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14.(2015.泰州二模)SRY-PCR是对移植前的人胚胎进行性别鉴定的技术。基本操作程序如下:
(1)从被测胚胎的________中取出几个细胞。
(2)以Y染色体上SRY基因(性别决定基因)的一段序列作引物,用被测胚胎DNA作模板进行PCR扩增。根据SRY基因序列设计的引物长度一般为20-24个核苷酸,其不宜过短的原因主要是_________________________________________________。
两种引物中G+C的含量相差不宜过大,原因主要是__________________________
________________________________________________________________________。
(3)最后可用放射性同位素标记的含有SRY基因的特异性DNA序列作________,利用________技术检测扩增产物。如果某早期胚胎检测结果为阳性,则可判断该胚胎发育成的个体性别是________。若该技术岗位上的操作人员为男性,要求一定要戴好手套、口罩和工作帽等,主要原因是_______________________________________________________。
解析 (1)性别鉴定时,由于囊胚中有滋养层细胞和内细胞团细胞,滋养层细胞发育成胎膜和胎盘,而内细胞团细胞发育成胎儿的各种组织,因此宜取滋养层细胞进行鉴定。
(2)如果设计的引物过短,会引起引物之间的随机结合;由于G与C之间的氢键有三个,如果G+C的含量差别过大,低温复性时温度相差较大。(3)基因检测时,应选用放射性同位素标记的目的基因片段为探针;检测目的基因时所用的技术是DNA分子杂交技术;由于SRY基因位于Y染色体上,因此如果检测结果呈阳性,说明该胚胎中含有Y染色体,性别为雄性;如果操作人员为男性,一定要戴好手套、口罩和工作帽等,防止男操作员的SRY基因污染样品。
答案 (1)滋养层 (2)防止引物随机结合(或引物的特异性差) G+C的含量差别过大,低温复性温度难以统一 (3)探针 DNA分子杂交 雄性 男操作员的SRY基因可能污染样品