细胞培养的培养液成分不同之处是不含有动物血清

动物细胞进行传代培养可能发生的变化有

A.细胞形态发生变化                   B.细胞核核型发生变化

C.细胞不断增多，堆叠在一起           D.细胞核体积增大，染色质固缩

日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP会发出绿色荧光，该蛋白质在生物工程中有着广阔的应用前景。请据图回答相关问题。

  (1)绿色荧光蛋白基因在该实验中是做为        基因。

  (2)在②过程进行转基因体细胞的筛选时，比较简易的筛选方法是        。

  (3)在④过程培养重组细胞时，培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素    等。

  (4)以上培育过程中应用到的生物技术有        等。

  (5)在以上③核移植过程中，乙兔提供的细胞应是   ，移核之前要对此去核的原因是        。

下图为哺乳动物胚胎分割和性别鉴定示意图。请据图回答：

（1）胚胎分割时，一般采用发育良好、形态正常的                  。对胚胎进行分割时，要特别注意将                均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。来自同一胚胎分割产生的后代具有相同的遗传物质，因此，胚胎分割可以看作动物         的方法之一。

（2）①过程分割出的少量胚体细胞用来做性别鉴定，该技术常采用的方法是            。

（3）通常胚胎干细胞可以从                           （写出两种方法）中分离得到。

（4）早期胚胎中的胚胎干细胞，不仅可以被应用于哺乳动物胚胎性别鉴定，还可被应用

                       等领域。

应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题：

  资料1：蜘蛛丝(丝蛋白)被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度。可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。

  资料2：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦。将疫苗藏身水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。

(1)过程①⑤所需要的工具酶有                   ，构建的蜘蛛丝蛋白基因表达载体一般由          、          、启动子、终止子等部分组成。

(2) ④过程需要用到的技术是                     。 通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从            中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。

(3)过程⑥常用的方法是                  。

(4)通过⑤⑥⑦培育转基因莴苣，相比诱变育种和杂交育种方法，具有      和        等突出优点。

下图表示用显微注射法导入目的基因获得转基因鼠的过程，据图回答。

（1）受精卵可以从供体母鼠体内获得，也可以通过体外受精获取。

①若受精卵细胞从供体母鼠体内获得，其基本过程是：首先对供体母鼠用促性腺激素进行_________处理，再通过自然交配或________完成受精，最后从供体母鼠输卵管中获得受精卵。

②若受精卵在体外通过体外受精获得，其基本操作过程包括________、________和受精。

③图中雌原核形成的同时在透明带和卵黄膜间会观察到             。

（2）过程Ⅲ表示受精卵经过体外培养，形成早期胚胎，再移植到受体母鼠体内。培养过程中，培养液添加一定量的           ，以防止杂菌污染；在含有5％CO₂的培养箱中进行培养，CO₂的主要作用是              。

（3）用显微注射技术将目的基因导入受体细胞，需要构建基因表达载体，目的是____________

_                   。

降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。

在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：

（1）Klenow酶是一种________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。

（2）获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G^↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G^↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。

①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它_________________________。

②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是___________________________。

③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有_______________。

（3）获得重组质粒如果导入到动物细胞中，最常用的方法是_______________。

（4）上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是____________________。

科学家从某些能无限增殖的细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因（prG），该基因能激发许多动物细胞的分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答以下相关问题：

（1）利用细胞融合技术制备单克隆抗体，促进细胞融合可选择                  方法。

（2）有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如右图

所示。请回答：

②对已导入重组质粒的II进行“检测”的目的是                                  ；

Ⅲ细胞具有的特点是                                                    。

（3）也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字表示该过程：（2分）