1．下图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是(　)

A．DNA连接酶、限制酶、解旋酶　　 B．限制酶、解旋酶、DNA连接酶

C．解旋酶、限制酶、DNA连接酶　　 D．限制酶、DNA连接酶、解旋酶

2．限制酶是一种核酸内切酶，可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和BglⅡ的识别序列和切割位点。

切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是(　)

A．BamHⅠ和EcoRⅠ　　　　　　 B．BamHⅠ和HindⅢ

C．BamHⅠ和BglⅡ　 　　　　　　　 D．EcoRⅠ和HindⅢ

3．下列关于基因表达载体构建的相关叙述，不正确的是(　)

A．需要限制酶和DNA连接酶

B．必须在细胞内进行

C．抗生素抗性基因可作为标记基因

D．启动子位于目的基因的首端,作用是启动转录

4. 下列关于基因工程的叙述中错误的是(　　 )

A. 基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿定向改造生物，培育新品种

B. 基因工程技术是唯一能冲破远源杂交不亲和障碍，培育生物新类型的方法

C. 基因工程的基本工具是：限制性核酸内切酶、DNA连接酶和基因的运载体

D. 基因工程的研究成果，往往需要通过发酵工程和酶工程来实现产业化

5．在基因工程中，目的基因导入受体细胞后，还要进行目的基因的检测与鉴定。下列属于目的基因检测和鉴定的是(　)

①检测受体细胞中是否有目的基因　　 ②检测受体细胞中是否有致病基因

③检测目的基因是否转录出了mRNA　　 ④检测目的基因是否翻译成蛋白质

A．①②③　 B．②③④C．①③④　 　　 D．①②④

6．多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下Taq酶从引物起始进行互补链的合成。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是： (　 )

　　 A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键　

　　 B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成

　　 C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸

　　 D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高

7．基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G^↓GATCC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-^↓GATC-。根据下图示判断下列操作正确的是(　)

A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割

C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

8. 科学家为提高玉米赖氨酸含量，计划将天冬氨酸激酶的352位的苏氨酸变成异亮氨酸，将二氢吡啶二羧酸合成酶中104位的天冬氨酸变成异亮氨酸，就可以使玉米叶片和种子中的游离赖氨酸含量分别提高5倍和2倍，下列对玉米性状改变最可行的方法是(　　 )

A．直接改造蛋白质的空间结构，从而控制生物的性状

B．直接对相应的基因进行改造，通过控制酶的合成，从而控制生物的性状

C．直接通过对酶的合成的控制，从而控制生物的性状

D．直接改造相应的mRNA，从而控制生物的性状　

9.在基因工程操作中限制性核酸内切酶是不可缺少的工具酶。下列有关限制性核酸内切酶的叙述错误的是(　)

A．一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列

B．限制性核酸内切酶的活性受温度和pH等因素的影响

C．限制性核酸内切酶可以从某些原核生物中提取

D．限制性核酸内切酶也可以识别和切割RNA

10．单克隆抗体实质上是单个B细胞通过克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的免疫球蛋白。下列有关叙述错误的是　 (　 )

A．在单克隆抗体制备的过程中必须经过至少两次细胞筛选

B．单克隆抗体制备的过程要用到动物细胞培养和细胞融合技术

C．单克隆抗体既在体液免疫中发挥作用，也参与细胞免疫

D． 制备单克隆抗体的过程中，所需的B细胞可以从经过免疫处理的小鼠的脾脏中获得

11.下面为植物组织培养过程流程图解，以下相关叙述不正确的是　 (　 )

A．上述过程中脱分化发生在b步骤，在此过程中植物激素发挥了重要作用

B．再分化发生在d步骤，是愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程

C．从叶组织块到种苗形成的过程说明植物叶片细胞具有全能性

D．人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题

12.下列不是精子、卵细胞发生的区别是(　)

A．初级精母细胞、初级卵母细胞的形成时间

B．减数第一次分裂和减数第二次分裂的时间连续性

C．成熟生殖细胞是否经过变形

D．成熟生殖细胞中染色体的数量

13.用植物细胞工程技术将二倍体天竺葵与二倍体香茅草进行杂交可产生驱蚊香草，使有驱蚊作用的香茅醛随着天竺葵的蒸腾作用散发到空气中，达到驱蚊的效果。下面有关培育过程的叙述，不正确的是(　)

A．原生质体的融合常用PEG作为诱导剂

B．若得到驱蚊香草能通过有性繁殖产生后代，那说明天竺葵与香茅草之间无生殖隔离

C. 由杂种细胞→杂种植株，涉及到细胞的有丝分裂和细胞的分化过程

D．驱蚊香草有四个染色体组，为四倍体

14.下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是(　)

