(一)操作步骤 1.用颈椎脱位的方法处死小白鼠后.迅速剖开腹部取出肝脏.剪成小块尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中.反复洗涤.尽量除去血污.用滤纸吸去表面的液体. 2.将湿重约1g的肝组织放在小平皿中.用量筒量取8ml预冷的0.25mol/L蔗糖一0.003mol/L氯化钙溶液.先加少量该溶液于平皿中.尽量剪碎肝组织后.再全部加入. 3.剪碎的肝组织倒入匀浆管中.使匀浆器下端浸入盛有冰块的器皿中.左手持之.右手将匀浆捣杆垂直插入管中.上下转动研磨3-5次.用3层纱布过滤匀浆液于离心管中.然后制备一张涂片①.做好标记.自然干燥. 4.将装有滤液的离心管配平后.放入普通离心机.以2500rpm.离心15分钟,(1)缓缓取上清液.移入高速离心管中.保存于有冰块的烧杯中.待分离线粒体用,(2)同时涂一张上清液片②做好标记.自然干燥,(3)余下的沉淀物进行下一步骤. 5.用6ml0.25mol/L蔗糖一0.003mol/L氯化钙溶液悬浮沉淀物.以2500rpm离心15分钟弃上清.将残留液体用吸管吹打成悬液.滴一滴于干净的载玻片上.涂片③.自然干燥. 6.将①.②.③涂片用l%甲苯胺兰染色后盖片即可观察. 查看更多

 

题目列表(包括答案和解析)

(8分)为探究植物细胞膜的透性,某同学以红甜菜根(液泡中含有花青素)进行下列实验:

A.将不同切片放在不同温度的蒸馏水中处理1分钟后取出。

B.再分别放在清水中浸泡1小时而获得不同的切片浸出液。

C.测量这些溶液的花青素吸光度,得结果如下图。

请回答以下问题:

(1)上述实验操作步骤的叙述存在着一个明显的不足,没有遵循实验设计的         原则。

(2)已知物质A能促进细胞膜上载体的活性。有人认为:经过不同温度的处理是影响了细胞膜上运载花青素的载体的活性。请你借助上述材料设计实验证明该观点是否正确。

材料用具:略。

实验步骤:

①取两组等量的相同大小的切片,编号,一组加入          ,处理一段时间;另一组不作处理作为对照。

②将两组切片分别放在         获得不同的切片浸出液;

③测量              并进行比较。

(3)预测结果及结论(略)。

 

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回答下列与T2噬菌体侵染细菌的实验有关的问题:

1952年,赫尔希和蔡斯利用同位素标记完成了T2噬菌体侵染细菌的实验,下面为实验的部分步骤:

(1)写出以上图示中的实验的部分操作过程:

第一步:                                                      

第二步:                                                      

第三步:培养一段时间后,在搅拌器中搅拌,然后进行离心。

(2)以上实验结果能否说明遗传物质是DNA?如果不能,请简要补充实验的设计方法(如果要用到标记的实验材料,请说明标记的方法)。                                    

                                                                             

(3)在理论上,图示中的沉淀物中放射性应该为0,但实验数据表明沉淀物中还有一定的放射性,其原因最可能是                                                       

                                            

(4)禽流感病毒侵染人体细胞的过程类似于T2噬菌体侵染细菌的过程,请结合上述实验过程及现象,提出一种获得禽流感疫苗(即病毒的蛋白质衣壳)的新途径:                    

                                       。

 

 

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(9分)尿素是一种重要的农业肥料,但若不经细菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基

成分如下表所示,实验步骤如图所示。请分析回答问题:

KH2PO4

1.4 g

Na2HPO4

2.1 g

MgSO4·7H2O

0.2 g

葡萄糖

10 g

尿素

1 g

琼脂

15 g

将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL

 

