基因工程是在现代生物学、化学和工程学基础上建立和发展起来的，并有赖于微生物学理论和技术的发展运用。请回答下列相关问题：

（1）在基因工程基本操作程序中，其核心步骤是         。将目的基因导人植物细胞采用最多的方法是            。

（2）不同种生物之间的基因移植成功，从分子水平分析，基因工程的主要理论依据是不同生物的         相同，也说明了生物共用一套            。

（3）研究中发现，番茄体内的蛋白酶抑制剂对害虫的消化酶有抑制作用，导致害虫无法消化食物而被杀死，人们成功地将番茄的蛋白酶抑制剂基因导入玉米体内，玉米获得了与番茄相似的抗虫性状，玉米这种变异的来源属于            。

（4）科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，并用基因工程的方法将该基因导人金茶花叶片细胞的染色体DNA上，经培养长成的植株具备了抗病性，这说明目的基因已经     .

（22分）请阅读下列几段文字后回答：

（一）A．有人把蚕的DNA分离出来，用一种酶“剪切”下制造丝蛋白的基因，再从细菌细胞中提取一种叫“质粒”的DNA分子，把它和丝蛋白基因拼接在一起再送回细菌细胞中，结果，此细菌就有生产蚕丝的本领。

B．1991年，我国复旦大学遗传所科学家成功的进行了世界上首例用基因疗法治疗血友病的临床实验。

（1）这些实验属于___________工程，所有这些实验的结果，有没有生成前所未有的新型蛋白质？____________。

（2）A段中实验结果的细菌能生产蚕丝，说明__________。在将质粒导入大肠杆菌时，一般要用____________处理该菌，以使处于 ____________ 细胞状态，以便吸收周围环境中的DNA分子。

（3）人类基因组计划（HGP）测定了人体中 ___________ 条染色体的双链DNA分子的脱氧核苷酸序列，B段中血友病基因疗法中有关的染色体是 ____________  染色体。

（二）科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接，实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造，生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌症治疗。

(1)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞，在诱导剂的作用下与________融合，形成____________细胞，并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点在于__________________________，可大量制备。

(2)与植物原生质体的融合相比，动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用________________________诱导融合。

 

根据相关材料，回答问题

细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以分裂的方式进行增殖，细胞分裂的方式有三种，它们是有丝分裂、无丝分裂，减数分裂。多细胞生物一般由一个受精卵通过细胞的增殖而增加细胞数目，通过分化形成多种形态、结构、功能不同的细胞以组成生物体，在细胞分化过程中，由于受到某些因素的影响，有些细胞不能正常地完成细胞分化而形成癌细胞，请据细胞分裂、分化、癌变的有关知识，回答下列问题。

1．一般情况下，下列细胞具有细胞周期的是

[　　]

2．下列细胞中，全能性最高的是

[　　]

3．如果某动物体内的癌细胞在分裂后期，其核内有24个染色体，则它的正常细胞中的DNA分子数为

[　　]

4．下列三种细胞分裂方式，属体细胞增殖方法的是

[　　]

5．下列三种细胞分裂方式中，在分裂过程中不出现纺锤丝的是

[　　]

6．在某植物细胞有丝分裂的下列阶段中，需要消耗ATP是

①细胞从环境中吸收氨基酸，核苷酸阶段

②DNA复制与有关蛋白质合成阶段

③着丝点移到至赤道面

④染色体移向两极

[　　]

7．如图为某高等动物细胞有丝分裂某一时期图解，下列说法正确的是

①该图与植物细胞有丝分裂同一时期的主要区别是由中心体发生星射线，形成纺锤体

②该图中的染色单体数为8，染色体数为4

③动物细胞有丝分裂过程中没有丝状物与着丝点相连

④中心体是高等动物细胞特有的

[　　]

回答下列Ⅰ、Ⅱ题

 Ⅰ.机体的免疫系统对核辐射损伤很敏感，主要表现在核辐射会诱导免疫细胞凋亡。人白细胞介素18（IL-18）能促进免疫细胞的增殖和分化，提高机体免疫功能。某科研小组开展了“IL-18对核辐射诱导小鼠脾细胞凋亡的抑制作用”的研究，方法如下：

    选取若干实验小鼠，随机分成三组：①组无辐射损伤；②组辐射损伤（⁶⁰Co照射，下同）；③组先辐射损伤，1天后注射IL-18.14天后分别取各组小鼠脾细胞进行体外培养，在培养了Oh、12h、24h、48h后，进行细胞凋亡检测，得到的细胞凋亡相对值如下表：

组别	处理方法	0 h	12 h	24 h	48 h
①	无辐射损伤	0.046	0.056	0.048	0.038
②	辐射损伤	0.460	0.420	0.530	0.520
③	辐射损伤+IL–18	0.239	0.265	0.279	0.269