A．培养基中添加蔗糖的目的主要是提供营养

B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化

C．在胡萝卜组织培养的实验中，切取胡萝卜块时强调要切取含有形成层的部分，原因是这部分容易诱导形成愈伤组织

D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的植株基因型相同

15.动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对小鼠的正常细胞和小鼠的癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息不能获得的结论是(　)

A．正常细胞与癌细胞的增殖速率相同

B．有无血清对正常细胞培养的影响不同

C．培养基中补充血清有助于正常细胞的培养

D．培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响较小

16．下列不属于细胞工程应用的是(　)

A．大规模生产干扰素．用于抵抗病毒引起的感染

B．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞　　

C．大规模生产食品添加剂、杀虫剂等　　　

D．利用胚胎移植技术，加快优良种畜的繁殖

17.关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是(　)

A．可以制成诊断盒．用于疾病的诊断 　　　　 　　　　

B．可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗

C．可以利用基因工程技术生产　　　 　　　　　　　　　

D．可以在生物体内生产，不能体外生产

18．在进行植物组织培养时，培养基中的某种化合物被　 ³H标记。一段时间后，发现 ³H只集中在愈伤组织细胞的细胞核、线粒体和叶绿体。则培养基中被标记的化合物最可能是(　)

A．氨基酸　 　　　 　B．核苷酸　　 　 C．葡萄糖　 　　　　 　D．水

19.下列有关绵羊“多利”的说法正确的是(　)

①“多利”的诞生属无性繁殖　 ②“多利”的诞生采用了核移植技术　 ③“多利”的诞生采用了胚胎移植技术　 ④“多利”的诞生采用了动物细胞培养和早期胚胎培养技术

⑤多利羊的产生属于有性繁殖　　　　 ⑥“多利”的诞生涉及体外受精过程

A．①②④　　B．③④⑥⑤　　　 C．①②③④　　　 D．①②③

20.关于牛体外受精胚胎的工厂化生产的叙述正确的是 (　　 )

　　 A．精子和卵子受精形成受精卵后即可移入母牛子宫

　　 B．采集的卵母细胞应立即与精子共同放入培养液才能形成受精卵

　　 C．成熟卵子与收集来的精子相遇形成的受精卵，需培养到一定阶段才可移植

　　 D．体外受精胚胎的工厂化生产即胚胎发育和受精过程只需在体外进行

21.下列关于受精作用及结果的叙述，正确的是　(　)

　A．精卵相互识别的基础是细胞膜的流动性

　B．受精作用发生的场所是输卵管

　 C．使后代产生不同于双亲的基因组合,该过程实现了基因重组　　 　　

　D．后代继承了双亲的全部遗传性状

22.关于受精过程的叙述错误的是 (　　 )

A．获能后的精子与卵子相遇后，释放顶体酶穿过透明带进入放射冠

B．透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障

　　 C．精子与卵黄膜相互融合，精子入卵

　　 D．雄原核形成的同时，卵子完成减数第二次分裂

23.下列关于湿地生态恢复工程的叙述，不正确的是(　)

A．采用了工程和生物措施相结合的方法

B．要建立缓冲带，以尽量减少人类的干扰

C．对湿地的恢复，做到退耕还湿地或建立自然保护区就能奏效

D．湿地被誉为地球的“肾脏”，具有蓄洪防旱，调节气候，自然净化污水，为迁飞的鸟类提供栖息地等作用

24.所谓“实质性等同”是指(　)

A．转基因农作物中的成分完全没有发生改变

B．转基因农作物中的部分成分没有发生改变

C．转基因农作物中只要某些重要成分没有发生改变，就可以认为与天然品种“没有差别”

D．“实质性等同”是对转基因农作物安全性的最终评价

25．下列关于高等哺乳动物受精与胚胎发育的叙述，正确的是(　)

A．绝大多数精卵细胞的识别具有物种特异性

B．卵裂球细胞的体积随分裂次数增加而不断增大

C．囊胚的滋养层细胞具有发育全能性

D．原肠胚的内胚层与外胚层之间的囊腔称为原肠腔

26.下列关于细胞的叙述，错误的是(　)

A.胚胎干细胞可在冷冻条件下保存

B.胚胎干细胞在体外培养能增殖但不能被诱导分化

C.组织的细胞更新包括细胞凋亡和干细胞增殖分化等过程

D.造血干细胞具有分化出多种血细胞的能力，可用于治疗白血病

27．下列关于胚胎工程的叙述正确的是(　)

