退火温度是影响PCR特异性的较重要的因素。变性后温度快速冷却至40~60 ℃,可使引物和模板发生结合。PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链的重新结合,原因不包括( )

A.由于模板DNA比引物复杂得多

B.引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞

C.加入引物的量足够多而模板链数量少

D.模板链加热解旋已经变性不可能再次结合

PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比,主要有两点不同,它们是( )

①PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNA

②PCR过程不需要DNA聚合酶

③PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的

④PCR过程中,DNA不需要解旋,直接以双链DNA为模板进行复制

A.③④B.①② C.①③D.②④

PCR利用了DNA热变性的原理,PCR仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器,对PCR过程中“温度的控制”的说法中错误的是( )

A.酶促反应需要高的温度,是为了确保模板是单链

B.延伸的温度必须大于退火温度,而小于变性温度

C.DNA聚合酶不具热变性,要用耐高温的聚合酶

D.DNA解旋酶不具热变性,为了确保模板是单链

多聚酶链式反应(PCR)是一种体外扩增DNA片段的技术。可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等方面。回答以下问题:

(1)细胞内DNA复制过程中,引物的作用是 ,而且DNA复制的前提是 。

(2)PCR利用了 原理,可通过控制温度来控制双链的解旋与结合。

(3)PCR技术用到的酶是 ,与细胞内DNA复制时发挥相同作用的酶相比区别在于 。

(4)下面表格是DNA体内复制与PCR反应的部分比较结果。通过比较分析,请推导出PCR反应合成DNA子链时能量来源于 。

(5)假如PCR反应所用的引物含有放射性、模板不具有放射性,且引物不被切除,则经过n次循环,具有放射性的脱氧核苷酸链占总链数的比值为 。

以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的是( )

A.洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂

B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少

C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测

D.在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子量较少的杂蛋白移动慢

凝胶色谱法分离蛋白质时,凝胶的种类较多,但其作用的共同点是( )

A.改变蛋白质分子通过凝胶时的路径

B.吸附一部分蛋白质,从而影响蛋白质分子的移动速度

C.将酶或细胞固定在细胞中

D.与蛋白质分子进行化学反应,从而影响其移动速率

下列关于蛋白质的提取与分离的叙述正确的是( )

A.在凝胶色谱柱内,相对分子质量较大的蛋白质路程较长,但移动速度较快

B.从凝胶色谱柱中最后分离出来的是相对分子质量较小的蛋白质

C.蛋白质的纯化使用最多的方法是SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法

D.分离血红蛋白溶液时,离心管的第三层是脂类物质

在蛋白质的提取和分离实验中,下列对样品处理过程中,正确的是( )

A.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐

B.洗涤时离心速度过小,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果

C.洗涤过程选用0.1%的生理盐水

D.透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质

如图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置,请回答下列问题:

(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有 功能。我们通常选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验,实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是  。

(2)甲装置中,B是血红蛋白溶液,则A是 ;乙装置中,C溶液的作用是 。

(3)甲装置用于 ,目的是 。用乙装置分离蛋白质的方法叫 ,是根据

分离蛋白质的有效方法。

在操作中加样(下图)的正确顺序是 。

(4)最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行 。

红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的。我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白,请回答下列有关问题:

(1)分离蛋白质分子的一种常用方法是凝胶色谱法,也叫做 ,是根据 分离蛋白质的有效方法。

(2)血红蛋白提取和分离的程序可分为 、 、 和纯度鉴定。

(3)洗涤红细胞的目的是 ,以利于后续步骤的分离强化。采集的血样要及时分离红细胞,分离时采用低速短时间 ,然后用胶头吸管吸出上层透明的 ,将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯,再加入 洗涤,如此重复,直至上清液中没有黄色。

(4)将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,加入 和 充分搅拌,红细胞破裂,释放出血红蛋白。