下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题。
【资料1】巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达【5’AOX1和3’AOX1（TT）分别是基因AOX1的启动子和终止子】。
【资料2】巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达。

（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上            、           限制酶识别序列， 这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。
（2）酶切获取HBsAg基因后，需用               将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取               。
（3）步骤3中应选用限制酶           来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。
（4）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用                   方法进行检测。
（5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入           以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达。
（6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行               并分泌到细胞外，便于提取。

(12分)请分析下表，回答有关实验的问题。

（1）A组实验注入试剂以后，对试管液体的处理方法与B组有何不同？               。

（2）B组试剂的使用方法与A组比较，不同之处是B组：                             。

（3）C组实验中，在显微镜下观察不到染色体，原因是                             。如果一个同学用洋葱根尖制作临时装片，且在低倍镜下观察到洋葱根尖分生区的一个处于中期的细胞位于视野右上方，想在高倍镜下进一步观察这个细胞的染色体的形态和数目，请从下列选项中选择正确的操作步骤的代码并排序                        。

①转动粗准焦螺旋 ②转动细准焦螺旋 ③调节反光镜、光圈增加进光量 ④转动转换器，换上高倍镜 ⑤向左下方移动装片 ⑥向右上方移动装片 ⑦向上移动装片 ⑧向下移动装片

洋葱根尖细胞生命活动中，细胞核起非常重要的重要，对细胞核功能的较为全面的阐述应该是                     

（4）某同学做D实验后，绘制了四种光合色素在滤纸上分离情况（图 1 所示）。据图分析，主要吸收红光的色素是             （填序号）。 另一同学由于研磨绿叶过程中粗心大意，漏加了某些试剂或药品，导致实验结果不理想（图2所示），请指出该同学漏加的试剂或药品            。

（5）为研究温度对酶活性的影响，某同学根据已提供的实验器材设计出了如下实验方案

你认为该方案存在哪些问题？（4点）

斑马鱼的酶D由17号染色体上的D基因编码。具体纯合突变基因（dd）的斑马鱼胚胎会发出红色荧光。利用转基因技术将绿色荧光蛋白（G）基因整合到斑马鱼17号染色体上，带有G基因的胚胎能够发出绿色荧光。未整合G基因的染色体的对应位点表示为g。用个体M和N进行如下杂交实验

⑴在上述转基因实验中，将G基因与质粒重组，需要的两类酶是??????? 和???????? 。将重组质粒显微注射到斑马鱼受精卵中,整合到染色体上的G基因?????????????? 表达后，使胚胎发出绿色荧光。

根据上述杂交实验推测：

⑵M的基因型是??????????? （选填选项前的符号）

a. DDGG???????? b. DDgg??????? c. Ddgg?????? d. DdGg

⑶杂交后，出现红·绿荧光（既有红色又有绿色荧光）胚胎的原因是亲代??????? （填“M”或“N”）的初级精（卵）母细胞在减数分裂过程中， 同源染色体的__________发生了交换，导致染色体上的基因重组。

（13分 ）三位美国科学家由于在端粒和端粒酶方面的重大发现获得了2009年的诺贝尔生理学或医学奖。端粒是染色体末端由DNA重复序列（一TTAGGG一）和相关蛋白组成的一种特殊结构，具有稳定染色体结构及完整性的功能。但随着染色体复制与细胞分裂的不断进行，端粒会逐渐缩短，待缩短至一定程度则细胞不能继续分裂而逐渐走向衰老和凋亡。端粒酶由RNA和蛋白质构成，能够利用自身RNA为模板使端粒末端的DNA重复序列得以延长，使端粒保持一定长度，为细胞的持续分裂提供必要的遗传基础。

（1）随着细胞中端粒长度的缩短，细胞的增殖能力将逐渐_______。研究发现，端粒酶在不分裂的体细胞中一般不表现出活性，据此推测，下列人体细胞中具有端粒酶活性的是___________，判断依据_________________。

①胚胎干细胞②心肌细胞③造血干细胞④成熟红细胞

（2）端粒酶催化的反应过程中，遗传信息的流向是____________。

（3）癌变的细胞中具有较高活性的端粒酶，除常规的癌症治疗方法外，通过寻找能够________癌细胞中端粒酶活性的物质也使癌症的治疗成为一种可能。

（4）研究表明，癌细胞和正常分化细胞在有氧条件下产生的ATP总量没有明显差异，但癌细胞从内环境中摄取并用于细胞呼吸的葡萄糖是正常细胞的若干倍。下图是癌细胞在有氧条件下葡萄糖的部分代谢过程，据图分析回答问题：

①图中A代表细胞膜上的___________，葡萄糖进入癌细胞后，在代谢过程中可通过某些代谢过程形成非必需氨基酸，也可通过形成五碳糖进而合___________作为DNA复制的原料。

②在有氧条件下，癌细胞呼吸作用的方式为___________。与正常细胞相比，①～④ 过程在癌细胞中明显增强的有___________（填编号），代谢途径发生这种变化的意义在于能够___________，从而有利于癌细胞的增殖。

③细胞在致癌因子的影响下___________基因的结构发生改变，进而调控___________的合成来改变代谢途

径。若要研制药物来抑制癌症患者细胞中的异常代谢途径，图中的过程__________（填编号）不宜选为作

用位点。

根据基因工程原理，回答以下问题：

Ⅰ：如图是基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图，请据图回答：

（1）完成过程②、③必需的酶分别是    、    。

（2）在利用A、B获得C的过程中，一般用    酶切割A和B，使它们产生相同的末端，再加入    ，才可形成C。

（3）取自大肠杆菌的物质B，在基因工程中起    作用，必须具备的条件是    。(至少写出两个)

Ⅱ：干扰素是是抗病毒的特效药，成分是一种糖蛋白，传统的生产方法是从人的白细胞内提取，每升人血只能提取0.05μg，所以价格昂贵。现在某基因公司用图示方式生产干扰素：

（1）从人的淋巴细胞中取出    ，使它同质粒相结合，然后移植到酵母菌体内获得干扰素。

（2）科学家成功地把人的干扰素基因移植到烟草的DNA分子上，使烟草获得了抗病毒的能力，试分析：

①人的基因之所以能接到植物体内，其物质基础是    。

②烟草有了抗病毒的能力，这表明烟草体内产生了    。烟草植株产生这种新性状(变异性状)的来源属于    。

③若要鉴定干扰素基因是否进入烟草细胞，可采用的检测方法是    ；若要鉴定干扰素

基因是否翻译成干扰素，可采用    。这些检测方法都属于分子检测。

（3）如果将携带干扰素基因的重组质粒导入二倍体植物细胞，经培养、筛选获得一株有抗病毒特性的转基因植物。经分析，该植物的某一染色体携带有目的基因（因此可以把它看作是杂合子）。理论上，在该转基因植物自交F1代中，出现具有抗病毒特性的植物的概率是    。