1)逆转录法 mRNA 逆转录 ① 2) 限制性内切酶 DNA分子 目的基因 黏性末端 3)目的基因 质粒 DNA连接酶 4)将重组DNA分子导入受体细胞 目的基因的扩增和表达 查看更多

 

题目列表(包括答案和解析)

(10分)mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子,具有自我复制、转录和控制合成蛋白质的功能。mtDNA的类型具有明显的种族特异性。现用两种限制性核酸内切酶M和N切割某人的mtDNA(限制酶M和N的识别序列和切割位点如图1所示),然后通过凝胶电泳分离DNA片段(通电状态下,不同分子量的DNA片段在琼脂中的移动距离不同从而被分离),分析后得到下表。

凝胶电泳结果(1kb=1000对碱基)

(数字表示该片段的存在以及数量)

分子量(kb)

酶M

酶N

酶M+酶N

1.0

1

 

1

2.0

 

 

1

 3.0

 

 

1

4.0

 

 

1

5.0

1

 

 

6.0

 

 

1

7.0

 

1

 

9.0

 

1

 

10.0

1

 

 

(1)该mtDNA的长度为___________kb。在该DNA分子中,M酶与N酶的切割位点分别有____________个。

(2)M酶与N酶切出的能相互粘连的末端能在______________酶的作用下相互连接,请将连接的结果表示出来:_______________________。连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割,请简述理由:________________________________________。

(3)图2为真核细胞的某基因的结构图以及限制酶M和N的切割位点。现用酶切法直接从供体细胞中切割图2中的基因从而获得目的基因,可选用酶______来切割。这个方法虽然操作方便,但切割下的基因中含有不能指导蛋白质合成的区域。因此,目前往往采用逆转录的人工合成的方法,其基本步骤是:__________________。

图2

(4)已知图2中Ⅱ区的碱基数是2000个,其中阴影区域碱基数是800个,空白区域中G 和C的总数共有400个,则由该区转录的mRNA中A和U总数是_____________。

 

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