应用生物工程技术可获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题。

(1)要获得抗虫基因，可采用__________________________________
等方法，基因工程的核心是________________________________________。
(2)如果要获得一只含目的基因的小鼠，则选择的受体细胞通常是________，原因是______________________________________________。
若用大肠杆菌储存目的基因，则需先将其处理为________细胞。
(3)在培育转人生长激素基因牛的过程中，①过程需要的工具酶是________，②过程常用的方法是____________________________________________。
(4)转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有________。

苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为土壤样品。请回答下列问题。

(1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入________作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基________(A.影响；B.不影响)细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用________法。
(2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于________；使用________法可以在⑥上获得单菌落。
采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养？  ______________________。
(3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小？__________________________。
(4)实验过程中如何防止其他微生物的污染？__________________________。

土壤有“微生物的天然培养基”之称，下图表示对土壤中某种微生物进行分离和计数而进行的对样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图。请据图回答有关问题。

(1)图示统计样品活菌数目的方法叫做________法，主要包括________操作和________操作。
(2)当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的________，一般选择菌落数在________的平板进行计数。
(3)图中各试管间的“箭头”表示的操作过程是________________________。
这一操作过程中每一步都要在火焰旁边进行。
(4)图中选择了10⁴、10⁵、10⁶倍的稀释液进行平板培养，最可能是测定土壤中________的数量，这个平板需要在________温度下培养________d。
(5)如果要想分离分解尿素的细菌，平板中培养基成分的特点应该是_________________________________________________________________；
如果怀疑培养基被污染导致统计结果有误，则需要做对照实验，方法是__________________________________________________________________

我省有大量的盐碱地，科学家利用耐盐碱植物中的耐盐基因，培育出了耐盐水稻新品系。下图是培育过程简图，请回答下面的问题。

(1)目的基因的获取需要__________酶，阶段Ⅰ的核心是
________________________________________________________________。
(2)为保证耐盐基因的正常转录，b上耐盐基因的两端应含有________，将b导入c常用________法。
(3)对耐盐基因转录和表达产物的检测分别采用______、________技术。
(4)阶段Ⅱ的核心过程是________，由耐盐水稻细胞培育成了耐盐水稻植株，说明植物细胞具有_________________________________________。

转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请据图回答下面的问题。

(1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶________，对  ________进行切割。
(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有______________，作为标记基因。
(3)香蕉组织细胞具有________，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的________。

1957年，生物学家了解到，病毒感染的细胞能产生一种因子，这种因子能作用于其他细胞，干扰病毒的复制，故将其命名为干扰素；从1987年开始，用基因工程方法生产的干扰素进入了工业化生产，并且大量投放市场。
(1)若已知干扰素的氨基酸序列，则获取目的基因的较简单方法是________；目的基因还可以从________文库获取，而从cDNA文库中不一定能得到，原因是______________________________。
(2)用限制酶处理质粒和目的基因后，用________酶处理，可形成基因表达载体，该载体的化学本质是________。
(3)转基因技术是否成功，需要对受体细胞进行分子水平的检测，首先是检测受体细胞________上是否插入了目的基因，这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。检测方法是采用________。最后还要检测目的基因是否翻译成了相应的蛋白质，利用的技术是________。

科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下面的问题。

(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增，该技术须用________酶，所需的原料是________。
(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点(如下表)：

限制酶	BamHⅠ	Hind  Ⅲ	EcoR  Ⅰ	Sma  Ⅰ
识别序列及 切割位点

在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kan^r)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。

请据图回答下面的问题。
(1)A过程需要的酶有___________________________________________。
(2)B过程及其结果体现了质粒作为载体必须具备的两个条件是
________________________________________________________________。
(3)C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________。
(4)在D过程中，抗虫基因遗传信息的传递过程是_____________________。
(5)获取真核生物的基因常用的方法是______________，包括_____________。
(6)如果利用DNA分子杂交原理对再生植物进行检测，D过程应该用
_______________________________________________________作为探针。
(7)科学家在进行实验过程中，采用了两种方案：一是将抗虫基因导入离体的棉花叶片细胞进行植物组织培养；请你想另外一种方案：可以将抗虫基因导入植物的________中，再进行培养，导入成功的标志是
_______________________________________________________________。

肺细胞中的let?7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let?7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

图1

图2
请回答有关问题。
(1)进行过程①时，需用________酶切开载体以插入let?7基因。
(2)进行过程②时，需用______酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
(3)研究发现，let?7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取______进行分子杂交，以直接检测let?7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中______(RAS  mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。

科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。下图是转基因抗冻番茄的培育过程示意图。

(1)若图中Ⅱ是科学家构建的鱼抗冻蛋白基因的表达载体，则该基因表达载体的组成通常应包括____________________等。
(2)科学家常采用________法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用________技术检测目的基因是否插入番茄的基因组。
(3)多聚半乳糖醛酸酶(PG酶)可将成熟的番茄果实细胞壁中的多聚半乳糖醛酸降解为半乳糖醛酸，从而导致果实软化。抑制PG酶的活性可以延长番茄果实储藏期，请用文字描述采用蛋白质工程技术降低该酶活性的一般过程。
_______________________________________________________________________________
_____________________________________________________
_________________________________________________________________。