回答下列有关基因工程和克隆技术的问题。（10分）

2006年12月22日，我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：

63、说出绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程中用到了哪些生物工程技术？           　

利用了哪些原理？                      （本题答案从下列所给选项中选择填写）

①转基因技术；②细胞核移植技术；③胚胎移植技术；④干细胞技术；⑤动物细胞培养技术

⑥基因突变；⑦基因重组；⑧动物细胞核具有全能性；⑨动物细胞具有全能性

64、过程①②中必需用到的酶分别是                和                 。绿色荧光蛋白基因之所以能与质粒重组，原因是                                               。

65、早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及               等物质。

通过上图中过程①的方法获取目的基因的数量是有限的，要获得大量的绿色荧光蛋白基因可以利用PCR技术。PCR扩增反应（如下图所示）中加入的TaqDNA聚合酶能在接近沸点的条件下，发挥延伸DNA子链的作用，将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上。请回答：

PCR（DNA聚合酶链式反应）技术示意图：

66、你认为TaqDNA聚合酶一定是从下列哪种生物体细胞中分离提取的？        

A．水母细胞         B．猪胎儿成纤维细胞   　C．极端嗜热菌     D．大肠杆菌

67、下面的表达式不能反映TaqDNA聚合酶的功能，为什么？                           。

68、用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点和标出碱基对数。（2分）

植物的顶芽生长占优势，而侧芽生长受抑制的现象，称为“顶端优势”。某校生物小组的同学欲探究顶端优势是否与植物激素有关，做了如下实验，请完成有关实验内容。

(1)实验目的：______________________________________________________。

(2)实验假设：顶芽产生生长素抑制侧芽生长。

(3)实验材料：发育状况相近的杨树幼苗若干、琼脂块、生长素(ⅠAA)等。

(4)实验步骤：

第一步：选取发育状况相近的杨树幼苗若干，均分为四组，并编号A、B、C、D。

第二步：A组杨树幼苗切除顶芽；B组杨树幼苗______________________________________________；C组杨树幼苗切除顶芽，并在顶芽处放置含生长素的琼脂块；D组杨树幼苗______________________，作为空白对照。

第三步：四组幼苗均在________________的条件下培养一段时间，观察记录每组幼苗________________。

(5)实验结果及结论：

①若_______________________________________________________________，

则说明顶芽抑制侧芽生长与生长素无关。

②若_______________________________________________________________，

则说明顶芽抑制侧芽生长与生长素有关。

胚胎工程是生物技术的重要组成部分，它的研究和应用不仅推动了制药、器官移植医学等领域的变革，而且还加速了畜牧业生产的发展。

请回答下列与胚胎工程有关的问题：

⑴哺乳动物在自然条件下，___________________________________________________

规律是胚胎工程的理论基础。

⑵和体内自然受精一样，体外受精的精子也需要获能，才能与培养成熟的卵细胞完成受精过程。通常采用的体外获能方法有_____________________________两种。

⑶精子和卵子在体外受精形成受精卵后，移入发育培养液中继续培养。培养液除一些无

机盐和有机盐外，还需要添加______________________________________________等营养成分，以及血清等物质。

⑷当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植。将动物的早期胚胎移植到同种且_________________与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。为了获得更多的早期胚胎，常用激素对供体进行______________处理。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞膜       。若要通过胚胎移植获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到____________________阶段的早期胚胎进行       处理，再植入到受体内。若要对早期胚胎进行长期保存，应将其置于     __________________条件下。