（12分）下图是利用转基因技术生产干扰素的简化流程。请分析回答：

(1)过程①使用的         酶能使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的           （化学键）断开。运载体的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过                           而结合。 过程②需要用到        酶，
(2图中A的名称是____________，它重组成功的物质基础是__________________ __________的结构组成相同。
(3)A上应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动干扰素基因转录，该部位称为　　　　。为直接检测干扰素基因是否转录，可从细胞中提取　　　　__与用放射性同位素标记的____________作探针进行分子杂交，。
（4）利用PCR扩增仪大量扩增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要有一段是已知的，以便根据这一序列合成           ，除了该物质和目的基因外，扩增仪中还需加入四种脱氧核苷酸和          酶，并适时调整温度，才能使目的基因数量成指数式增长。
（5）在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是—G′GATCC—。
请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图

（12分）下图是利用转基因技术生产干扰素的简化流程。请分析回答：

(1) 过程①使用的          酶能使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的            （化学键）断开。运载体的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过                            而结合。 过程②需要用到         酶，

(2图中A的名称是____________，它重组成功的物质基础是__________________ __________的结构组成相同。

(3) A上应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动干扰素基因转录，该部位称为　　　　。为直接检测干扰素基因是否转录，可从细胞中提取　　　　__与用放射性同位素标记的____________作探针进行分子杂交，。

（4）利用PCR扩增仪大量扩增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要有一段是已知的，以便根据这一序列合成            ，除了该物质和目的基因外，扩增仪中还需加入四种脱氧核苷酸和           酶，并适时调整温度，才能使目的基因数量成指数式增长。

（5）在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是—G′GATCC—。

请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图

根据模拟制作重组DNA分子的活动，甲DNA分子、乙DNA分子被EcoRI酶切后，即可获得所需的目的基因和质粒，回答以下问题：（已知EcoRI酶识别序列为GAATTC，识别位点为G||A）

（1）绿色硬纸板（甲DNA分子）的碱基序列为：      

……ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC……     

……TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC……

红色硬纸板（乙DNA分子）的碱基序列为：

  ……TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG……      

……AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG……      

其中，           DNA分子含有“目的基因”，            DNA分子是“质粒”。

（2）用剪刀代表进行切割。酶切位点在         （a处还是b处），此化学键称为              。

（3）请用“||”在甲、乙两DNA分子上标出EcoRI的作用位点。

（4）从基因文库中获取目的基因是常用方法，基因文库实际上就是指导入了某种生物不同基因的许多DNA片断的                         的群体。按照其中所含基因的量又可分为               文库和              文库。

（5）基因表达载体的构建是基因工程的关键步骤之一，请根据所给的条件完成下列问题：

     已知有4种限制性核酸内切酶，其中1号和4号切割DNA后产生的是平末端，2和3号酶产生的是黏性末端。含目的基因的DNA片段和质粒的酶切序列如下图所示：

① 请设计酶切方案，构建最佳基因表达载体（重组质粒）                                                                     。

②该重组质粒上有几个复制原点：    ，能用PCR技术扩增吗      （能或不能）

③若用酶2和3切割重组质粒，可以得到几个DNA片段：         。

  若用酶2和1切割重组质粒，可以得到几个DNA片段：         。