(1)选择脾细胞作为本实验材料，是因为脾脏是集体重要的_______器官。已知IL-18是一种淋巴因子，淋巴因子与______都属于免疫活性物质。

(2)自爆凋亡是由遗传机制决定的______死亡。从表中数据可知，细胞凋亡相对值越小，说明发生凋亡的脾细胞数目越______;从_______（组别）两组数据可知，IL-18能够抑制脾细胞凋亡。

(3)科研小组还设置了第④组实验，方法是先注射IL-18，3天后进行辐射损伤，14天后的实验操作同前三组。与第③组相比，设置第④组的目的是______。

(4)在作物育种中，可用⁶⁰Co放出的γ涉嫌使作物发生基因突变，从中筛选出优良的变异类型，这种育种方法叫做______育种，其特点是______（至少答出两点）。

Ⅱ.使用染色剂染色是生物学实验常用的方法，某同学对有关实验做了如下归纳：

实验	观察对象	染色剂	实验结果
①	花生子叶细胞的脂肪颗粒	苏丹Ⅲ	脂肪颗粒被染成橘黄色
②	人口腔上皮细胞中的DNA和RNA分布	毗罗红甲基绿	细胞内染成绿色的面积显著大于染成红色的面积
③	人口腔上皮细胞中的线粒体	健那绿	线粒体呈现蓝绿色
④	洋葱根尖分生组织细胞的有丝分裂	龙胆紫	间期细胞不着色，分裂期细胞染色体着色

(1)上述实验结果的归纳，正确的有_______（实验序号）。

(2)实验②和实验④在染色之前，都使用了一定浓度的盐酸处理。其中，实验②用盐酸可改变______通透性，加速染色剂进入细胞；实验④用盐酸与酒精混合，对材料进行解离。在两个实验操作中，都要注意盐酸浓度，处理材料时的温度和______。

(3)健那绿使线粒体着色与线粒体内膜的酶系统有关。线粒体内膜上的酶主要催化有氧呼吸的第______阶反应，该反应变化是____________。

 

回答下列Ⅰ、Ⅱ题
Ⅰ.机体的免疫系统对核辐射损伤很敏感，主要表现在核辐射会诱导免疫细胞凋亡。人白细胞介素18（IL-18）能促进免疫细胞的增殖和分化，提高机体免疫功能。某科研小组开展了“IL-18对核辐射诱导小鼠脾细胞凋亡的抑制作用”的研究，方法如下：
选取若干实验小鼠，随机分成三组：①组无辐射损伤；②组辐射损伤（⁶⁰Co照射，下同）；③组先辐射损伤，1天后注射IL-18.14天后分别取各组小鼠脾细胞进行体外培养，在培养了Oh、12h、24h、48h后，进行细胞凋亡检测，得到的细胞凋亡相对值如下表：

组别	处理方法	0 h	12 h	24 h	48 h
①	无辐射损伤	0.046	0.056	0.048	0.038
②	辐射损伤	0.460	0.420	0.530	0.520
③	辐射损伤+IL–18	0.239	0.265	0.279	0.269

(1)选择脾细胞作为本实验材料，是因为脾脏是集体重要的_______器官。已知IL-18是一种淋巴因子，淋巴因子与______都属于免疫活性物质。
(2)自爆凋亡是由遗传机制决定的______死亡。从表中数据可知，细胞凋亡相对值越小，说明发生凋亡的脾细胞数目越______;从_______（组别）两组数据可知，IL-18能够抑制脾细胞凋亡。
(3)科研小组还设置了第④组实验，方法是先注射IL-18，3天后进行辐射损伤，14天后的实验操作同前三组。与第③组相比，设置第④组的目的是______。
(4)在作物育种中，可用⁶⁰Co放出的γ涉嫌使作物发生基因突变，从中筛选出优良的变异类型，这种育种方法叫做______育种，其特点是______（至少答出两点）。
Ⅱ.使用染色剂染色是生物学实验常用的方法，某同学对有关实验做了如下归纳：

实验	观察对象	染色剂	实验结果
①	花生子叶细胞的脂肪颗粒	苏丹Ⅲ	脂肪颗粒被染成橘黄色
②	人口腔上皮细胞中的DNA和RNA分布	毗罗红甲基绿	细胞内染成绿色的面积显著大于染成红色的面积
③	人口腔上皮细胞中的线粒体	健那绿	线粒体呈现蓝绿色
④	洋葱根尖分生组织细胞的有丝分裂	龙胆紫	间期细胞不着色，分裂期细胞染色体着色

(1)上述实验结果的归纳，正确的有_______（实验序号）。
(2)实验②和实验④在染色之前，都使用了一定浓度的盐酸处理。其中，实验②用盐酸可改变______通透性，加速染色剂进入细胞；实验④用盐酸与酒精混合，对材料进行解离。在两个实验操作中，都要注意盐酸浓度，处理材料时的温度和______。
(3)健那绿使线粒体着色与线粒体内膜的酶系统有关。线粒体内膜上的酶主要催化有氧呼吸的第______阶反应，该反应变化是____________。