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8.(10分)为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示,实验步骤如下图所示。请分析回答下面的问题。
成分 |
含量/g |
KH2PO4 |
1.4 |
Na2HPO4 |
2.1 |
MgSO4.7H2O |
0.2 |
葡萄糖 |
1 |
尿素 |
10 |
琼脂 |
15 |
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL |
(1)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理。
_________________________________________________________________。
(2)培养基中加入尿素的目的是筛选________,这
种培养基属于________培养基。
(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________,实验中需要振荡培养,原因是________。
(4)转为固体培养基时,常采用________接种,获得单菌落后继续筛选。
(5)实验结束后,使用过的培养基应该进行________处理后,才能倒掉。
解析 本题考查从土壤中分离分解尿素的细菌的方法。解题时,应从分解尿素的细菌的代谢特征入手,对整个过程中需要控制的环境条件进行分析。
尿素是培养基中的唯一氮源,因此原则上只有能够利用尿素的微生物才能够在此培养基上生长。由于细菌合成的脲酶将尿素分解为氨,pH升高,故在以尿素为唯一氮源的培养基中加入的酚红指示剂将变成红色;这种培养基属于选择培养基,可筛选目的菌;目的菌生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的尿素和葡萄糖;振荡培养的目的是提供氧气;固体培养基培养时的接种方法常用稀释涂抹平板法或平板划线法;倒掉培养基之前应对其进行灭菌处理。
答案 (1)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,细菌合成的脲酶将尿素分解为氨,pH升高,使酚红指示剂变为红色 (2)目的菌 选择
(3)尿素 葡萄糖 为目的菌提供氧气 (4)稀释涂抹平板法(或平板划线法)
(5)灭菌