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34. 2007年诺贝尔生理学或医学奖分别授予美国人马里奥.卡佩基、奥利弗.史密斯和英国人马丁.埃文斯。3位科学家的获奖原因是其研究为“基因靶向”技术的发展奠定了基础。所谓“基因靶向”技术(人们大都称之为基因“敲除”技术)是指利用细胞脱氧核糖核酸(DNA)可与外源性DNA同源序列发生同源重组的性质,定向改造生物某一基因的技术。借助这一从20世纪80年代发展起来的技术,人们得以按照预先设计的方式对生物遗传信息进行精细改造。有了“基因靶向”这一高精度瞄准镜,科学家就可以精确瞄准任何一个基因,使其失去活性,进而研究该基因的功能。请回答下列问题:(每空2分,共16分)
(1)“敲除”一种基因需要分两步来完成:第一步是利用化学“剪刀”,例如用某种酶切除哺乳动物染色体中有某种功能的基因。第二步是用修改过的基因取代原有基因。这里的“某种酶”应该是____________酶。用修改过的基因取代原有基因时还需要____________酶。
(2)假如要“敲除”小鼠的胰岛素基因,请设计出实验步骤:_________________ ____________________________________________________________________________。
给出一种检验胰岛素基因是否被“敲除”的方法:_______________________ ____________________________________________________________________________。
(3)利用细胞工程也可获得可供移植之用的“敲除排斥基因”的老鼠,其过程大致如下图所示:
①促进卵细胞融合最常用的试剂是_______________________________________。
②重组细胞培养成胚胎的过程所用的培养基,从物理性质上看属于_________培养基,培养基中至少要加入水、无机盐、葡萄糖、氨基酸、维生素、促生长因子、微量元素和____________等物质,同时要创造适宜温度、pH和无菌条件,其中需要无菌环境的原因是:
________________________________________________________________________。