44.（10分）探针是指以放射性同位素、生物素或荧光染料等进行标记的已知核苷酸序列的核酸片段，可用于核酸分子杂交以检测目标核苷酸序列是否存在。下图一是某实验小组制备的两种探针，图二是探针与目的基因杂交的示意图。请回答下列有关问题：

（1）核酸探针与目标核苷酸序列间的分子杂交遵循__________。设计核苷酸序列是核酸探针技术关键步骤之一。图一所示的两种核酸探针（探针2只标注了部分碱基序列）都不合理，请分别说明理由__________、__________。

（2）cDNA探针是目前应用最为广泛的一种探针。制备cDNA探针时，首先需提取、分离获得__________作为模板，在__________的催化下合成cDNA探针。利用制备好的-珠蛋白基因的cDNA探针与-珠蛋白基因杂交后，出现了如图二中甲、乙、丙、丁等所示的“发夹结构”，原因是____________________。

（3）基因工程中利用乳腺生物反应器生产-抗胰蛋白酶，应选用__________切割含有目的基因的DNA片段和载体，并用__________方法导入__________中，再利用SRY探针（Y染色体上的性别决定基因）进行检测，将检测反应呈__________（选填“阳”、“阴”）性的胚胎进行移植培养。

44.（10分）探针是指以放射性同位素、生物素或荧光染料等进行标记的已知核苷酸序列的核酸片段，可用于核酸分子杂交以检测目标核苷酸序列是否存在。下图一是某实验小组制备的两种探针，图二是探针与目的基因杂交的示意图。请回答下列有关问题：

（1）核酸探针与目标核苷酸序列间的分子杂交遵循__________。设计核苷酸序列是核酸探针技术关键步骤之一。图一所示的两种核酸探针（探针2只标注了部分碱基序列）都不合理，请分别说明理由__________、__________。

（2）cDNA探针是目前应用最为广泛的一种探针。制备cDNA探针时，首先需提取、分离获得__________作为模板，在__________的催化下合成cDNA探针。利用制备好的-珠蛋白基因的cDNA探针与-珠蛋白基因杂交后，出现了如图二中甲、乙、丙、丁等所示的“发夹结构”，原因是____________________。

（3）基因工程中利用乳腺生物反应器生产-抗胰蛋白酶，应选用__________切割含有目的基因的DNA片段和载体，并用__________方法导入__________中，再利用SRY探针（Y染色体上的性别决定基因）进行检测，将检测反应呈__________（选填“阳”、“阴”）性的胚胎进行移植培养。

[生物一一一选修3：现代生物科技专题]（15分）
绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和鲴织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。

（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA—，N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA—，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用的限制酶足③过程需要的酶是____．
（2）④过程将基因表达载体导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是__________。
（3）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可采用__________技术进行检测。
（4）图中猪的卵母细胞应处于________期，此时在显微镜下可观察到在卵黄膜和透明带之间有__________个极体。用于核移植的导入了基因表达载体的猪胎儿成纤维细胞一般都选用传代10代以内的细胞的原因是__________。
（5）由重组细胞培育得到绿色荧光转基因克隆猪过程中涉及到的现代生物技术手段有__________，生殖方式为__________。
（6）假如该过程得到了一个早期胚胎，为了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法，分割时应选择__________或囊胚。对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意__________。得到绿色荧光转基因克隆猪（雌性）之后，可用__________处理，使之超数排卵，提高其繁育能力。

[生物一一一选修3：现代生物科技专题]（15分）

绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和鲴织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。

（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA—，N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA—，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用的限制酶足③过程需要的酶是____．

（2）④过程将基因表达载体导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是__________。

（3）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可采用__________技术进行检测。

（4）图中猪的卵母细胞应处于________期，此时在显微镜下可观察到在卵黄膜和透明带之间有__________个极体。用于核移植的导入了基因表达载体的猪胎儿成纤维细胞一般都选用传代10代以内的细胞的原因是__________。

（5）由重组细胞培育得到绿色荧光转基因克隆猪过程中涉及到的现代生物技术手段有__________，生殖方式为__________。

（6）假如该过程得到了一个早期胚胎，为了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法，分割时应选择__________或囊胚。对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意__________。得到绿色荧光转基因克隆猪（雌性）之后，可用__________处理，使之超数排卵，提高其繁育能力。

（1）现已查明，引起人类SARS（非典型性肺炎）的病原体是一种烈性冠状病毒。这种病毒侵染人体后有2～14天的潜伏期，而后可使感染者出现发热（体温高于38℃），多有干咳，可有胸闷，严重者呼吸窘迫；胸部X检查有不同程度片状、斑片状浸润性阴影或网状改变，白细胞无明显升高，有5%左右的死亡率。我国和世界各国科学家和医务工作者全力抗争以抑制该病蔓延。

请回答有关问题：

①冠状病毒侵入人体后，人体内的蛋白质种类会增多，增多的蛋白质主要来自_______。

②科学工作者经研究，发现了数种快速检验SARS病原体的方法，以正确诊断SARS。以下与诊断无关的是________________________________。

A．PCR技术：体外基因复制技术，可在几十分钟内把病毒基因扩展到数百万倍

B．免疫荧光技术：用荧光物质的特异性标记病毒或与病毒有关的物质

C．酶联法：用特殊制备的病毒蛋白质与病人血清中的与病毒相关的抗体特异性结合，通过“酶联”反应，使试剂发生颜色变化

D．镜检法：用光学显微镜直接观察病人痰液、唾液或漱口液，以发现病毒

③战胜SARS，最关键的是应研制相关的________________________。

A．消毒剂　　　 B．疫苗　　　　C．抗多种病毒的药物　D．天敌

（2）有关专家发现，SARS病毒在复制其核酸时，每1万个碱基就可能出现一个差错；并预测，SARS病毒有可能在未来的进化过程中毒性逐渐减弱。试根据遗传和进化的原理，回答以下问题：

①病毒在复制核酸时，碱基出现差错，是否一定意味着其翻译产生的蛋白质出现变化？为什么？

②SARS病毒如何在未来的进化过程中毒性逐渐减弱，试作出合理的解释。