2008年10月三位科学家因在发现和研究绿色荧光蛋白方面做出贡献而获诺贝尔化学奖。同月，据英国《每日邮报》报道，美国新奥尔良的科学家已培育出世界首只能在“黑暗处发光”的猫。这只六个月大的猫在日照条件下看起来很正常，但若将它放在一个黑暗的房间里，打开紫外灯后，它的脸部会发出一种明亮的绿光，这是因为它的体内有绿色荧光蛋白的缘故。

（1）绿色荧光蛋白基因最初是从水母中分离得到的，这个基因共包含有5170个碱基对，控制合成由238个氨基酸组成的荧光蛋白，由此推测，翻译该蛋白质的信使RNA碱基数量至少有             个。

（2）在基因工程中获取绿色荧光蛋白基因时，最好采用       的方法。如果基因两端的碱基序列如图甲所示，则构建重组DNA分子时所用的DNA连接酶作用于图甲中的    处。（填“a”或“b”）

（3）图乙是荧光蛋白基因表达过程中的                  阶段，图中3和4代表的核苷酸依次是                    （填中文名称。）

（4）科学家进行此项转基因动物的研究，目的是为寻找由于基因异常所引起疾病的治疗方法。通过特定的方法可以使绿色荧光蛋白基因与特定基因相伴随，从而使科学家更为容易地研究相关遗传疾病。下图是某遗传病的家族遗传图谱（控制基因为B和b），请据图分析回答：

此遗传病的致病基因是        性基因，最可能位于         染色体上。由此推测II₂基因型是      ，II₃和II₄如果再生一个孩子，表现正常的概率是     

Ⅰ.2003年诺贝尔生物学奖授予美国的两位科学家，以表彰他们在细胞膜通道(水通道和离子通道)方面做出的贡献。这两位科学家的研究工作对彻底揭开水和离子跨膜运输的机理以及对疾病的治疗具有重大的意义。请回答下列问题：
⑴组成水通道和离子通道的物质是在核糖体上合成的，可见水通道和离子通道实际是由细胞膜上的      形成的。
⑵物质进入细胞都要通过细胞膜，在用呼吸抑制剂处理细胞后，脂肪酸、Na+进入细胞速度会明显减慢的是      。
⑶物质通过细胞膜与膜的流动性有密切关系，为了探究温度对膜的流动性的影响，有人做了下述实验：分别用红色和绿色荧光剂标记人和鼠细胞膜上的蛋白质，然后让两个细胞在37℃条件下融合并培养，40分钟后，融合的细胞膜上红色和绿色________分布。
①有人认为该实验不够严密，其原因是缺少          。
②本实验可以通过相同的时间后，观察红色和绿色荧光物质在细胞膜上分布的情况判断实验结果，还可以通过                               。
③该实验可能得出的结论是                                              。
Ⅱ(实验探究)在低温条件下, 将叶片置于研钵中, 加入某种溶液研磨后, 用离心法进行分离. 第一次分离成沉淀P₁(含细胞核和细胞壁碎片)和上清液S₁; 随后又将S₁分离成沉淀P₂(含叶绿体)和上清液S₂; 第三次离心将S₂分离成沉淀P₃(含线粒体)和上清液S₃; 最后一次将S₃分离成沉淀P₄(含核糖体)和上清液S₄. 现请回答下列问题(填入相应的字母符号, 如S₁～S₄, P₁～P₄, 见下图).

(1)细胞的DNA主要存在于________部分.
(2)若要继续分离得到与光合作用有关的酶, 应选取________部分.
(3)若要研究合成蛋白质的细胞器, 应选取________部分.
(4)含有与有氧呼吸有关的酶的是________.

2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：

（1）图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。若限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓GATCC一，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC一。在质粒上有酶I的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
①请画出质粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端。
②在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来? ＿＿＿＿＿。理由是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）GFP基因与目的基因一起构建到载体上不影响目的基因的表达，也不影响由目的基因控制合成的蛋白质的结构与功能,且对细胞无毒性作用，因此GFP基因可以运用作为基因表达载体上的＿＿＿＿＿＿。
（3）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。然后还要通过＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿技术来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上。
（4）为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的方法，做超数排卵处理，并将所采集到的卵母细胞在体外培养到＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿期即可通过显微操作将其细胞核去除。
（5）早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿等物质。
（6）绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程属于＿＿＿＿＿＿生殖。目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：＿＿＿＿＿＿(用数字表示)。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计
③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)
④表达出蓝色荧光蛋白

Ⅰ.2003年诺贝尔生物学奖授予美国的两位科学家，以表彰他们在细胞膜通道(水通道和离子通道)方面做出的贡献。这两位科学家的研究工作对彻底揭开水和离子跨膜运输的机理以及对疾病的治疗具有重大的意义。请回答下列问题：

⑴组成水通道和离子通道的物质是在核糖体上合成的，可见水通道和离子通道实际是由细胞膜上的      形成的。

⑵物质进入细胞都要通过细胞膜，在用呼吸抑制剂处理细胞后，脂肪酸、Na+进入细胞速度会明显减慢的是      。

⑶物质通过细胞膜与膜的流动性有密切关系，为了探究温度对膜的流动性的影响，有人做了下述实验：分别用红色和绿色荧光剂标记人和鼠细胞膜上的蛋白质，然后让两个细胞在37℃条件下融合并培养，40分钟后，融合的细胞膜上红色和绿色________分布。

①有人认为该实验不够严密，其原因是缺少          。

②本实验可以通过相同的时间后，观察红色和绿色荧光物质在细胞膜上分布的情况判断实验结果，还可以通过                               。

③该实验可能得出的结论是                                              。

Ⅱ(实验探究)在低温条件下, 将叶片置于研钵中, 加入某种溶液研磨后, 用离心法进行分离. 第一次分离成沉淀P₁(含细胞核和细胞壁碎片)和上清液S₁; 随后又将S₁分离成沉淀P₂(含叶绿体)和上清液S₂; 第三次离心将S₂分离成沉淀P₃(含线粒体)和上清液S₃; 最后一次将S₃分离成沉淀P₄(含核糖体)和上清液S₄. 现请回答下列问题(填入相应的字母符号, 如S₁～S₄, P₁～P₄, 见下图).

(1)细胞的DNA主要存在于________部分.

(2)若要继续分离得到与光合作用有关的酶, 应选取________部分.

(3)若要研究合成蛋白质的细胞器, 应选取________部分.

(4)含有与有氧呼吸有关的酶的是________.