 (1)此培养基能否用于植物组织培养?________,理由是                     

 (2)培养基中加入尿素的目的是筛选________,这种培养基属于________培养基。

 (3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________,实验

   需要振荡培养,原因是________________。

 (4)转为固体培养时,常采用________的方法接种,获得单菌落后继续筛选。

 (5) 在进行分离分解尿素的细菌的实验时,A同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有_____(填序号)。

   ①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照

 (6) 简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理:____________________________

   _____________________________________________________________________。

 

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(10分)尿素是一种重要的农业肥料,但若不经细菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类、数量繁多,同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示,实验步骤如图所示。

请分析回答问题:

KH2PO4
1.4 g
Na2HPO4
2.1 g
MgSO4·7H2O
0.2 g
葡萄糖
10.0 g
尿素
1.0 g
琼脂
15.0 g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL
 
 
(1)培养基中加入尿素的目的是筛选________,这种培养基属于________培养基。 
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________,实验需要振荡培养,原因是__________________。
(3)转为固体培养时,常采用________的方法接种,获得单菌落后继续筛选。
(4)下列材料或用具中:①培养细菌用的培养基与培养皿;②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管;③实验操作者的双手。需要灭菌的是________;需要消毒的是________。(填序号)
(5)在进行分离分解尿素的细菌的实验时,A同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有________(填序号)。
①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照
(6)简述土壤中可分解尿素细菌的鉴定方法及原理: _____________。

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2.(17分)(2012·南昌一模)尿素是一种重要的农业肥料,需经细菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题,请分析回答:

(1)如图是利用________法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步________到培养基的表面。除此方法外,常用的微生物接种方法还有________(写一种)。

(2)如果要对培养的菌落进行纯化,在培养基上划线操作中,操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环,目的是对接种环进行________,灼烧的接种环冷却后才能接种的原因是______________________。

(3)下面是两种培养基的配方:

表1:A培养基配方

KH2PO4

Na2HPO4

MgSO4·7H2O

葡萄糖

尿素

琼脂

H2O

1.4 g

2.1 g

0.2 g

10.0 g

1.0 g

15.0 g

1 000 mL

表2:B培养基配方

纤维素粉

Na2HPO4·

NaNO37H2O

KH2PO4

MgSO4·7H2O

KCl

酵母粉膏

H2O

5 g

1 g

1.2 g

0.9 g

0.5 g

0.5 g

0.5 g

1 000 mL

①配制培养基的操作步骤________(用字母顺序回答)。

a.倒平板 b.计算 c.溶化 d.称量 e.灭菌

②通常培养基采用____________法灭菌,在制备固体培养基的倒平板操作时,平板冷凝后,应将平板倒置,目的是________________________。

③如果要分离土壤中能分解尿素的细菌,应选择上述________(A、B)配方的培养基,在该培养基中加入________指示剂,可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。

④据B培养基的成分,所培养微生物的同化作用类型是________。

(4)如果进一步从尿素分解菌中提取出DNA,利用PCR技术扩增,则每次循环复制可分为________________三步。而尿素分解菌能分解尿素的直接原因是它们能合成________,该物质被提取出后的纯化方法通常是____________________________________________________。

(5)在微生物培养过程中,常需要对微生物进行计数,血球计数板是常用的工具,血球计数板的计数室长和宽各为1 mm,深度为0.1 mm,其中25×16型的血球计数板计数室以双线等分成25个中方格,每个中方格又分成16个小方格。一般计数时选取的中方格位于计数室的____________________。下图表示的是其中一个中方格的情况,对该中方格中的酵母菌进行计数的结果是________个。如果计数的几个中方格中的细胞平均数为20个,则1 mL培养液中酵母菌的总数为________个。

(6)抗生素可由微生物产生,具有抑菌作用,能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时,先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌,在27 ℃下培养3天,形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌(图A),继续在同样条件下培养3天,结果如图B。分析结果,得出的结论是(  )

①甲菌产生了抗生素 ②丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制 ③乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制 ④丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长

A.①③      B.①④

C.②③      D.②④

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