豇豆对多种害虫具有抗性，根本原因是豇豆体内具有胰蛋白酶抑制剂基因（CpTI基因）。科学家将其转移到水稻体内后，却发现效果不理想，主要原因是CpTI蛋白质的积累量不足。经过在体外对CpTI基因进行修饰后，CpTI蛋白质在水稻中的积累量得到了提高。修饰和表达过程如下图所示：

请根据以上材料，回到下列问题：

　 （1）CpTI基因是该基因工程的　　　　 基因。在①过程中，首先要用限制性内切酶切开，暴露出　　　　　 ，再用DNA连接酶连接。

　 （2）在该基因工程中，若受体细胞是水稻的体细胞，还需再通过　　　　　　 技术才能获得抗虫水稻的植物体。

　 （3）下列关于基因工程的叙述，正确的是　 （　 ）

　 A．基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因

　 B．通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种限制性内切酶处理载体DNA

　 C．细菌质粒是基因工程常用的载体

　 D．为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体

（4）人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成。通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是 (　　 )

　 A．大肠杆菌　　　 B． 酵母菌　　　 C．T4噬菌体　　　 D．质粒DNA

科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（amp^r为抗氨苄青霉素基因），其中①～②是重组基因的合成过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图作答：

（1）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶              分别对                                 进行切割，切割后产生的DNA片段分别为               种。

（2）培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体Ⅰ中含有                   作为标记基因。

（3）研究人员通常采用                    法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用　　  　　               技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。

［生物――选修３　现代生物科技专题］（15分  每空1分）
下面是一项“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答：
本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在胰岛素-COOH端加上KDEL内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解。将该基因置于CaMV 35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。 
（1）本专利是采用___________方法获得目的基因的。获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同，原因密码子具有___________性，基因序列不同，蛋白质可以相同。要想在体外获得大量该目的基因的片段，可以采用____________技术。该技术中使用的关键酶是________________________ ；原料是____________________。
（2）根据上述摘要，转基因操作时所用的载体是____________，载体上的____________可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。
构建的基因表达载体中含有_______  _______  ______  ______  ____（从下列选项中选择）。
①目的基因  ②CaMV 35S启动子 ③果实专一性启动子2A12    ④引物   
⑤标记基因    ⑥内含子滞留序列      ⑦终止密码子               ⑧终止子
（3）如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用____________技术。该技术中使用的基因探针也可以用来检测___________________ 。还可以从________水平进行鉴定。

农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗病棉花品系。请回答下列问题：
（1）要使运载体与该抗病基因连接，首先应使用__________进行切割。假如运载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该运载体连接的抗病基因分子末端是（　　）