A．对供体和受体母牛都要进行相同激素处理

B．受精和胚胎的早期培养都需要在体外进行

C．对冲卵获得的原肠胚检查合格后方可移植

D．胚胎分割移植实现同卵多胎的成功率较低

28.科学家将控制某药物蛋白合成的基因转移到白色来亨鸡胚胎细胞的DNA中,发育后的雌鸡就能产出含该药物蛋白的鸡蛋,在每一只鸡蛋的蛋清中都含有大量的药物蛋白;而且这些蛋孵出的鸡,仍能产出含该药物蛋白的鸡蛋.据此分析下列说法不正确的是(　　 )

　　　 A.这些鸡是DNA重组技术的产物　　 B.这种变异属于可遗传的变异

　　　 C.该过程运用了胚胎移植技术　　 D. 该种变异属于定向变异

29．下列关于转基因生物安全性的叙述，错误的是(　)

A．种植转基因作物应与传统农业种植区隔离

B．转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中

C．种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性

D．转基因植物的目的基因可能转入微生物

30.在进行林业工程建设时，一方面要号召农民种树，另一方面要考虑贫困地区农民的生活 问题，如粮食、烧柴以及收入等问题。以上做法依据的生态工程原理是(　)

A．系统整体性原理　　 B．整体性原理 C．系统结构决定功能原　 D．以上都不是

31胚胎工程技术在生产中的应用不包括　　 (　)　 　

A．移植胚胎干细胞使退化的组织修复并恢复正常功能

B．进行胚胎移植充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能

C．采用机械方法将早期胚胎分割产生同卵双胎

D．在小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体

32.如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是(　)

A．将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法

B．将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的只是导入了重组质粒的细菌

C．在人体中，生长激素基因转录出的mRNA只能从垂体细胞中获得。

D．目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长

33.如图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因(kan’)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下列叙述正确的是　 (　　 )

　　 A．构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶

　　 B．愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株

C．卡那霉素抗性基因(kan′)中有该过程所利用的限制性核酸内切酶的识别位点

　　 D．抗虫棉的抗虫特性一定能通过有性生殖稳定遗传给后代

34.单克隆抗体制备过程中所用的骨髓瘤细胞是一种基因缺陷型细胞，其合成核酸的途径能被氨基喋呤阻断。现将从预先注射了某种抗原的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞与上述骨髓瘤细胞混合，加入PEG促融后，再加入含氨基喋呤的培养液。若将这些混合物分装于细胞培养板的小孔中培养(如右图所示)，则小孔中的培养物不可能出现的结果是(　 )

A．没有活细胞，产生抗体

B．没有活细胞，不产生抗体

C．细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阴性

D．细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阳性

35.以下不能说明细胞全能性的实验是(　)

A．菊花花瓣细胞培育出菊花新植株　　　　　　　　　 　　 B．紫色糯性玉米种子培育出植株

C．转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株　　　　 D．番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株

36.下图是利用胚胎工程技术培育优质奶牛的主要步骤，A代表细胞，①②③代表胚胎。下列叙述正确的是(　)

A．胚胎移植可以定向改造动物遗传性状，③需移植到发情的母牛子宫内发育

B．A细胞不一定是受精卵，可以是取自桑椹胚的细胞

C．①②两个胚胎具有相同的遗传物质，通常鉴定胚胎的性别是按图中所示的分割方法取细胞鉴定。

D．在胚胎工程的技术中，胚胎分割，细胞核移植都可以看做是动物无性繁殖的方法。

37.下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是(　)

A．体外受精完成后即可进行胚胎移植操作

B．胚胎干细胞具有发育全能性，它可发育成新个体

C．卵裂期胚胎中细胞数目在不断增加，而有机物的总量却在不断减少

D．胚胎发育的时期依次是卵裂期、囊胚期、原肠胚时期

38.下图是某生态农场生产流程，据图分析下列说法错误的是(　)

A．食用菌和蚯蚓在该生态系统中属于分解者

B．该生态系统达到了能量多级利用的目的

C．因食物链延长，系统总能量利用率降低

D．由于有大量的产品输出，因此该生态农场，除了需要太阳能之外，往往还需要人为补偿输入一些能量，以便长期维持稳定。

39..单一的人工林比天然混合林的稳定性低,容易遭受害虫危害,这主要体现了生态工程的什么原理(　 )

A.物质循环再生原理　　　 B.协调与平衡原理　

C.物种多样性原理　　　　 D.系统整体性原理

40.下列关于细胞工程的有关叙述，不正确的是　　 　 (　)

