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15.利用乳腺生物反应器获取药用蛋白具有产量高、成本低等优点。下图所示为培育转基因奶牛获得人血清白蛋白的流程。请回答下列问题:
(1)PCR扩增人血清白蛋白基因时使用的酶是________。要使人血清白蛋白基因在转基因奶牛的乳腺细胞中表达,应将其与________基因的启动子等调控组件重组。
(2)为使供体母牛一次排出多枚卵母细胞,常对其注射________。采集的精子需要经过________,才具备受精能力。
(3)过程①将重组表达载体导入受精卵常用的方法是________。过程②包括________技术和胚胎移植技术;在进行胚胎移植时,需对受体母牛进行________处理。
(4)为了获得母奶牛,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行________。若要检测牛奶中是否含有人血清白蛋白,可采用________技术。
(5)为使人血清白蛋白基因在后代中长期保持,可将转基因奶牛体细胞的________转入________细胞中构成重组细胞,使其发育成与供体具有相同性状的个体,该技术称为________。
解析 (1)PCR扩增使用的酶是热稳定DNA聚合酶,即Taq酶。由于人血清白蛋白基因在转基因奶牛的乳腺细胞中表达,故应将该目的基因与牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组。(2)对供体母牛注射促性腺激素,可促使其一次排出多枚卵母细胞。采集的精子需要经过获能处理后,才具备受精能力。(3)将重组表达载体导入动物细胞常用的方法是显微注射法。过程②是将受精卵在体外培育成早期胚胎后进行移植,故该过程包括早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。在进行胚胎移植时,需对受体母牛注射孕激素,即进行同期发情处理。(4)为了获得母奶牛,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定;若要检测牛奶中是否含有人血清白蛋白,即检测目的基因是否成功表达,可采用抗原-抗体杂交技术。(5)可通过核移植技术,将转基因奶牛体细胞的细胞核转入去核后的卵细胞中,构成重组细胞,并使其发育成与供体具有相同性状的个体,该技术称为克隆。
答案 (1)热稳定DNA聚合酶(Taq酶) 牛乳腺蛋白(乳腺蛋白) (2)促性腺激素 获能(处理) (3)显微注射法 早期胚胎培养(动物细胞培养) 同期发情(孕激素) (4)性别鉴定 抗原-抗体杂交 (5)细胞核 去核的卵 克隆