　　 A．利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术

　　 B．在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生细胞脱分化，染色体变异或基因突变

　　 C．动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体

　　 D．“试管婴儿”主要是“体外受精”和“胚胎移植”的“产物”。

41．(10分)科学家通过基因工程方法，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内，并成功实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株--抗虫棉。其过程大致如下图所示。

(1) Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用T-DNA　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 的特点。Ti质粒的基本单位是　　　　　　　 。

(2)基因工程的核心步骤是　　　　　　　　　　　 　。图中在得到基因表达载体后，要将载体导入农杆菌，往往都要用 　　　　　处理农杆菌。将目的基因导入植物细胞的方法有很多种，除了图中所用的方法之外，还有什么方法　　　　　　　　　　　　　 (写出两种)。

(3) 要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后，是否　　　　　　　　　　 ，需进行检测和鉴定工作这需要通过检测才能知道。在分子水平上，首先要检测抗虫基因是否插入了受体生物细胞的染色体DNA上，检测方法是　　　　　　　　　　 ，需要以 　　　　　　　

　　　　　　　　 　作为探针。在个体生物学水平上的鉴定过程是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　　　　　　　　　　　　　　　　 。　

42．(14分) 右图为牛胚胎移植过程示意图，请回答下列问题。

(1)②阶段常用____________激素对供体母进行处理，其目的是获得更多的卵子，我们把这种处理称为　　　　　　 。卵母细胞要处于　　　　　　 (时期)才能与精子结合。在受精过程中，防止多精入卵第二道屏障是　　　　 　　　　　　。

(2)冲卵能顺利进行的生理基础是　　　　　　　　　　　　

　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(3)ES或EK细胞可以从原始性腺和囊胚的　　　　　 。它的的形态特征是体积小、　　　　　　　 　　　，在培养液中加入分化诱导因子，可诱导其向不同类型的组织细胞分化，体现胚胎干细胞的功能特性是　　　　　　　 。胚胎干细胞具有该功能特性的根本原因是　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

43.(12分)有性生殖的生物产生后代需经过受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：

(1)若a、b表示两种植物体细胞，最终得到体细胞杂交植株的这过程中需要用　　　　 酶去除细胞壁得到原生质体。由d细胞形成杂种植株的原理是________________，这种育种方法的优点是______________________________________。

(2)想要得到单克隆抗体，若b细胞是经过免疫的B淋巴细胞，a细胞为　　　　　 细胞。诱导细胞融合之后，先用　　　 培养基进行筛选得到d细胞。d细胞的优点为　　　 　　　　　　　　　　　　　　　。然后还需进行　　　　　 和抗体检测得到足够数量的能分泌所需抗体的细胞。　 生产上一般不能通过直接培养b细胞来生产单克隆抗体，其主要原因是 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

(3)诱导动物细胞融合的方法与诱导植物细胞融合方法不同的是　　　　　　　　　 。

(4)若a、b分别表示精子和卵子，它们在发生上的重要区别是，哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的储备是在　　　　　 (填写时期)完成的。

44.(14分)研究人员利用基因工程技术对肺癌的治疗进行了大量研究，肺部细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图甲所示，据图回答。

(1)在基因工程中除了选择质粒作为载体，还可以用　　　　　　　　　　 作为载体(写出一种就可)；如果某质粒由1000个脱氧核苷酸组成，脱氧核苷酸平均分子量为a,则该质粒的质量为　　　 　　　　。

(2)图甲中在构建基因表达载体时，酶切目的基因和酶切质粒时，所用的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端必须是　　　　　　 。构建的基因表达载体的组成

有　　　 　　　　　　　　　及标记基因，标记基因的作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(3)EcoR I限制酶只能识别序列一GAATTC一，并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoR I的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

(目的基因可用省略号表示)

(4)原代培养是是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。原代培养随着培养时间的延长和细胞不断分裂，空间因素和营养因素会限制其进一步生长。此时就需要将培养物分割成小的部分(组织细胞分散开)，重新接种到另外的培养器皿内再进行培养，这个过程就称为　　　　　 。图甲中进行传代培养操作时，需要用　 　酶处理贴附在原代培养培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。动物细胞培养的条件有　　　　　　 、　　　　　　 、无菌无毒的环境、温度和PH。细胞的培养液中除了要添加抗生素、糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需添加 　　　　　　　　　　等一些天然成分。

(5)研究发现，let-7基因能影响RAS基因的表达，其影响机理如图乙所示。从分子水平的角度分析，其作用机理是　　　　　　　　　　　　　　　　 　　 　。